三种检测方法对结核病诊断的临床价值

苗素云 刘淑芳 天津市西青区结核病防治所 300112

三种检测方法对结核病诊断的临床价值

苗素云 刘淑芳 天津市西青区结核病防治所 300112

目的：比较抗酸染色法、结核抗体法和结核菌素试验检测结核杆菌的灵敏度和特异性，及在临床诊断中的应用价值。方法：用抗酸染色法、结核抗体法和结核菌素试验对141例临床确诊的结核病患者和127例非结核病患者进行检测，对三种检测方法的结果进行分析比较。结果：抗酸染色法、结核抗体法及结核菌素试验的灵敏度分别为34.8%，70.2%，75.2%；特异度分别为100%，82.7%，63.8%，结核抗体法和结核菌素试验的敏感性明显高于抗酸染色法，但特异性不及抗酸染色法，结核抗体法的特异性高于结核菌素试验，差异均有统计学意义。结论：结核抗体法具有简便、快速、不需贵重仪器设备、比抗酸染色法具有更高的灵敏度、比结核菌素试验具有更高的特异性的优点，对痰涂片阴性肺结核的诊断具有重要的临床价值。

肺结核 抗酸染色 结核抗体 结核菌素试验

结核病被列为我国重大传染病之一，是严重危害人类身体健康和生命安全的呼吸道传染病，有“白色瘟疫”之称。2010年，全国第五次结核病流行病学抽样调查显示，与2000年相比，全国肺结核患病率呈现下降趋势，但结核病特别是耐药结核病负担仍很严重，结核病防治工作仍面临诸多挑战，需要长期不懈的努力[1］。提高肺结核的诊断水平对结核病的预防和治疗意义重大。目前，肺结核的诊断通常需要做痰涂片抗酸染色（AFS）、结核菌素（PPD）试验、血清结核抗体检测TB－Ab等。笔者用上述三种方法对141例临床确诊的结核病患者和127例非结核病患者进行检测，对检测数据进行对比分析，以评价各方法在肺结核诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年1月－2013年12月由本所确诊的肺结核患者141例，其中男79例，女62例，年龄22～81岁，平均年龄49.8岁。非结核病患者127例（排除肺癌、糖尿病、陈旧性肺结核患者），其中男68例，女59例，年龄18～76岁，平均年龄47.4岁。肺结核根据病史、体格检查、胸片及辅助检查确诊。

1.2 试剂 萋－尼氏抗酸染色液，由珠海贝索生物技术有限公司提供。结核抗体检测采用斑点免疫金渗滤试验（DIGFA），试剂由上海奥普生物医药有限公司提供。PPD试剂，由北京祥瑞生物制品有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 AFS：挑取痰标本中干酪样、脓性或可疑部分约0.05ml于玻片正面右侧23处，均匀涂抹成10mm×20mm的卵圆形痰膜，正面朝上自然干燥；涂片干燥后经火焰固定，滴加石碳酸复红染液盖满玻片，加热至出现蒸气后停止加热，保持染色5min；冲洗后玻片上滴加脱色液，脱色约1min，脱至痰膜无可视红色为止；冲洗后滴加亚甲蓝复染液，染色约30s；冲洗，玻片自然干燥后镜检。

1.3.2 DIGFA：将待检标本离心后备用，在检测板的反应孔中间，加入2滴封闭液，等待薄膜吸入；取40μl新鲜的血清标本，加入反应孔中间，等待薄膜吸入；加入6滴洗涤液，等待薄膜吸入；加入2滴金标液，等待薄膜吸入；加入6滴洗涤液，等待薄膜吸入，目测结果。质控区及检测区同时出现红色斑点者为阳性，质控区出现红色斑点而检测区未显示红色斑点者为阴性。

1.3.3 PPD：吸取0.1ml（5IU）皮试液注射于左前臂掌内侧皮内。72h后检查注射部位反应。测量以硬结的横径及纵径的mm数记录，反应平均直径不低于5mm为阳性反应，≥20mm或有水泡、坏死、淋巴管炎者均属于强阳性反应。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件包进行统计处理，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组检测结果分析 141例肺结核组检测结果表明，AFS、DIGFA、PPD法的阳性率分别为34.8%、70.2%、75.2%，其中AFS灵敏度最低，与DIGFA法和PPD法相比，差异均有统计学意义（χ2＝35.55，P＜0.01和χ2＝46.54，P＜0.01）；DIGFA法和PPD法的灵敏度相比，差异无统计学意义。127例非结核组的检测结果表明，AFS、DIGFA、PPD法试验的特异度分别为100%（1－0127）、82.7%（1－22127）、63.8%（1－46127），AFS的特异性最高，与DIGFA法和PPD法相比，差异均有统计学意义（χ2＝24.09，P＜0.01和χ2＝56.17，P＜0.01）；DIGFA法的特异性高于PPD法，二者差异有统计学意义（χ2＝11.57，P＜0.01）。见表1。

