千金子种子、种仁及种皮中重金属测定

邓德英， 张宏伟， 吴瑞环， 张振凌， 李 雅

（河南中医学院/呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心，河南郑州450008）

千金子种子、种仁及种皮中重金属测定

邓德英， 张宏伟， 吴瑞环， 张振凌*， 李 雅

（河南中医学院/呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心，河南郑州450008）

目的比较千金子种子、种仁及种皮中重金属含有量，进一步确定千金子去皮壳的意义。方法原子吸收法测定千金子种子、种仁和种皮中重金属元素含有量。其中铜用火焰原子吸收法 （FAAS），铅、砷、镉采用石墨炉原子吸收法 （GFAAS），汞用冷吸收法 （HGAAS）测定。结果不同批次千金子种皮中铜、镉、铅、砷、汞的量均高于种仁中量。结论千金子净制去壳具有一定合理性。

千金子；重金属；净制去壳；炮制工艺

千金子药材来源为大戟科Euphorbiaceae植物续随子Euphorbia lathyris L.的干燥成熟种子［1］。历代炮制有 “去壳”、 “去壳，研”、 “去壳，纸裹压去油”等方法炮制，均要求除去种皮后应用［2］。查阅了37部古代炮制相关著作，其中有34部要求 “去壳”炮制操作［3］，而现今对于千金子去皮的合理性确有争议，李英霞等［4］通过测定比较种仁与种皮中脂肪油含有量及其组成、总香豆素含有量否定了去壳操作的合理性；而李群［5］通过对千金子种皮得率、脂肪油含有量及理化常数对比、总溶出成分［6］、秦皮乙素和秦皮甲素含有量对比［7］，认为千金子净制去壳是必要的。本研究利用原子吸收分光光度法［8-10］进一步测定千金子种子、种仁及种皮中重金属含有量，研究去种皮后应用净制的意义。

1 仪器与材料

1.1 仪器 Aanalyst 800原子吸收分光光度计（美国珀金埃尔默公司）；Milli-Q超纯水发生器（美国密理博公司）；MARS-5微波消解仪 （美国培安公司）；AE240电子分析天平 （瑞士梅特勒-托利多公司）；BS210S电子天平 （北京赛多利斯天平公司）；铅、铜、铁、镉、锰、钙、镁、钾、锌空心阴极灯，汞、砷无极放电灯 （美国）；电炉。

1.2 试药 铅 （Pb）、汞 （Hg）、砷 （As）、铜（Cu）、镉 （Cd）标准液，批号分别为：GSB04-1742-2004，GSB04-1729-2004，GSB04-1714-2004，GSB04-1725-2004，GSB 04-1721-2004（国家有色金属及电子材料分析测试中心），质量浓度均为1 000μg/mL；实验用水为去离子水；氢氧化钠、硝酸为优级纯；过氧化氢为分析纯；硼氢化钠、硝酸镍为光谱纯；玻璃器皿用前用30%硝酸浸泡过夜，然后去离子水冲干净，烘干，备用。

2 方法与结果

2.1 样品的处理

2.1.1 测定铅 （Pb）、铜 （Cu）、砷 （As）、镉（Cd）的样品处理 分别取千金子种子、种仁及种皮样品粉末0.3 g（3批供试样品，批号分别为20110707、20100330、20110912），精确称量，置于消解罐中，加入2 mL过氧化氢，6 mL浓硝酸置入微波消解仪中，按表1中程序进行微波消解［11-12］，待程序结束，消解罐冷却后，取出，开启罐盖，用少量去离子水清洗消解罐盖子和内壁，在电炉上浓缩溶液至约1 mL，冷却后，移入量瓶中，去离子水定容至50 mL，作为测定铅 （Pb）、铜（Cu）、砷 （As）、镉 （Cd）元素的供试品溶液。随同试样做2份空白对照。

表1 微波消解程序Tab.1 M icrowave digestion procedure

2.1.2 测定汞（Hg）的样品处理 按照“2.1.1”项下方法进行消解制备千金子种子、种仁及种皮样品溶液，将溶液移入量瓶中，用去离子水定容至50 mL，作为测定汞 （Hg）元素的供试品溶液。随同试样做2份空白对照。

2.2 对照品溶液的制备

2.2.1 铜 （Cu）对照品溶液的制备 分别精密量取1 000μg/mL Cu标准液0.05、0.1、0.3、0.5 mL，分别置于100 mL量瓶中，0.5%硝酸溶液定容，即得质量浓度分别为0.5、1、3、5μg/mL的对照品溶液。

2.2.2 铅 （Pb）、镉 （Cd）、砷 （As）对照品溶液的制备 分别精密量取1 000μg/mL Pb、As、Cd标准液0.1 mL，分别置于100 mL量瓶中，0.5%HNO3溶液定容。分别精密量取5、1、1 m L上述Pb、As、Cd溶液，分别置于100 m L量瓶中，0.5%HNO3溶液定容，即得50μg/L Pb对照品贮备液和10μg/L As、Cd对照品贮备液，再经仪器自动稀释成5、10、20、35、50μg/L Pb对照品溶液，2、4、6μg/L Cd对照品溶液，2、4、6、8、10μg/L As对照品溶液。

2.2.3 汞 （Hg）对照品溶液的制备 精密量取1 000μg/m LHg标准液0.1 m L，置于100 m L量瓶中，0.5%HNO3溶液定容。然后再分别精密量取上述溶液0.1、0.3、0.5、0.7 mL于100 mL量瓶中，0.5%HNO3溶液定容，即得质量浓度分别为1、3、5、7μg/L的对照品溶液。

