大鼠应激性溃疡模型复制及埃索美拉唑的干预效果

杨丽娟　陈立松　李　冰　段大航　邹春旭　谬欣格　刘艳波

(北华大学基础医学院机能实验部，吉林　吉林　132013)



大鼠应激性溃疡模型复制及埃索美拉唑的干预效果

杨丽娟陈立松李冰段大航邹春旭1谬欣格1刘艳波

(北华大学基础医学院机能实验部，吉林吉林132013)

〔摘要〕目的复制大鼠应激性溃疡动物模型并进行预防性治疗。方法24只大鼠随机分成3组，每组8只。实验前埃索美拉唑组灌胃埃索美拉唑2.4 mg/kg，模型组灌胃生理盐水1 ml/d，共3 d，正常对照组不做任何处理。采用冷藏法制作应激性胃溃疡大鼠模型。对比3组胃黏膜的溃疡程度并测定胃内pH值变化。结果正常对照组胃黏膜表面光滑，呈粉白色，无任何溃疡面。其他两组均有不同程度胃溃疡，以模型组溃疡程度最严重，沿着胃黏膜褶皱凸起的部位有多发的条索状出血带及点状出血，呈咖啡色，黏膜水肿、糜烂、溃疡严重；与模型组比较，埃索美拉唑组胃溃疡程度明显减轻(P<0.05)。与正常对照组比较，模型组胃内pH值降低(P<0.05)；与模型组比较，埃索美拉唑组胃内pH值有一定程度增加。结论冷应激可用来复制大鼠胃溃疡模型，埃索美拉唑对胃溃疡具有预防作用。

〔关键词〕应激性胃溃疡；埃索美拉唑

1北华大学第一临床学院

第一作者：杨丽娟(1980-)，女，实验师，硕士，主要从事机能实验学研究。

当机体内外环境发生改变或者受到社会、心理因素刺激时，可引起一系列全身性非特异性适应反应，称为应激或应激反应。在遭受各类重伤(包括大手术)、重病和其他应激情况下，机体出现胃、十二指肠黏膜的急性病变称应激性溃疡，其主要表现为黏膜糜烂、浅溃疡、渗血等，少数溃疡可较深或穿孔，当溃疡侵蚀大血管时，可引起大出血。患者一旦并发应激性溃疡大出血，其病死率可达50%以上〔1〕。老年人常见的疾病中，如脑出血、脑梗死、心肌梗死等原发病的基础上可诱发应激性溃疡，是严重的并发症之一，而且较非老年组预后差〔2〕。本实验旨在复制应激性胃溃疡大鼠模型及探讨埃索美拉唑对胃溃疡的防治机制。

1材料与方法

1.1实验动物Wistar大鼠24只，雌雄不拘，体重180～250 g，由吉林大学白求恩医学院实验动物中心提供。随机分为正常对照组、模型组和埃索美拉唑组，每组8只。

1.2药品与器材海尔冰箱、大鼠固定器(成都泰盟)、pH计(上海雷磁)、哺乳动物手术器械一套、大鼠灌胃器、玻璃板、放大镜、埃索美拉唑、10%甲醛，0.9%生理盐水等。

1.3实验前准备实验前以2.4 mg/kg埃索美拉唑灌胃，模型组给予1 ml生理盐水灌胃，共3 d。最后一次给药后所有大鼠均禁食24 h，自由饮水。正常对照组不做特殊处理。

1.4应激性胃溃疡模型复制除正常对照组外，其他两组固定在大鼠固定器内，倒置放入冰箱4℃冷藏室2 h后取出。

1.5胃内pH测定模型复制完毕，取下大鼠，用25%乌拉坦腹腔麻醉，4 ml/kg。沿腹部中线纵行打开腹腔，找到胃，分别结扎贲门和幽门下方一段十二指肠后剪断胃与食管及十二指肠连接处，取出胃。为避免针头造成的创伤被误认为溃疡，所以要从十二指肠段打入生理盐水2 ml，轻轻震荡后取出胃液，离心，1 000 r/min,5 min，用上清液进行胃内批pH值测定。

