核桃饼粕多酚纯化工艺及其抗氧化活性的研究

梁杏，张旭，陈朝银，赵声兰*，梁永菊，鲁晓芳

（1.云南中医学院中药学院，云南昆明650500；2.昆明理工大学生命科学与技术学院，云南昆明650500）

核桃饼粕多酚纯化工艺及其抗氧化活性的研究

梁杏1，张旭1，陈朝银2，赵声兰1*，梁永菊1，鲁晓芳1

（1.云南中医学院中药学院，云南昆明650500；2.昆明理工大学生命科学与技术学院，云南昆明650500）

研究大孔树脂纯化核桃饼粕多酚的工艺，比较AB-8、HPD-100、D101、X-5、NKA-9五种大孔树脂对核桃饼粕多酚的分离纯化效果。结果表明，HPD-100为分离纯化核桃饼粕多酚的最佳大孔树脂，其最佳纯化工艺为上样液pH值为4.0，质量浓度4.0 mg/mL，流速2 BV/h，体积1.8 BV，以体积分数为75%乙醇洗脱，洗脱流速4 BV/h，洗脱体积3 BV。用该工艺纯化后，核桃饼粕多酚的纯度从26.63%提高到81.10%，回收率为87.33%。纯化后的核桃饼粕多酚对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟基自由基（·OH）、过氧化氢（H2O2）和超氧阴离子自由基（·）清除作用均呈现量效关系，半数抑制浓度IC50分别为481.18 μg/mL、151.43 μg/mL、8.19 μg/mL和202.83 μg/mL，对DPPH和·OH清除能力较VC强，具有深入研究的价值。

核桃饼粕；多酚；大孔吸附树脂；纯化；抗氧化活性

体内过量的自由基会破坏健康细胞，侵害人体内的蛋白质、酶等物质，加速机体衰老进程并诱发癌症、心脑血管疾病等病变[1]。植物多酚是一类天然抗氧化剂，能通过清除自由基，对自由基诱发的生物大分子损伤起到保护作用，维持细胞膜的流动性和蛋白质的构型构象，防止辐射诱发的脱氧核糖核酸（deoxyribose nucleic acid，DNA)断裂，具有抗突变、抗肿瘤、抗癌症、抗衰老、降血脂等作用[2-9]。核桃富含多酚类化合物[10]，ZHANG Z J等[11]从核桃分离到7种多酚化合物，其中4种多酚物质对二苯代苦味酰（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除能力高于水溶性生育酚（Trolox）当量。核桃饼粕为核桃榨油后的副产物，含有丰富的多酚类物质，目前多作为动物饲料，附加值低[12-13]。本研究采用大孔树脂吸附法，研究核桃饼粕多酚的分离纯化及其抗氧化活性，为高效开发利用核桃饼粕资源提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

核桃饼粕：云南汇智源食品有限公司；没食子酸对照品：上海同田生物技术股份有限公司；大孔树脂NKA-9、AB-8、D101、X-5、HPD-100：河北沧州宝恩吸附材料科技有限公司；DPPH试剂：美国Sigma公司；福林-酚（Folin-Ciocaileu）试剂：北京索莱宝科技有限公司；牛血清蛋白：上海新兴医药保健品科技开发中心；葡萄糖、维生素C：天津市风船化学试剂科技有限公司；硫酸亚铁、1.10-菲啰啉、三（羟甲基）氨基甲烷、氯化钾、过氧化氢30%、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、焦性没食子酸、醋酸钠、无水乙醇、无水碳酸钠、冰乙酸、硫酸、盐酸等均为国产分析纯。

1.2 仪器与设备

UV759S紫外-可见分光光度计：上海精科科学仪器有限公司；BS214D电子分析天平：奥豪斯仪器有限公司；洗脱柱（φ1.2 cm×50.0 cm）：中国科学院昆明植物研究所玻璃仪器加工厂；ZNHW电热套：巩义市予华仪器有限责任公司。1.3实验方法