2.3 仪器参数的设定 铜用火焰原子吸收法（FAAS）测定［13］，铅、砷、镉采用石墨炉原子吸收法（GFAAS）测定，汞用冷吸收法（HGAAS）测定［14］。不同金属离子设定不同的仪器工作参数，见表2、3、4。

表2 FAAS仪器工作参数表（Cu）Tab.2 Flam parameters of Cu

表3 GFAAS仪器工作参数表（Pb、Cd、As）Tab.3 Graphite furance parameters of Pb、Cd、As

表4 HGAAS仪器工作参数表（Hg）Tab.4 Hydride generation-cold parameters of Hg

2.4 标准曲线的绘制 精密吸取各对照品溶液20μL，按照仪器的操作条件，进行测定，以质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，计算线性回归方程和相关系数见表5。

表5 各元素标准曲线Tab.5 Standard curves of five elements

2.5 方法学考察

2.5.1 精密度试验 取上述各对照品溶液，重复进样5次，测定吸光度，RSD＜3.0%，精密度良好，结果见表6。

表6 精密度试验（n=5）Tab.6 Results of precision tests（n=5）

2.5.2 重复性试验 分别精密称取千金子种仁样品 （批号20110912）5份，每份约0.3 g，按照“2.1”项下方法，制备供试品溶液，精密吸取20 μL，测定，RSD＜3.0%，重复性良好，结果见表7。

表7 重复性试验（n=5）Tab.7 Results of reproducibility tests（n=5）

2.5.3 加样回收率试验 取已知含有量的千金子种仁样品 （批号20110912）5份，每份约0.15 g，精密称定，置于消化罐中，加入一定量的Cu、Cd、Pb、As、Hg标准溶液，按照 “2.1”项下方法，制备供试品溶液，各精密吸取 20μL，测定，RSD＜3.0%，准确度良好，结果见表8。

表8 加样回收率试验（n=5）Tab.8 Results of recovery tests（n=5）

2.6 样品测定 按照仪器的操作条件，精密吸取各供试品溶液，进行测定，计算，结果见表9。

表9 千金子种子、种仁和种皮重金属测定结果Tab.9 Determ ination results of heavy metals contents in seeds，kernel and kind shell of Euphorbiae Semen

根据上表结果计算出3个不同批次种皮、种子、种仁重金属含有量平均值，其中种皮中Cu平均含有量为58.02μg/g，高于种子（44.31μg/g），且二者均高于种仁 （38.24μg/g）；种皮中Cd平均含有量为77.87μg/g，高于种子（29.02μg/g），均高于种仁（1.570μg/g）；种皮中Pb平均含有量为1.280μg/g，高于种子（0.587 6μg/g），均高于种仁（0.269 6μg/g）；种皮中As平均含有量为29.74μg/g，高于种子（5.853μg/g），均高于种仁（-3.044μg/g）；种皮中Hg平均含有量为0.8444μg/g，高于种子（0.651 5μg/g），且均高于种仁（0.434 9μg/g）。

3 讨论

千金子的种子、种仁、种皮中，千金子种皮中铜、镉、铅、砷、汞5种重金属的含有量最高，其次是种子的重金属含有量，最后是种仁的重金属含有量。因此，千金子净制去皮具有科学性。千金子种皮在种子占比例较大，千金子制霜使用掺入种皮影响其外观性状和临床疗效，因此在千金子入药或制霜应用时，剥去种皮是十分必要的。

中华人民共和国对外贸易经济合作部公告2001年第4号文件，药用植物及制剂进出口绿色行业标准重金属限量标准：Cu≤20 mg/kg、Cd≤0.3 mg/kg、Pb≤5.0 mg/kg、As≤2 mg/kg、Hg≤0.2 mg/kg［15］。将其换算为与实验数据相一致的单位为：Cu≤20μg/g、Cd≤0.3μg/g、Pb≤5.0 μg/g、As≤2μg/g、Hg≤0.2μg/g。与3个不同批次种皮、种子、种仁重金属含有量的平均数对比显示：千金子种仁Pb、As含有量均在规定范围内，虽然千金子种仁中其他重金属含有量超过规定标准，但是千金子种皮的重金属含有量超出标准值最多，种皮中含Cu量约是标准值的2.9倍左右，含Cd量是标准的259.6倍左右，含As量约为标准的14.9倍，含Hg量约为标准的4.2倍。种仁中含Cu量是标准值的1.9倍左右，含Cd量约是标准的5.2倍，含Hg量约为标准的2.2倍。相比较，种仁中重金属的含有量更接近于标准值，种皮中重金属的含有量远超标准值。因此，净制去皮能降低千金子中重金属含有量。

由于千金子种子较小不易剥去种皮，在实验研究过程中考察了传统手工去壳操作和几种农作物去壳机械应用于千金子去壳操作，传统手工去壳工作量大，耗费大量时间；而机械操作去皮效率低，均不适合千金子去壳操作。因此需要进一步研究较好的去壳设备应用于千金子的去壳操作，以保证千金子炮制的可操作性。

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Determ ination of heavy metals contents in seed，kernel and testa of Euphorbiae Semen

DENG De-ying， ZHANG Hong-wei， WU Rui-huan， ZHANG Zhen-ling*， LIYa
（Collaborative Innovation Center for Respiratory Disease Diagnosis and Treatment&Chinese Medicine Development of Henan Province，Henan University of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou 45008，China）

Euphorbia Semen；heavymetals；net system to shell；process technology

R284.1

：A

：1001-1528（2015）06-1305-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.06.032

2014-07-28

中医药行业专项课题 “千金子炮制方法传承与规范化应用研究”（201107008）

邓德英，女，实验师，从事中药标本与质量分析研究。E-mail：dengdeying2014@126.com

*通信作者：张振凌，女，教授，博士导师，从事中药饮片炮制教学与研究。E-mail：zzlhnzy@126.com