不规则抗体筛查弱阳性结果对临床输血的意义

蔡娟 孙红

随着输血医学理念的发展, 临床输血安全日益得到关注，输血前不规则抗体的筛查变得更加重要，临床输血技术规范[1]也明确规定对于有输血史及妊娠史的患者输血前要求进行不规则抗体筛查。并非所有抗体筛查鉴定工作都是简单而明确的，在临床工作中由于诸多因素导致抗体筛查结果常常出现假阳性、弱阳性。一些医院，特别是基层医院对此项技术的开展还不成熟，对抗体筛查弱阳性结果也认识不足。目前有关弱阳性抗筛结果的报道很少，鉴于此，本研究收集本院患者不规则抗体筛查弱阳性结果，并分析其特异性分布及可能的原因，希望为输血工作者提供借鉴。

资料与方法

1 研究对象 选取2017年7月～2019年6月本院不规则抗体筛查结果凝集强度≤1+弱阳性病例71例，其中男31例，女40例，年龄分布在12～82岁。

2 试剂和仪器 抗体筛选红细胞试剂盒（上海血液生物医药有限责任公司）；十六系抗体谱红细胞（荷兰sanquin公司）；抗人球蛋白（IgG/C3d）检测卡、AUTOVUE全自动血型及配血分析系统（美国Ortho公司），01-BV-7212离心机（美国Ortho）和Heat Block-32免疫微柱孵育器（美国Ortho）；B600-A低速离心机（北京白洋医疗器械有限公司）；KA-2200血库专用离心机（日本久保田（中国）投资有限公司）。

3 方法 采用AUTOVUE全自动血型分析仪进行不规则抗体筛查，操作步骤参照说明书。同时加做盐水法不规则抗体筛查（在各加有患者血浆2滴的3个洁净试管中分别加入3%～5%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗筛细胞1滴后用血型血清学专用离心机以1 000 g离心15 s观察结果）。不规则抗体鉴定：①抗人球蛋白法：抗人球蛋白卡每孔加50 μL 1%对应谱细胞及25 μL的患者血浆，经37℃孵育15 min，专用微柱离心机离心观察结果。②盐水法：标记相应序号的16支洁净试管各加入患者血浆2滴，然后分别加入3%～5% 对应序号的抗筛谱细胞1滴，血型血清学专用离心机以1 000 g离心15 s观察结果。部分抗体鉴定由北京解放军总院输血科完成。

4 统计学处理 应用SPSS13.0统计分析，计数资料采用百分率表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 不规则抗体弱阳性分布情况 共有71 例弱阳性，有输血史比例高于无输血史，检测出抗体特异性的高达73%，具体见表1。

2 不同年龄、性别人群不规则抗体弱阳性分布情况不规则抗体弱阳性人群中，女性阳性率高于男性，但无统计学差异（P＞0.05）；不规则抗体的弱阳性率也与年龄无关（P＞0.05），见表2。

表1 不规则抗体弱阳性分布情况

表2 不同年龄、性别人群不规则抗体弱阳性率比较

3 抗体特异性分布情况 检出特异性抗体52例，其中Rh血型系统13例，占25%；P和MNSs血型系统各10例，均占19.2%；自身抗体6例，占11.5%；Duffy系统抗体4例，占7.7%；Lewis血型系统、Kidd血型系统和抗-HI 各2例，均占3.8%；联合抗体3例，占5.8%，具体见表3。