1.3.1 没食子酸标准曲线的绘制

采用Folin-Ciocaileu比色法[5]，精密称取没食子酸对照品0.0050g，蒸馏水溶解并定容至50mL，摇匀，得100μg/mL没食子酸对照品储备液，临用现配。用移液管分别移取1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL没食子酸对照品储备液于10 mL容量瓶中，蒸馏水定容至刻度，摇匀，得质量浓度分别为10 μg/mL、20 μg/mL、30 μg/mL、40 μg/mL、50 μg/mL没食子酸工作液。分别吸取没食子酸工作液1 mL于10 mL容量瓶，加5 mL 10%福林酚试剂，摇匀，5 min后加7.5%碳酸钠溶液4mL，摇匀后避光反应1h，测定波长765nm处吸光度值，得没食子酸标准曲线回归方程Y=0.010 9X+ 0.011 9，相关系数R=0.999 2，其中X为没食子酸溶液质量浓度C（μg/mL），Y为吸光度值A。多酚含量及多酚损失率计算公式如下：

式中：C0为滤液中多酚质量浓度，μg/mL；V0为滤液体积，mL；M为核桃饼粕干质量，g。

式中：X3为处理前原液多酚量，mg；X4为处理后多酚量，mg。

1.3.2 多糖含量测定方法

采用苯酚-硫酸法[14]，精密称取葡萄糖20 mg，蒸馏水溶解并定容至100 mL，摇匀，得葡萄糖母液。分别吸取0、0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL葡萄糖母液于具塞试管中，用蒸馏水补至2.0 mL，加6%苯酚1.0 mL，浓硫酸5.0 mL，摇匀冷却，室温放置20 min，测波长490 nm处吸光度值，以葡萄糖质量浓度（X）为横坐标，吸光度值（Y）为纵坐标，得葡萄糖标准曲线回归方程Y=0.057 2X-0.007 5，相关系数R=0.999 4。多糖沉淀率计算公式如下：

式中：C1为处理前多糖质量浓度，μg/mL；V1为处理前体积，mL；C2为处理后多糖质量浓度，μg/mL；V2为处理后体积，mL。

1.3.3 蛋白质标准曲线的绘制

精密称取牛血清蛋白100 mg，蒸馏水溶解并定容至100 mL，得1 mg/mL的标准蛋白质溶液。分别取标准蛋白质溶液0、0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL于不同试管中，用蒸馏水补足到1 mL，加5 mL福林-酚试剂甲，混匀，放置10 min，加0.5 mL福林-酚试剂乙，摇匀，放置30 min，测定波长500 nm处吸光度值，得牛血清蛋白标准曲线Y=0.6842X+0.0214，相关系数R=0.9990，其中，X为牛血清蛋白含量mg/mL，Y为吸光度值A。

1.3.4 上柱液制备

核桃饼粕粉碎，过60目筛，在液固比50∶1（mL∶g），乙醇体积分数50%条件下，用电热套加热至73℃，回流提取2次，每次1 h，过滤，浓缩，配成1 mg/mL样液，按样液∶无水乙醇（V/V）1∶0.25、1∶0.5、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8、1∶9加入无水乙醇，静置30 min，4 500 r/min，离心20 min，取上清液，所得除去部分多糖和蛋白质的核桃饼粕多酚提取液，回收乙醇，浓缩备用，即为上柱液。

1.3.5 大孔树脂优选

分别精密称取预处理好的5种（X-5、HPD-100、D101、AB-8、NKA-9）大孔树脂5 g，置于250 mL具塞锥形瓶中，加入1 mg/mL核桃饼粕多酚50 mL，于110 r/min、28℃摇床中，振摇吸附6 h，取样测定多酚含量，用蒸馏水清洗2～3次，加入体积分数80%乙醇50 mL，在110 r/min、28℃摇床中，振摇解吸6 h，取样测定多酚质量浓度。树脂的吸附量、吸附率和解吸率计算公式如下：

式中：C0为起始多酚质量浓度，mg/mL；C1为平衡多酚质量浓度，mg/mL；V1为吸附液体积，mL；M为树脂干质量，g。

式中：C0为起始多酚质量浓度，mg/mL；C1为平衡多酚质量浓度，mg/mL。

式中：C0为起始多酚质量浓度，mg/mL；C1为平衡多酚质量浓度，mg/mL；V1为吸附液体积，mL；C2为解吸液多酚质量浓度，mg/mL；V2为解吸液体积，mL。