1.6胃溃疡观察从十二指肠处向胃内注射10%甲醛溶液约10 ml(根据胃的大小掌握剂量，充盈即可，向胃内注射甲醛时注意要缓慢推注，避免用力过猛使甲醛迸出造成不必要的伤害或将胃撑破)，再将胃放入10%甲醛溶液中浸泡15 min固定；取出胃，沿着胃大弯剖开，用生理盐水将胃内食糜轻轻冲洗干净，将胃平放于玻璃板上，用放大镜观察溃疡大小及数量，判定溃疡指数。

1.7结果判定溃疡的严重程度根据文献〔3〕标准来判定：斑点糜烂计1分；糜烂长度<1 mm 2分；1～2 mm 3分；2～3 mm 4分；>4 mm 5分；如果宽度>1 mm则加倍，并累计得分。≥5分为较大、较深的溃疡，3～4分为中度溃疡，1～2分为轻度溃疡。

1.8统计学方法利用SPSS13.0 统计软件进行t检验。

2结果

2.1各组胃黏膜溃疡程度的变化正常对照组胃黏膜表面光滑，呈粉白色，无水肿、无溃疡。模型组和埃索美拉唑组胃打开后，可以看到沿着胃黏膜褶皱凸起的部位有多发的条索状出血带及点状出血，主要集中在有腺区，呈咖啡色，黏膜水肿、糜烂、溃疡明显，以模型组最为严重；与模型组比较，埃索美拉唑组溃疡程度明显减轻(P<0.05)，见图1。

图1各组胃大体形态改变

2.2各组胃溃疡严重程度比较正常对照组后胃腺部光滑，无斑点糜烂；模型组1～2分的溃疡共有21个，3～4分30个，≥5分23个，埃索美拉唑组1～2分的溃疡共有28个，3～4分19个，≥5分2个，各组间胃溃疡严重程度差异显著(P<0.05)，见表1。

表1　各组胃溃疡严重程度比较±s,n=8，个)

与正常对照组比较:1)P<0.05，与模型组比较:2)P<0.05；下表同

2.3各组胃内pH值变化及最终胃黏膜溃疡指数判定与正常对照组比较，模型组胃内pH值降低(P<0.05)，与模型组比较，埃索美拉唑组胃内pH值有一定程度增加(P<0.05)。模型组溃疡指数与正常组有明显差异(P<0.05)，埃索美拉唑组与正常对照组和模型组溃疡指数均差异明显(P<0.05)。见表2。

表2　各组胃液pH值变化及胃黏膜溃疡

3讨论

重伤重病时应激性溃疡发病率可达75%～100%，是重症监护室常见的并发症之一，对疾病的发展、预后具有重要的影响〔4〕。应激性溃疡的发生机制主要与以下因素有关：①胃黏膜缺血：应激时交感-肾上腺髓质系统的强烈兴奋，释放大量缩血管物质，腹腔内脏血管收缩，胃黏膜缺血缺氧，局部产生微循环障碍，造成胃肠黏膜的损害。胃黏膜缺血后，其上皮细胞生成的HCO3-和黏液减少，使得胃黏膜防御功能下降。此时，反流入胃黏膜内的H+增加，加之胃黏膜缺血，不能及时运走H+，导致溃疡形成。另一方面，当胃黏膜缺血时，细胞能量代谢障碍，局部三磷酸腺苷(ATP)生成受到抑制，黏膜表面上皮细胞更新缓慢，再生和修复能力降低，也是应激性溃疡形成的基本原因之一。②应激时，下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)兴奋，导致糖皮质激素分泌增加。目前有两种观点，一种认为糖皮质激素增加，使胃酸和胃蛋白酶分泌增多，加重了胃黏膜损伤，对机体有害。另一种观点则通过实验证实了糖皮质激素是保护激素，利用糖皮质激素受体阻断剂米非司酮，使糖皮质激素产生减少，应激后胃黏膜损伤加重〔5～7〕。③神经内分泌功能失调〔8、9〕，当应激发生时，血中促肾上腺皮质激素增加，前列腺素减少〔10〕，大量的氧自由基也参与了应激性溃疡形成〔11〕等。