讨 论

输血前进行血型不规则抗体筛选，选择无相应抗原的血液输注对精准输血和提高输血疗效具有重要的意义[2,3]。 不规则抗体筛查结果经常出现弱阳性，而很多弱阳性结果复查后为假阳性。这种现象致使有的检验者认为弱阳性结果基本上以假阳性为主，没有复查必要，更不需要进一步鉴定，直接判定为假阳性，没有选择相应红细胞输注，造成临床输血患者出现无效输血或溶血性反应。确实有部分原因使抗筛假阳性以弱阳性结果出现，如文献报道某些厂家的微柱卡假阳性率较高，原因可能为纤维蛋白原干扰、保存过程中的细胞变形或细胞碎片增多等抗筛细胞的自身问题[4]。也可能与患者自身疾病有关，特别是自身免疫性疾病患者的自身抗体、药物性抗体，或患者血浆中某些物质与抗人球蛋白卡中物质反应所致[5]。许多医院进行了意外抗体筛查，但未能进一步进行抗体鉴定，直接判断弱阳性为假阳性或无意义。然而并非所有弱阳性结果都是假阳性，有很多实验人员没有重视弱阳性结果，甚至认为弱阳性对输血意义不大。本研究分析71例弱阳性抗筛结果和进一步抗体鉴定结果，提示抗筛弱阳性结果的重要性，为输血工作者提供参考。

根据本文资料，不规则抗体筛查弱阳性结果女性例数高于男性，不同年龄段的弱阳性率不同，但差异无统计学意义。与张玉萍报道的无效输血与性别、年龄无关一致[6]。由于本资料弱阳性样本量较小，对结果一般性有所影响，因此对于不规则抗体弱阳性与性别、年龄、输血史的关系，仍需要临床进一步扩大样本研究容量，为临床评估提供更加严谨、科学的参考依据。弱阳性标本检出特异性抗体52例，包括P、Rh、MNSs、Duffy、Lewis和Kidd血型系统、抗-HI、自身抗体、联合抗体等。弱阳性标本检出抗体的种类与文献报道的抗筛检出抗体种类基本一致[2,3]。这些出现弱阳性的抗体，如抗P、抗M，其抗体性质多为IgM型，在微柱介质中凝集强度较弱，而其它抗体可能与剂量效应、低效价抗体有关。

Rh，MNS，Kidd，Duffy血型系统的抗体易出现“剂量效应”现象[7]。其中，抗-E、抗-C、抗-M、抗-S更易表现出“剂量效应”[4]。某些抗筛细胞的抗原谱设计不全或为杂合子，就会出现意外抗体漏检或凝集较弱[8]。刘自强报道某些抗筛细胞在检测抗-Fyb、-Jka、-S时, 当抗体效价低于1∶4时存在漏检可能[9]。人产生不规则抗体后，若没有继续受到免疫刺激，抗体效价会逐渐降低，但在再次输入有相应抗原的红细胞后，会迅速激活记忆细胞产生大量IgG抗体，造成迟发型溶血。关于低效价不规则抗体，近年来诸多文献报道其漏检是输血无效的原因之一[9,10]。李海云等报道71例低效价不规则抗体阳性分布与本文弱阳性标本抗体特异性分布一致[10]。本资料中抗筛弱阳性标本进行抗体鉴定还会出现与谱细胞反应结果全阴性的现象，可能为患者存在低频抗原对应的抗体或效价低、活性弱的抗体。还有部分弱阳性标本抗体特异性不明确，封彦楠[5]等对同种抗体特异性不明确的81名患者血清学特征分析及红细胞输注效果评价，认为抗体特异性不明确原因可能为以下四种：（1）低效价同种抗体；（2）无法明确抗体特异性；（3）特异性抗体联合未知抗体；（4）疑似某种特异性抗体。对于弱阳性标本，须同时用盐水法和微柱凝胶法做交叉配血试验，选择相合的血液输注。

临床上经常有患者存在不明原因的贫血，或输血后无法解释Hb不升或下降的现象，大量研究表明，红细胞血型不规则抗体是输血无效及溶血性输血不良反应的主要原因[10]。如果忽视弱阳性结果，有的患者即使某次输血没有产生溶血反应或产生不明显的反应，当患者再次输血接受免疫刺激，会诱导潜在抗体与相应抗原发生免疫记忆反应，产生大量抗体，出现红细胞输注无效、迟发型溶血性输血反应，并且会加重原发病甚至威胁生命。应选择适宜方式筛查不规则抗体，重视弱阳性结果，以避免漏检致受血者输入含有相应抗原的红细胞，才能保证临床输血安全、提高输注效果[11]。

（本组研究资料得到北京解放军总医院第一医学中心输血科的帮助，在此致谢！）

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