（1）上样液pH值对吸附的影响

精密称取优选并预处理好的大孔树脂5 g于250 mL具塞锥形瓶中，加入质量浓度为1 mg/mL，pH值分别为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0核桃饼粕多酚样液50 mL，瓶口密封，110 r/min、28℃摇床中，振摇吸附6 h，取样测定多酚含量，分析上样液pH值对树脂吸附核桃饼粕多酚的影响。

（2）上样液质量浓度对吸附的影响

在确定的pH值、流速4 BV/h的条件下，控制上样液质量浓度分别为0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL、4.0 mg/mL、6.0mg/mL。检测漏出液多酚质量浓度，漏出液多酚质量浓度达上样液质量浓度的10%（泄漏点）停止上柱，考察上样液质量浓度对树脂吸附核桃饼粕多酚的影响。

（3）上样液流速对吸附的影响

在确定的pH值及上样液质量浓度条件下，控制上样流速分别为1 BV/h、2 BV/h、4 BV/h、8 BV/h。检测漏出液多酚质量浓度，考察上样液流速对树脂吸附核桃饼粕多酚的影响。

1.3.6 树脂动态吸附特性

按确定的吸附条件上柱，分部收集漏出液，测定漏出液中核桃饼粕多酚量，以上样液体积BV为横坐标，漏出液核桃饼粕多酚质量浓度C1/上柱液质量浓度C0为纵坐标，绘制动态吸附曲线。

1.3.7 树脂洗脱条件的优化

乙醇体积分数对洗脱的影响：按确定的条件上柱，吸附平衡后，用3 BV蒸馏水快速淋洗树脂柱。控制洗脱液体积3 BV，洗脱流速4 BV/h，洗脱液乙醇体积分数分别为65%、75%、85%进行洗脱，计算解吸率。

洗脱液体积对洗脱的影响：按确定的条件上柱，吸附平衡后，用3 BV蒸馏水快速淋洗树脂柱。按确定的洗脱液质量浓度，洗脱流速2BV/h，控制洗脱液体积分别为10mL、20 mL、30 mL、40 mL、50 mL、60mL、70mL、80mL、90mL、100mL进行洗脱，计算解吸率。

流速对洗脱的影响：按确定的条件上柱，吸附平衡后，用3 BV蒸馏水快速淋洗树脂柱。按确定的洗脱液质量浓度及确定的洗脱液体积，控制洗脱流速分别为2 BV/h、4 BV/h、6 BV/h、8 BV/h进行洗脱，计算解吸率。

洗脱特性试验：按确定的吸附条件上柱，吸附平衡后，3 BV蒸馏水快速淋洗树脂柱。用确定的洗脱条件进行洗脱，收集洗脱液，测定，以洗脱液体积（BV）为横坐标，洗脱液中核桃饼粕多酚质量浓度（mg/mL）为纵坐标，绘制洗脱曲线。

1.3.8 核桃饼粕多酚体外抗氧化活性

（1）对过氧化氢（H2O2）的清除作用[5]

取10 mL具塞试管，分别加以50 mmol/L pH 7.4磷酸盐缓冲溶液配制的40 mmol/L H2O2溶液2.5 mL、核桃饼粕多酚溶液，以VC为阳性对照，以不加样品的H2O2溶液为空白对照，以不加H2O2溶液为样品空白对照组，用水补足至10 mL，混匀，10 min后测量吸光度值A230nm，过氧化氢清除率计算公式如下：

式中：A0为空白对照组吸光度值，A1为样品组吸光度值，A2为样品空白对照组吸光度值。

（2）对羟自由基（·OH）的清除作用[5]

采用Fention反应体系，利用邻二氮菲与Fe2+反应生成有色配合物，该配合物在波长536 nm处有最大吸收的原理测定。H2O2/Fe体系产生的羟自由基（·OH）氧化邻二氮菲-Fe2+生成邻二氮菲-Fe3+，A536nm值减少，待测样品若对体系中·OH有清除作用，则可抑制A536nm减少。取10 mL具塞试管，以VC为阳性对照，分别依次加入核桃饼粕多酚溶液或等浓度VC溶液1 mL，0.75 mmol/L FeSO4溶液1 mL，0.75 mmol/L邻二氮菲1 mL，0.01%H2O2溶液1 mL，37℃保温1 h，测定吸光度值A536nm。损伤管和未损伤管不加抑制剂，损伤管含1 mL H2O2，未损伤管不加H2O2。羟基自由基清除率计算公式如下：