本实验采用的是倒置冷应激刺激，一方面冷应激时交感肾上腺髓质系统强烈兴奋，胃黏膜供血相对减少；另一方面盐酸产生增加，同时由于倒置，盐酸进入到肠道减少，使得胃内盐酸进一步聚集，加重胃黏膜损伤。再者，倒置时胆汁、胰液会逆流入胃，在胃内积存，损伤胃黏膜表面细胞。已有报道〔12〕，胆汁中的胆盐可降低胃黏膜的电位差，增加胃黏的通透性，使H+更容易通过胃黏膜；并且胆盐对黏膜上皮细胞膜的脂质有溶解作用，导致胃黏膜损伤。除阿司匹林和酒精外，胆盐是造成胃黏膜损害排行第三位的物质〔13〕。

埃索美拉唑呈弱碱性，是奥美拉唑的S-异构体。为壁细胞中质子泵的特异性抑制剂，在壁细胞泌酸微管的高酸环境中浓缩并转化为活性形式——次磺酸酰胺，从而抑制该部位的H+/K+-ATP酶，对基础胃酸分泌和刺激的胃酸分泌均产生抑制作用。本实验说明埃索美拉唑对可预见的应激性溃疡(如临床大手术前)到来之前可以预防性使用，达到预防或减轻溃疡程度的效果。

4参考文献

1王建枝,殷莲华.病理生理学〔M〕.第8版.北京：人民卫生出版社,2014:126.

2郑兴军,唐志锋.老年人应激性溃疡35例临床分析〔J〕.中国社区医师，2015;31(2):37-9.

3Lo SK,Leung FW,Guth PH.Protection against absolute-etha-nol-induced gastric antral and corpus mucosal injury:a groas and histologic study〔J〕.Dig Dis Sci,1988;33(11):1403-8.

4Marik PE,Vasu T,Hirani A,etal.Stress ulcer prophylaxis in the new millennium:a systematic review and meta-analysis〔J〕.Crit Care Med,2010;38(11):2222-8.

5许涛,李兆申,彭国林,等.军事应激对新兵消化道疾病相关激素水平的影响〔J〕.解放军医学杂志,2007;32(3):193-5.

6欧珠美朵,马洪升.冷束缚应激状态下大鼠内源性糖皮质激素与肠屏障功能损害的关系〔J〕.胃肠病学和肝病学杂志,2010;19(3):261-4.

7李志坤,王福文.应激性胃黏膜损伤发生机制的研究进展〔J〕.胃肠病学,2014;19(4):242-4.

8石剑峰.应激性溃疡防治的研究进展〔J〕.现代预防医学,2013;40(1):166-7,170.

9Zeitoun A,Zeineddine M,Dimassi H.Stress ulcer prophylaxis guidelines:are they being implemented in lebanese health care centers〔J〕?World J Gastrointest Pharmacol Ther,2011;2(4):27-8.

10万利军.应激性溃疡的形成机制〔J〕.中国病理生理杂志,1993;9(5):664-6.

11李勋,余安国,邓镇平,等.大鼠应激性溃疡发病机理及防治研究〔J〕.中国普外基础与临床杂志,2000;7(3):138-40.

12贠健,赵浩亮.应激性溃疡的发病机制和预防〔J〕.医学综述,2005;11(8):742-4.

13黄莛庭.腹部外科手术并发症〔M〕.北京:人民卫生出版社，2000:188-95.

〔2014-11-17修回〕

(编辑苑云杰)

通讯作者：刘艳波(1974-)，女，博士，副教授，硕士生导师，主要从事病理生理学及医学机能实验学研究。

基金项目：北华大学健峰教研基金资助项目(2014062504)

〔中图分类号〕R573.1

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2015)22-6364-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.22.021