喉癌组织中CD70的表达及其意义

张小芬 陶 春 强 欣 乌力吉白乙 张 娟 孙晓宇

(内蒙古民族大学医学院病理教研室，内蒙古 呼伦贝尔 028000)

吸烟和酗酒等因素都是促进喉癌发展的重要因素。其他已被证明的危险因素包括辐射暴露、人乳头瘤病毒(HPV)感染、遗传因素、空气污染、慢性胃食道反流以及木材或金属粉尘的职业暴露〔1〕。分化抗原簇70(CD70)、肿瘤坏死因子相关的细胞表面配体已被证实参与肿瘤细胞的细胞免疫识别作用。在小鼠肿瘤模型中发现，肿瘤细胞与CD70转染能够增强小鼠抗肿瘤的免疫反应〔2〕。已经被证实表达于直肠癌细胞，系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞。本研究将探讨CD70在喉癌组织中的表达及其潜在的临床意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料 选取喉癌组织32例，其中男20，女12例，年龄52～75〔平均(64.3±7.4)〕岁。其中声门型15，声门上型17。对照组织采用喉返神经损伤引起的喉麻痹病人的声带组织，男14例，女8例;年龄22～58岁。

1.2 免疫组织化学染色 CD70的抗体采用鼠抗人的IgG单克隆抗体，免疫组织化学试剂盒购置于武汉博士德生物公司，操作步骤按试剂盒说明进行。将喉部分切除术手术取下的喉癌组织标本及对照组织经磷酸盐缓冲液(PBS)反复冲洗，利用4% 的多聚甲醛固定，经石蜡包埋后，用切片机以厚5 μm进行切片。石蜡切片经脱水后，以3%过氧化氢浸泡15 min消除内源性过氧化酶活性。加热修复抗原，冷却后用山羊血清封闭抗原30 min后，加入鼠抗人的CD70单克隆抗体工作液，抗体浓度为1∶100，室温孵育2 h后，缓冲液冲洗，并进行链霉亲和素-生物素复合物(SABC)法免疫组织化学染色，经二氨基联苯胺(DAB)显色及苏木精复染，中性树胶封片后进行分析及

1.3 结果判定 至少随机观察10个高倍视野。依照阳性细胞数量，可分为:弱阳性(+，阳性细胞总数＜25%);中等阳性(，阳性细胞总数25%～49%);强阳性(，阳性细胞总数＞50%以上)。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0软件行Wilcoxon秩和检验。

2 结果

免疫组织化学结果显示，喉癌组织32例中，CD70表达弱阳性为10例，中等阳性为15例，强阳性为7例，阳性率为100%。而对照声带组织中，仅有2例CD70表达为弱阳性，阳性率为9%。两组有显著差异(P＜0.05)。

3 讨论

相关研究已经证实，CD70是一个肿瘤坏死因子相关的细胞表面配体分子，参与抗肿瘤免疫反应，是激活T细胞重要的协同刺激分子。CD40及CD70分子共同表达的肿瘤细胞生长速度放缓，凋亡率增加。吴晗等〔3〕利用RT-PCR检测CD70在肝癌细胞系和肝癌组织的表达显示CD70基因在肝癌中呈阳性表达，并可抑制Jurkat淋巴细胞的增殖活性，在肝癌细胞免疫逃逸中起了重要作用。类似的研究发现 CD70基因在直肠癌中部分呈阳性表达，并同样可以抑制淋巴细胞的增殖活性，可能也参与了直肠癌细胞免疫逃逸，可作为指导治疗和预后判断的参考指标〔4〕。本研究证实了喉癌细胞可能通过表达CD70进行免疫逃逸。该基因的表达可以作为潜在的生物标志物用于喉癌的早期诊断和预测预后。此外，可以探讨该基因的表达激活表达与颈部淋巴结转移的关系，以便为部分喉癌患者量身定制免疫治疗方案〔5〕。然而，CD70在喉鳞状上皮细胞癌(LSCC)抗肿瘤免疫及转归相关性的研究还需要进行长期随访，以便深入了解CD70的深入作用，为其应用在喉癌的早期诊断及生物治疗方面提供基础。

1 Marur S，Forastiere AA.Head and neck cancer:changing epidemiology，diagnosis，and treatment〔J〕.Mayo Clin Proc，2008;83(4):489-501.

2 Sirikanjanapong S，Lanson B，Amin M，et al.Collision tumor of primary laryngeal mucosal melanoma and invasive squamous cell carcinoma with IL-17A and CD70 gene over-expression〔J〕.Head Neck Pathol，2010;4(4):295-9.

3 吴 晗，韩振龙，曹英林，等.CD70在肝癌中的表达及其对淋巴细胞增殖抑制作用的研究〔J〕.山东大学学报(医学版)，2008;46(1):27-35.

4 谢锡驹，王 锋.直肠癌中CD70的表达及其对淋巴细胞增殖抑制作用〔J〕.江苏医药，2010;36(15):1764-8.

5 Wei C，Sirikanjanapong S，Lieberman S，et al.Primary mucosal melanoma arising from the eustachian tube with CTLA-4，IL-17A，IL-17C，and IL-17E upregulation〔J〕.Ear Nose Throat J，2013;92(1):36-40.