式中：A0试剂未损伤管吸光度值，A1试剂损伤管吸光度值，A2样品未损伤管吸光度值，A3样品损伤管吸光度值。

采用邻苯三酚自氧化法，取10 mL具塞试管，依次加入50 mmol/L pH值为8.2的Tris-HCl缓冲液1.5 mL，蒸馏水1.5 mL，摇匀，25℃恒温20 min，取出后立即加入25℃预热3 mmol/L邻苯三酚溶液0.3 mL，迅速混匀，在波长325 nm处每隔30 s测定1次吸光度值，计算邻苯三酚的自氧化速率ΔA对照，按上法在加入邻苯三酚前，先加入核桃饼粕多酚溶液，测定ΔA样品。超氧自由基清除率计算公式如下：

式中：ΔA对照为1 min内对照管吸光度的变化值；ΔA样品为1 min内对照管吸光度的变化值。

（4）对DPPH自由基清除作用[15]

准确称取DPPH试剂0.008 0 g用无水乙醇溶解定容至100 mL，得0.2 μmol/L的DPPH贮备液。取4 mL DPPH贮备液加入到4mL核桃饼粕多酚溶液中，充分混合，静置30min，于波长517 nm处测定其吸光度值。DPPH自由基清除率计算公式如下：

式中：A1为4 mL DPPH溶液+4 mL样品溶液的吸光度值；A2为4 mL样品提取液+4 mL乙醇的吸光度值；A3为4 mL DPPH溶液+4 mL乙醇的吸光度值。

2 结果与分析

2.1 乙醇体积分数对核桃饼粕多酚提取液中多糖、蛋白质及多酚的影响

核桃饼粕多酚提取液中的糖类、蛋白质等杂质会引起大孔树脂中毒（较多的糖类、蛋白质等杂质导致大孔树脂吸附能力下降，甚至消失），因此用乙醇沉淀多糖和蛋白质，结果见表1。由表1可知，提取液中乙醇体积分数为50%时多糖沉淀最多，达23.36%，乙醇体积分数为87.5%时蛋白质沉淀最多，达71.23%，乙醇体积分数为20%时多酚损失率最小，为0.59%，综合考虑多糖、蛋白质沉淀率和多酚损失率，核桃饼粕多酚粗提液中乙醇体积分数20%为宜。

2.2 大孔吸附树脂的优选

2.2.1 醇沉对大孔树脂静态吸附和解吸的影响

由表2可知，大孔树脂对核桃饼粕多酚的静态吸附和解吸效果均显著提高，且醇沉后X-5、AB-8、NKA-9、D101、HPD-100大孔树脂对核桃饼粕多酚吸附率分别为68.38%、77.12%、63.51%、74.09%、78.62%，解吸率分别为74.20%、78.58%、69.03%、70.58%、83.89%，其中，HPD-100大孔树脂的吸附和解吸效果最佳，因此选择HPD-100大孔树脂进行后续实验。

2.2.2 HPD-100静态吸附动力学曲线

由图1可知，0.5 h内HPD-100对核桃饼粕多酚快速吸附，0.5～1.0 h内吸附速度变缓，1.0 h后吸附达到饱和，故静态吸附1.0 h适宜。

2.2.3 pH值对HPD-100静态吸附的影响

由图2可知，低pH值有利于吸附，pH值为2.0，吸附量为13.818 8 mg/g，pH值升高，吸附量减少，pH值为8.0，吸附量下降到9.7156mg/g。主要是吸附质以离子形态存在时不易被吸附树脂吸附，吸附质以分子态存在时易被吸附树脂吸附，核桃饼粕多酚是一种弱酸性物质，pH值升高，以离子形式存在；pH值下降，多以分子态存在，易被树脂吸附，但当pH值低于一定值后核桃饼粕多酚几乎完全以分子态存在，故pH值为4.0效果最佳。

