犬布鲁氏菌病及其诊治

袁田慧子 冯 静 郭 静 杨 青

(湖南农业大学动物医学院,湖南长沙 410128)

犬布鲁氏菌病及其诊治

袁田慧子 冯 静 郭 静 杨 青

(湖南农业大学动物医学院,湖南长沙 410128)

布鲁氏菌病是危害动物和人类健康的一种人畜共患病。随着生活水平的提高，饲养宠物增多，人类和犬接触越来越密切，犬布鲁氏菌病越来越受到重视。本文针对犬的布鲁氏菌病对其病原学、流行病学、发病机理、检测方法、症状、治疗和免疫预防进行了综述。

布鲁氏菌病 犬 检测 诊治

1 病原体

布鲁氏菌为需氧革兰氏阴性小球杆菌，无鞭毛，不形成芽孢，通常没有荚膜，毒力菌株可有菲薄的荚膜。经研究，病菌大小通常在0.6～1.5μm×0.5～0.71μm之间。布鲁氏菌的生长和繁殖具有较高的营养需求，当前实验室研究多使用含血清培养基或马铃薯浸液培养基，生长所需温度在20℃～40℃之间，37℃最为合适。该菌生长较为缓慢，初代分离布鲁氏菌通常需1周以上才可长出肉眼可见的圆形菌落，经多次继代培养后菌落的生长速度将有所提高。经抗生素作用该菌可发生变异。布鲁氏菌的抗灭活能力较强，对低温，干燥均有较强的抵抗力，但不喜湿热，对抗生素、紫外线、常用消毒剂等比较敏感。

2 流行病学

布鲁氏菌病是一种人和动物共患传染病，传染性很强，主要经消化道、呼吸道、破损皮肤、皮肤黏膜、交配、繁育、吸血昆虫等途径传染。发病没有季节性，一年四季均可发病，但动物流产季节发病率最高。此病的传染源主要为患病动物及带菌动物，目前已知的布鲁氏菌宿主在陆生哺乳动物，水生哺乳动物和禽类中多达60多种，易感动物范围极广。患病动物的流产物、排泄物、分泌物及乳类均含有大量病菌，尤其以生殖器分泌物中病菌量最多。动物对布鲁氏杆菌的易感性在性成熟时最高，幼崽和年老动物感染率较低，且雌性动物易感性高于雄性动物。

3 发病机理

布鲁氏菌一旦侵入犬类机体，首先进入淋巴源性迁徙阶段，几日内便可侵入淋巴结，若犬自身的吞噬细胞未能将其消灭，病菌便在细胞内生长繁殖并形成局部原发病灶。通常此阶段为14～180d。之后布鲁氏菌会在吞噬细胞内大量增殖并导致后者破裂，从而进入血液中引起可间歇性出现的菌血症。随后病菌随血液扩散至病犬的各个器官中，在引起器官病变的同时又可从犬的排泄物排出。此外，布鲁氏菌进入绒毛膜上皮细胞内增殖可能导致胎盘炎，并在绒毛膜与子宫膜之间扩散，造成子宫内膜炎。在绒毛膜上皮细胞内增殖时，使绒毛发生渐进性坏死，同时产生一层纤维性脓性分泌物，逐渐使胎儿胎盘与母体胎盘松离，引起胎儿营养障碍并使母畜发生流产。布鲁氏菌还可穿过胎盘屏障进入胎衣羊水导致胎儿病变。

4 临床症状

通常犬类感染布鲁氏菌病后多呈隐性，尤其是青年犬和未妊娠的犬，以不发热和体表淋巴结肿大为特征，可带菌排菌两年以上。出现症状的犬有“波浪热”，但常被犬主忽略，可有关节病炎，腱鞘炎，肝、脾肿大，区域性淋巴结肿大等，也容易被犬主忽视，少数可扪及包块。犬呈乏力、食欲不振，精神状态差，烦躁，疼痛部位不让触碰，有时出现跛行。只有妊娠母犬可能表现出稍明显的症状，在妊娠前、后期发生无征兆的流产，全身淋巴结肿大，乳房炎。母犬流产后可能发生胎衣滞留和子宫内膜炎、阴道炎，从阴道流出恶臭的淡褐色或灰绿色黏性分泌物，胎儿多为死胎，胎水多清朗，但有时混浊含有脓样絮片。偶见患肝炎、肺炎、心内膜炎等的病变活产胎儿，存活时日较短。患病公犬往往患睾丸炎、附睾炎、睾丸萎缩、前列腺炎和阴囊皮炎等，患病公犬常焦躁不安舔蹭阴囊皮肤。由于需与此病鉴别诊断的病征较多，且多数症状易被犬主忽视，因此单纯根据临床症状是难以确诊的，必须依靠细菌学和血清学检验。可采取流产胎儿、血液、尿、阴道分泌物、精液及乳汁等送检。

5 诊断

5.1 细菌学检测

5.1.1 科兹罗夫斯基染色法

可取流产胎儿的淋巴结、肝、脾、肺、胃内容物或胎衣、羊水、胎盘等组织，也可用犬的阴道分泌物、乳汁、精液、血液、尿液等制成抹片，用科兹罗夫斯基染色法染色镜检，查出红色的球状或短小杆菌便可确诊，而其他菌为蓝色。