表1 结核组和非结核组检测结果分析〔n（%）〕

2.2 痰菌阳性和阴性患者DIGFA法和PPD法检测阳性结果分析 菌阳组DIGFA法阳性率为71.4%，菌阴组DIGFA法阳性率为69.6%，二者差异无统计学意义；菌阳组PPD法阳性率为79.6%，菌阴组PPD法阳性率为72.8%，二者差异无统计学意义。见表2。

表2 痰菌阳性和阴性患者的结果分析〔n（%）〕

3 讨论

痰涂片抗酸染色阳性是诊断肺结核的“金标准”，该法特异性高，在结核病控制工作中占有不可或缺的位置，但由于患者少痰、无痰、痰中含菌量少、标本留取方法不当、痰液性状不好以及干扰因素多等原因，致使肺结核痰涂片抗酸染色阳性率较低，一般在20%～40%。抗酸杆菌涂片镜检法具有简便、快捷、价格低廉的优点，但其敏感性太低，并受送检标本质量影响较大[2］，容易造成漏诊。培养法虽可以提高检出率，但耗时长，需要6～8周，且对早期感染者不易检出，失去了早发现、早治疗的良机，严重的影响了结核病的及时诊断[3］。即使结核杆菌快速培养可以大大缩短检测时间，但其成本相对高昂，应用受到限制。

本文用斑点免疫金渗滤试验法检测结核抗体，对结核病诊断的灵敏度为70.2%，特异度为82.7%，与传统的涂片和培养法比较，该方法可明显提高结核病的阳性检出率，有助于临床结核病的诊断和治疗，但抗体检测作为结核病的体液免疫检查尚存在一定的假阳性和假阴性的问题。受试者接种过卡介苗、曾经得过结核均会使体内存在一定水平的结核抗体，另外血液中存在相关抗原与抗原决定簇，与结核抗体产生非特异性结合等均可造成结核抗体假阳性。不同人群机体免疫水平存在差异[4］；患者处于临床感染的初期，结核抗体的产生处于“窗口期”；血液中免疫抑制因子及免疫复合物的存在均可造成结核抗体假阴性。

本文显示结核抗体与PPD试验的敏感性相比差异无统计学意义，但结核抗体的特异性明显高于PPD试验（P＜0.01），分析原因可能是由于PPD阳性仅表示受试者体内有结核感染，并不一定患病。我国城市成年居民的结核感染率在60%以上，所以PPD试验在人群中有着极高的假阳性率。另外，PPD试验观察反应的时间为72h，由于测量者主观因素的影响，结果会有一些误差。患者接种过卡介苗也会对试验造成影响。有文献报道，感染肺结核15个月后，体内结核抗体也已消失[5］，所以人群高感染率对血清结核抗体检测的影响远远小于PPD试验。

本文对三种检测方法的灵敏度和特异性进行对比分析，发现其各有优劣，三者可互相补充，三种方法的联合应用对于结核病的诊断和鉴别诊断具有重要的临床价值。尤其是对于无痰患者、不易获得痰标本的儿童结核、痰涂片阴性肺结核患者及肺外结核患者，血清结核抗体检测更具有重要的临床意义，是一种较为理想的辅助检查方法，值得广泛推广和应用。

[1]全国第五次结核病流行病学抽样调查技术指导组，全国第五次结核病流行病学抽样调查办公室.2010年全国第五次结核病流行病学抽样调查报告〔J〕.中国防涝杂志，2012，34（8）：485.

[2]叶林德.肺结核患者痰液性状对检测结果的影响〔J〕.浙江预防医学，2002，14（7）：80.

[3]施旭东，刘正华，吴晓媛，等.结核分枝杆菌培养和药敏试验及菌群鉴定快速荧光法的研究〔J〕.中华检验医学杂志，2005，28（8）：790－792.

[4]彭卫生，王英年，肖成志.新编结核病学〔M〕.北京：中国医药科技出版社，2003：179－180.

[5]赵一红，黄润堂，曹松，等.结核病治愈后抗结核抗体在体内持续时间的临床观察〔J〕.中国防痨杂志，2001，23（6）：378－381.

（编辑雅文）

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