2.2.4 乙醇体积分数对HPD-100静态解吸的影响

由图3可知，乙醇体积分数20%～80%时，核桃饼粕多酚解吸率随乙醇体积分数增加而增加，可能是核桃饼粕总多酚成分较为复杂，乙醇体积分数增加，其溶解度增大，同时也增大了大孔树脂的溶胀，使核桃饼粕多酚容易被洗脱下来，但乙醇体积分数超过80%时解吸率又下降。因此，静态解吸时，用乙醇洗脱适宜体积分数为80%。

2.3 HPD-100树脂动态吸附条件的优化

2.3.1 上柱液质量浓度对HPD-100吸附的影响

由图4可知，上柱液质量浓度分别为0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL、4.0 mg/mL、6.0 mg/mL，漏出液多酚质量浓度达上样液质量浓度的10%（泄漏点），上柱液核桃饼粕多酚量分别为47.5 mg、75.0 mg、140.0 mg、200.0 mg、192.0 mg。在0.5～4.0 mg/mL范围，上柱液多酚总量随着上柱液质量浓度的增加而增大，在4.0～6.0 mg/mL范围，上柱液体积随质量浓度增加而减少。上柱流速一定时，随上样液质量浓度增大，与多酚竞争吸附的杂质随之增加，多酚在树脂内部扩散能力降低。充分考虑树脂的吸附和效率，上柱液质量浓度4.0 mg/mL为宜。

2.3.2 上柱流速对HPD-100吸附的影响

由图5可知，仅改变流速，上柱流速1 BV/h、2 BV/h、4 BV/h、8 BV/h达泄漏点时，上柱液多酚量分别为264 mg、 216 mg、200 mg、144 mg。随着流速的增加，吸附量随之减少，可能是流速较小，多酚分子有足够的时间与树脂的内表面接触，有利于吸附，减少多酚的漏出，提高其吸附率，但流速太小，操作周期过长；上柱流速太快，多酚溶液与大孔树脂的接触时间短，易发生泄漏，降低吸附率，因此，上柱流速以2 BV/h为宜。

2.3.3 HPD-100树脂动态吸附动力学特性曲线

由图6可知，上样液体积在低于0.33 BV时，没有核桃饼粕多酚漏出；上柱液0.33～0.75 BV核桃饼粕多酚漏出较快；在0.75～1.80 BV漏出速度减缓；到达1.80 BV时，漏出液达到上柱液10.8%，所以上样体积选择1.80 BV为宜。2.3.4 HPD-100树脂洗脱条件的优化

（1）乙醇体积分数对洗脱的影响

由图7可知，乙醇体积分数65%～75%，洗脱率随乙醇体积分数增加而增加，乙醇体积分数75%到85%，洗脱率有所降低。综合图3和图7结果，乙醇体积分数选择75%，洗脱率可达99.6%。

（2）乙醇体积对洗脱的影响

由图8可知，体积分数为75%乙醇洗脱能力与其用量呈正相关，用量越大，解吸率越大。洗脱剂＜20 mL，几乎没有洗脱，洗脱剂90 mL，解吸率99.6%，洗脱剂100 mL时，核桃饼粕多酚几乎被完全洗脱下来。从节约成本和核桃饼粕多酚含量出发，体积分数为75%乙醇洗脱体积以90mL为宜。

（3）乙醇流速对洗脱的影响

由图9可知，流速为2BV/h，解吸率100%；流速为4BV/h，解吸率99.6%；而流速8 BV/h，解吸率只有87.5%。流速太快，解吸率降低，流速太慢使洗脱时间增加。故体积分数75%乙醇洗脱流速宜控制在4BV/h为宜。

（4）HPD-100动力学洗脱特征曲线

由图10可知，HPD-100大孔吸附树脂对核桃饼粕多酚有良好的洗脱性能，体积分数75%乙醇1 BV就开始大量洗脱核桃饼粕多酚，至1.33BV时洗脱到最大值3.8 mg/mL，之后洗脱速率下降，当洗脱液达3 BV时核桃饼粕多酚洗脱完全。因此，用3 BV的体积分数75%乙醇洗脱核桃饼粕多酚最佳。

2.4 核桃饼粕多酚纯度和回收率

经冷冻干燥后测定，核桃饼粕多酚纯度和回收率见表3。由表3可知，纯化前核桃饼粕总多酚含量26.63%，经HPD100树脂纯化后含量81.10%，核桃饼粕多酚的纯度显著提高，回收率87.33%。