5.1.2 病原分离培养

新鲜病料可用胰蛋白大豆琼脂面或血液琼脂斜面、血清葡萄糖琼脂、肝汤琼脂斜面等培养基培养；陈旧病料或污染病料，可用选择性培养基培养如Farrell氏培养基。培养时，一份在普通条件下，另一份放于含有5%～10%二氧化碳的环境中，以37℃恒温培养7～10d。然后通过布鲁氏菌的形态、生长特性、染色、菌落形态和氧化酶及过氧化氢酶试验、单价特异性抗血清凝集试验、抗布鲁氏菌多克隆抗体玻片凝集试验，来鉴定布鲁氏菌。

5.2 血清学检测

（1）试管凝集试验（SAT）是经典的常规血清学检测方法，检测费用低、简便、快速。但可能出现假阳性，所以不适宜单独应用确诊；

（2）巯基乙醇快速载玻片凝集试验（MERSAT）是鉴别动物未受布鲁氏杆菌感染的最好方法，阴性结果表明动物未受感染；

（3）虎红平板凝集试验（RBPT）诊断布鲁氏菌病符合率为95.92%。快速敏感，是国内外普遍的初筛方式。但不能确定持续感染，还是耐过，只能推断感染过[8]；

（4）全乳环状试验（MRT）。虎红平板凝集试验与全乳环状试验结合判断成为国际贸易和奶牛布鲁氏菌病检测中的初筛方法；

（5）补体结合试验（CFT）是布鲁氏菌病血清学诊断最重要的技术之一，可确诊布鲁氏菌病，但操作烦琐、费时。适用于初筛出的阳性血清样品复核确诊；

（6）酶联免疫吸附试验（ELISA）比补体结合试验操作方便，准确率与补体结合试验相差不多。可以作为筛选试验也可以作为确定试验，是大家公认的一种方便有效的诊断方法。

（7）荧光偏振试验（FPA），现仅用于布鲁氏菌研究性试验。

6 治疗

治疗原则应为多疗程，早期、足量、联合给药。多休息补充营养，给予多维生素，高热量，易消化饮食，维持水及电解质平衡。用药时可先做药敏试验，筛选出敏感的药物以供参考。一般使用的药物组合有利福平+多西环素、利福平+多西环素、利福平+链霉素、利福平+喹诺酮类、利福平+四环素、多西环素+复方新诺明、链霉素+多西环素、四环素+氨基糖苷、米诺环素+双氢链霉素、四环素+链霉素。

我国中医中药治疗布鲁氏菌病效果也较为明显，但受犬类服用中药不易限制没有很好的临床应用。中医认为布鲁氏菌病急性期系外感湿热病邪，内外相引而致，慢性期因久病正气耗损而导致正虚邪盛，风、湿、寒三气杂合而为痹所致，表现为虚证、痹证、血瘀和湿热等，治疗应辨证施治，采用扶正固本、益痹活络、活血化瘀、清热利湿等治疗。清营汤合三仁汤加减，甘露消毒丹加减，独活寄生汤加减等方剂都可以用于布鲁氏菌病的治疗。中国预防医学科学院流行病学研究所用白芷、连翘、川芎、甘草、木瓜、黄连、肉桂、双花、牛夕、金虫、生地、防风、乳香、地骨皮、白芍、当归、麦冬、甘草、青陈皮等组方治疗布鲁氏菌病190例，更是有效率达93.68%。

7 预防措施

养宠物犬应定期给犬做血清学检查以及健康检查。饲养肉犬应经常消毒犬舍，病犬、孕犬与其他犬隔开饲养，定期检疫。种犬在配种前应做血清学化验和体检确保健康，流产的犬要进行细菌学检测和血清学检测，查明流产原因。感染布鲁氏菌的宠物应该被隔离，减少感染人或其他犬的机会。对病犬的犬舍、用具、活动场所应用布鲁氏菌敏感的消毒剂进行彻底消毒。对流产的胎儿、羊水、胎衣、污染物等应无害化处理。治愈的种犬应被淘汰，不能再留作种用。一般情况下对感染布鲁氏菌病的犬实施安乐死，若犬主不舍应积极治疗病犬，并且要认识到布鲁氏菌病会传染给人。犬主要提高警惕，接触病犬时做好防护措施，戴护目镜、穿防护衣、戴口罩、手套，皮肤有伤口时暂时避免接触病犬。犬主可进行疫苗免疫，但因可能会出现高度皮肤过敏甚至病理改变，且接种后产生的抗体血清学检测时不易与染病鉴别所以不主张使用菌苗接种。

[1] 齐海霞，张海云，张宛婧，等.宠物犬布鲁氏菌病的现状与防控[J].中国畜牧兽医文摘，2013，29（8）：110-113.

[2] 王季秋.布鲁氏杆菌病病原学[J].中国地方病防治杂志，2009，4 （3）：6.

[3] 刘倩宏.布鲁氏菌膜相关蛋白的原核表达和抗原性鉴定[D].中国农业大学，2007.

[4] 邓海云.柳州市布鲁士杆菌病调查及综合防控对策探讨[D].南京农业大学，2007.

[5] 张慧，张喜悦，范伟兴.法国布鲁氏菌病参考实验室的血清学检测方法[J].中国动物检疫，2013，30（10）：34-37.

袁田慧子（1988-），本科，湖南农业大学动物医学院。

杨青（1972-），教授，湖南农业大学动物医学院教授。