反相离子对色谱法测定饲料中的碘

2015-01-21乐红权许增高陈红英胡方圆丁珊珊

饲料工业 2015年9期

■乐红权许增高陈红英胡方圆丁珊珊

（无锡华诺威动物保健品有限公司，江苏无锡 214101）

碘是人们发现的动物第二种必需微量元素，其主要作用是参与机体甲状腺素的合成，从而间接影响动物机体的生理功能。动物碘缺乏，可使动物生长受阻、繁殖力下降，而碘用量过大，也可导致高碘甲状腺肿大，引起动物中毒。因此，准确测定饲料中碘的含量具有十分重要的意义。

目前，饲料添加剂品种目录（2013）中含碘化合物仅有碘化钾、碘化钠、碘酸钾、碘酸钙4种。

饲料中碘的测定采用GB/T 13882的方法检测，但该标准只能测定饲料中的碘离子，即只能测定碘化钾和碘化钠，对碘酸钾和碘酸钙则不能测定。因此，我们需要一种能测定饲料中总碘的方法。因为碘酸根在酸性条件下具有强氧化性，所以我们采取在稀硫酸条件下，加入过量的偏重亚硫酸钠，使样品中的碘全部还原成碘离子，再用离子对色谱法测定溶液中的碘离子。

1 材料和方法

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪（岛津LC-10AT）；超声波清洗器（JL-180DT型，上海吉理超声仪器有限公司）；离心机（CT14D型，上海天美科学仪器有限公司）；电子天平（AG285型，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；偏重亚硫酸钠（分析纯）；甲醇（色谱纯）；四丁基硫酸氢铵（离子对试剂）；碘化钾（分析纯）；硫酸（分析纯）；色谱用水为去离子水，符合GB/T 6682.1中一级用水规定。

1.2 试验方法

1.2.1 溶液制备

1.2.1.1 稀硫酸：取硫酸57 ml，加水稀释至1 000 ml，即得。

1.2.1.2 四丁基硫酸氢铵溶液：称取1.7 g四丁基硫酸氢铵，精确至0.01 g，加入盛有1 000 ml水的烧杯中，搅拌至完全溶解。

1.2.1.3 碘标准贮备溶液(含碘1 mg/ml)：称取0.130 8 g经120℃干燥2 h、于干燥器中冷却的碘化钾溶于水，移入100 ml棕色容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，摇匀备用，3个月内有效。

1.2.2 色谱条件

色谱柱：C18柱，柱长250 mm，内径4.6 mm，粒度5 μm或性能类似的分析柱；柱温：40℃；流动相：四丁基硫酸氢铵溶液+甲醇=85+15；检测器：紫外检测器；检测波长：225 nm；进样量：20 μl。

1.2.3 标准曲线的绘制

精密量取碘标准贮备溶液适量，加水稀释制成含碘量分别为2、5、10、15、20 μg/ml的标准工作液，分别注入色谱仪，测定各浓度工作液的峰面积。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

1.2.4 样品的前处理

称取样品0.5～5 g，精确至0.000 1 g，于100 ml棕色容量瓶中。加0.5 g偏重亚硫酸钠，60 ml水，再加10 ml稀硫酸，置超声提取器中超声提取30 min（中间旋摇一次以防样品附着瓶底），待温度降至室温后用水稀释并定容至刻度，过滤（若滤液浑浊则需离心）。取部分清澈的溶液过0.45 μm滤膜,控制浓度在2.0～20 μg/ml，待上机。

1.2.5 回收率与精密度的测定

1.2.5.1 样品的制备

①称取1000 g空白饲料，分别添加一定量的碘化钾，混合均匀，使样品含碘量分别为100、400、800、1 200 mg/kg。

②称取1 000 g空白饲料，分别添加一定量的碘酸钙，混合均匀，使样品含碘量分别为100、400、800、1 200 mg/kg。

1.2.5.2 按1.2.4节的方法对样品处理和测定，根据峰面积计算其浓度和添加回收率。每个浓度的样品设置3个重复。

1.2.6 稳定性的测定

样品制备好后，间隔24 h复测，比较两次结果。