2.5 核桃饼粕多酚纯化物的抗氧化活性

2.5.1 核桃饼粕多酚纯化物对H2O2、OH·、·及DPPH自由基清除作用

对H2O2清除作用见图11（a），核桃饼粕多酚及VC对H2O2清除作用随质量浓度增加而增大，质量浓度800 μg/mL时，对H2O2清除率84.62%，IC50481.18 μg/mL。VC对H2O2清除作用高于核桃饼粕多酚。

对·OH的清除作用见图11（b），核桃饼粕多酚和VC对·OH的清除均随质量浓度增加而增大，当质量浓度400 μg/mL时，核桃饼粕多酚对·OH清除率几乎达100%，IC50151.43 μg/mL，同质量浓度VC对·OH清除率69.07%，IC50348.25μg/mL，核桃饼粕多酚对·OH清除作用高于VC。

对DPPH自由基清除作用见图11（d），核桃饼粕多酚和VC对DPPH自由基清除作用均随多酚质量浓度升高而增大，IC50分别为8.19 μg/mL和10.11 μg/mL，核桃饼粕多酚对DPPH自由基清除能力高于VC。

3 结论

研究了5种不同大孔树脂对核桃饼粕多酚粗提取物的吸附和解吸，其中HPD-100型大孔树脂吸附量大、解吸率高、对核桃饼粕多酚分离纯化效果最好。HPD-100树脂分离纯化核桃饼粕多酚最佳工艺为上液样pH值为4.0，上样液质量浓度4.00 mg/mL，上样流速2 BV/h，上柱液体积1.8 BV，洗脱液乙醇体积分数75%，洗脱流速4 BV/h，洗脱体积3 BV。此条件下，核桃饼粕多酚的含量从26.63%提高到81.10%，回收率87.33%。纯化后的核桃饼粕多酚对·DPPH、·OH、H2O2和·有较强清除作用，且呈现量效关系，IC50分别为481.18 μg/mL、151.43 μg/mL、8.19 μg/mL和202.83 μg/mL，对DPPH和·OH的清除能力高于VC，值得进一步研究。

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LIANG Xing1,ZHANG Xu1,CHEN Chaoyin2,ZHAO Shenglan1*,LIANG Yongju1,LU Xiaofang1
(1.College of Traditional Chinese Medicine,Yunnan University of Traditional Chinese Medicine,Kunming 650500,China; 2.Faculty of Life Science and Technology,Kunming University of Science and Technology,Kunming 650500,China)

Purification technology of walnut residue polyphenols was investigated using macroporous resin.The effects of macroporous resin AB-8, HPD-100,D101,X-5 and NKA-9 on purification of walnut residue polyphenols were studied respectively.Results indicated that the HPD-100 was the optimal resin,and the optimum purification conditions were sample pH 4.0,concentration 4.0 mg/ml,flow rate 2 BV/h,volume 1.8 BV,eluent 75%alcohol,elution flow rate 4 BV/h and elution volume 3 BV.Under these conditions,the purity of walnut residue polyphenols increased from 26.63%to 81.10%and the recovery was 87.33%.The purified polyphenols showed dose-dependent scavenging activity against hydroxyl(·OH),hydrogen peroxide(H2O2),2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH)and superoxide anion free radical(O-2·),and its hemi-inhibiting concentrations(IC50) were 481.18 μg/ml,151.43 μg/ml,8.19 μg/ml and 202.83 μg/ml,respectively.Results showed that the scavenging activity against DPPH and·OH of purified walnut residue polyphenols were stronger than VC,which was worth of further study.

walnut residue;ployphenols;macroporous resin;purification;antioxidant activity

TS229

A

0254-5071（2015）04-0055-07

10.11882/j.issn.0254-5071.2015.04.013

2015-03-12

云南省教育厅科学研究重大专项项目（ZD2014009）；科技部科技支撑计划项目（2011BAD46B00）；国家中医药管理局傣药学重点学科（30970101808）

梁杏（1989-），女，硕士研究生，研究方向为中药资源开发与利用研究。

*通讯作者：赵声兰（1962-），女，教授，硕士，研究方向为药食资源开发与利用研究。