MDR水平检测筛选食管癌化疗药物的效果分析
2015-01-31袁昌道
袁昌道
MDR水平检测筛选食管癌化疗药物的效果分析
袁昌道
【摘要】目的 分析MDR水平检测筛选食管癌化疗药物的效果。方法检测124例食管癌患者化疗药物处理后MDR基因表达水平。结果 食道癌肿瘤组织经不同药物处理后药组MDR表达水平高于敏感组。结论 MDR基因水平可以为个体化疗提供指导。
【关键词】MDR;食管癌;敏感性
作者单位:462300河南省漯河市郾城区人民医院消化内科
Analysis the Effect of MDR Level Detection in Screen Esophagus Cancer of Chemotherapeutics
YUAN Changdao Luohe City Yancheng District The People's Hospital Gastroenterology Department in He’nan Province, Luohe 462300, China
[Abstract]Objective To analysis the MDR level detection of screening of esophageal cancer chemotherapy drugs. Methods Test 124 cases of patients with esophageal cancer after chemotherapy drug treatment of MDR gene expression levels. Results The esophageal tumor treatment group treated with different drugs MDR expression level is higher than sensitive group. Conclusion The MDR gene level can provide guidance for individual chemotherapy.
[Key words]MDR, Esophageal cancer, Sensitivity
食管癌目前治疗采用手术治疗和辅助化疗,在对患者进行化疗前,药敏试验起着关键作用[1]。MDR水平检测能较好的预测肿瘤细胞对药物耐受性[2]。本研究分析MDR水平检测筛选食管癌化疗药物的效果,具体报道如下。
1 材料与方法
1.1 一般资料
选择2001年1月~2010年1月我院收治食管癌患者124例,均经病理、影像学确诊[3]。男81例,女43例,年龄31~72岁,平均年龄(53.2±11.4)岁。淋巴结转移:有31例,无93例。手术标本86例,淋巴结活检18例,穿刺标本20例。1.2仪器和试剂
选择性培养基、荧光酶-荧光素冻干品购自南京建成生物研究所。逆转录试剂盒由美国sigma公司提供。雷勃MK 3荧光测定仪由美国赛默飞世尔公司提供。
1.3化疗药物
化疗药物选择常规抗癌药物。唑来膦酸(江苏正大天晴药业股份有限公司,国药准字H20113138)、长春瑞滨(法国皮尔·法伯制药公司,H20030660)、表柔比星(山东新时代药业有限公司,国药准字H20123294)。
1.4RT-PCR检测MDR基因表达水平
取新鲜食道癌肿瘤组织和癌旁组织,剪成小块,加入1 ml Trizol,研磨,4℃裂解,共30 min,按照实验过程提取mRNA,试剂盒程序逆转录合成cDNA。PCR反应体系:95℃ 预变性5 min;95℃变性30 sec,复性45 sec,72℃延伸1 min,共26个循环;72℃延伸10 min。产物采用1.5%琼脂糖凝胶电泳进行分离。实时荧光PCR定量检测MDR水平。
1.5药物敏感性
IC 50<25%、PPC及IC 90<100%,PPC为高度敏感。IC 50<25%、PPC及IC 90>100%,PPC为中度敏感;IC 50>25%、PPC及IC 90>100%,PPC为轻度敏感。IC 50>25%、PPC及IC 90<100% PPC为耐药;其中体外有效:高度敏感或中度敏感;体外有效:轻度敏感或耐药[1]。
1.6统计学方法
采用统计学软件SPSS17.0分析数据,计量资料以(x-±s)表示,
采用t检验,计数资料采用χ2检验,P<0.05,差异具有统计学意义。
2 结果
2.1患者癌组织及癌旁组织MDR基因表达水平
癌组织MDR基因表达水平(2.87±0.81)高于癌旁组织(-1.59±2.33),P<0.05,差异具有统计学意义。
2.2药敏结果
药敏检查结果为:唑来膦酸、长春瑞滨、表柔比星、唑来膦酸+长春瑞滨、唑来膦酸+长春瑞滨+表柔比星耐药:2.26±0.87)、(2.12±1.26)、(1.69±1.43)、(0.59±2.53)、-0.58±2.69),敏感:(1.58±1.56)、(1.41±1.38)、(1.85±1.53)、(-1.28±2.49)、(-3.12±2.37)。食道癌肿瘤组织经不同药物处理后MDR基因表达水平对比,P<0.05,差异具有统计学意义。耐药组MDR表达水平高于敏感组,敏感组MDR表达水平和耐药组MDR表达水平对比,P<0.05,差异具有统计学意义。不同药物处理后敏感组MDR表达水平差异明显,联合用药组更加明显。
2.3MDR基因表达与化疗药物敏感性分析
不同化疗药物处理肿瘤细胞后耐药情况:唑来膦酸耐受15例,MDR基因高表达60.0%,低度敏感22例,中度敏感66例,高度敏感21例;长春瑞滨耐受9例,MDR基因高表达66.7%,低度敏感17例,中度敏感80例,高度敏感7例;表柔比星耐受14例,MDR基因高表达64.3%,低度敏感30例,中度敏感51例,高度敏感29例;唑来膦酸+长春瑞滨耐受6例,MDR基因高表达66.7%,低度敏感34例,中度敏感45例,高度敏感39例;唑来膦酸+长春瑞滨+表柔比星耐受8例,MDR基因高表达75.0%,低度敏感27例,中度敏感33例,高度敏感56例;52例常规化疗药物耐受,34例MDR基因显示为高表达。敏感组联合用药组的高敏感例数较高。
3 讨论
化疗是治疗恶性肿瘤的有效手段,不同肿瘤患者对相同的化疗药物表现不同的敏感性,并出现耐药性,尤其多药耐药性对化疗的效果更加明显。因此,化疗药物的敏感性试验对患者的药物的筛选非常重要[3-4]。本研究中,在针对不同的患者进行化疗方案设计时,采用肿瘤组织体外细胞培养,并进行相关的药敏实验,通过检查MDR的表达水平来预测癌细胞对化疗药物敏感性。通过RT-PCR检测不同患者的MDR基因表达水平,124例食管癌患者中,有52例常规化疗药物发生耐受性,其中34例MDR基因显示为高表达,因此,针对敏感性的患者进一步进行化疗方案的调整,结果不同药物组合中高度敏感例数有所改变。
总之,采用化疗药物敏感性试验和MDR基因表达水平检测分析效果显著。
参考文献
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·技术应用·
doi:10.3969/j.issn.1674-9308.2015.26.018
【文章编号】1674-9308(2015)26-0025-02
【文献标识码】B
【中图分类号】R735.1