生长抑制剂对草莓茎尖离体保存的影响

史芳芳

（新疆生产建设兵团第十二师农业科学研究所，新疆乌鲁木齐 830088）

生长抑制剂对草莓茎尖离体保存的影响

史芳芳

（新疆生产建设兵团第十二师农业科学研究所，新疆乌鲁木齐 830088）

试验结果表明，培养基中添加浓度为1.0 mg·L-1的多效唑可保存草莓试管苗至6个月；6.0 mg·L-1脱落酸结合6℃低温处理，可使试管苗保存20个月；2.1%的甘露醇结合6℃低温处理，可使试管苗保存15个月。

草莓茎尖；多效唑；脱落酸；甘露醇；离体保存

为探讨生长抑制剂对草莓茎尖离体保存的影响，特进行培养基添加多效唑、脱落酸、甘露醇3种生长抑制剂对草莓红颜试管苗生长保存影响的试验。

1 材料与方法

1.1 材料

试验材料为红颜草莓栽培品种，由新疆生产建设兵团十二师农业科学研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 培养材料的建立

取匍匐茎的茎尖在流水下冲洗30 min，先用75%医用酒精消毒30 s，然后再用0.1%升汞水消毒6 min，最后无菌水冲洗3～4次后剥去外层包片，将茎尖接种在MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1（pH值5.8）培养基上进行芽分化培养，产生的丛生芽供试验用。

1.2.2 多效唑处理

采用250 m L的组培瓶，每瓶装入附加不同浓度（0，0.1，0.3，0.5，1.0 mg·L-1）多效唑的MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培养基20 mL，每处理10瓶，每瓶接入5个单芽，在（25± 1）℃下每日光照14 h，光强1 500～2 000 lx条件下培养保存。

1.2.3 脱落酸处理

用250 m L的组培瓶，每瓶装入附加不同浓度（0，0.1，0.3，0.9，2.7，4.5，6.0 mg·L-1）的MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培养基20 m L，每处理10瓶，每瓶接入5个单芽，在培养室内培养，培养25～30 d后，置于低温培养箱内保存。培养室的培养条件：温度为（25±l）℃，每日光照为14 h，光强为1 500～2 000 lx。低温培养箱培养条件：温度为（6±2）℃，每日光照为15 h、光强为1 500～2 000 lx。保存结束后进行继代培养。

1.2.4 甘露醇处理

用250 m L的组培瓶，每瓶装入附加不同浓度（0，0.3%，0.9%，1.8%和2.1%）甘露醇的MS +6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培养基20 m L，每处理10瓶，每瓶接入5个单芽，在培养室内培养，培养25～30 d后，置于低温培养箱内保存，培养条件同上。保存结束后进行继代培养。

2 结果与分析

2.1 多效唑的影响

由表1可知，当保存至6个月时，对照与0.1，0.3 mg·L-1处理试管苗的根发黄，叶色黄绿（绿），而0.5，1.0 mg·L-1处理还有白色根，叶色深绿，对照成活率最低，为76%；当保存至7个月时，对照与低浓度0.10 mg·L-1处理的芽全部死亡，而0.3，0.5，1.0 mg·L-1处理成活率分别为20%，33%和40%。

2.2 ABA的影响

2.2.1 常温下的影响

由表2可见，当保存7个月时，不含ABA的试管苗枯叶率为80%，随着培养基中ABA含量的增加，枯叶率也随之降低，说明ABA可延缓草莓试管苗的衰老。当ABA浓度为6.0 mg·L-1时，枯叶率又达到70%，此时植株受到伤害，停止生长。从每个月统计的试管苗的成活率来看，ABA浓度为4.5 mg·L-1时，保存效果最好，保存至12个月时，成活率可达88%，比对照的试管苗保存期延长5个月以上。

2.2.2 低温下的影响

由表3可见，保存到15个月，从试管苗的芽成活率及丛芽长势来看，ABA处理有利于草莓试管苗的保存，较高浓度（3.6，6.0 mg·L-1）ABA对草莓试管苗保存效果较好。在低温下保存15个月后，试管苗转移至常温培养室中进行再培养。观察结果为：培养1个月后，浓度3.6，6.0 mg·L-1处理的试管苗生长最好；培养2个月后，不含ABA的试管苗死亡，其他处理的试管苗生长正常；培养3个月后，浓度3.6，6.0 mg·L-1处理的试管苗生长较好；培养4个月后，0.1 mg·L-1处理的试管苗死亡；培养5个月后，0.3 mg·L-1处理的试管苗成活率为30%，其余处理的为100%。

表1 多效唑对红颜早生草莓试管苗保存的影响

表2 ABA对不同保存时间草莓试管苗成活的影响

表3 低温下ABA对试管苗保存效果的影响

2.3 甘露醇的影响

由表4可见，试管苗在低温下保存到15个月时，经甘露醇处理的试管苗成活率为100%，对照为40%，试管苗较壮。

表4 低温下甘露醇对草莓试管苗保存效果的影响

3 小结与讨论

多效唑是一种高效植物生长延缓剂，在植物体内抑制贝壳杉烯酶的活力，从而阻碍赤霉素的生物合成，使植株矮化。许多研究结果表明，多效唑可控制试管苗生长，调节生长速度，延长试管苗的保存时间。在本试验中，多效唑可延长草莓试管苗的保存时间至6个月，这是因为多效唑的抑制效应在一定浓度范围内随浓度的升高而加强，但高浓度的多效唑对试管苗有毒害甚至致死作用。可见，适当浓度的多效唑能达到壮苗的目的，但对于草莓红颜来说，超过6个月，多效唑的加入则抑制其生长。因此，多效唑应针对不同物种适量添加。

培养基中的生长抑制物质ABA具有调节植物发育、细胞分裂的作用，并使植物对干旱、寒冷等环境胁迫具有响应能力，可延长试管苗保存时间。本试验中，培养基中添加ABA后，常温下试管苗的芽增殖及丛芽生长明显缓慢，根的发生也得到抑制，试管苗的保存时间得到延长，浓度为4.5 mg· L-1的ABA对草莓试管苗的保存效果最好，比不添加ABA的试管苗延长5个月以上，浓度为6.0 mg· L-1的ABA对草莓试管苗轻微伤害。而在低温下，6 mg·L-1的ABA对草莓试管苗的保存效果最好，这是因为ABA对逆境胁迫有防卫作用，对逆境信号的转导。可启动植物体内的应激反应，提高植物防御逆境因子胁迫能力。培养基中添加一些高渗化合物，如甘露醇，是一种常用的缓慢生长保存手段。利用这一原理，甘露醇在多种植物种质资源保存中得到应用。研究表明，添加1%～5%甘露醇的MS培养基对茎尖的生长有抑制作用。本试验中，2.1%的甘露醇结合低温处理可使草莓试管苗种质保存15个月，试管苗丛生芽长势最佳。

综上分析认为，在草莓红颜茎尖离体保存中，培养基中添加ABA较多效唑、甘露醇更有利于延长试管苗的保存时间。试管苗在低温条件下保存效果比常温下更好。

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（责任编辑：张瑞麟）

S 668.4

：A

：0528-9017（2015）10-1574-02

文献著录格式：史芳芳.生长抑制剂对草莓茎尖离体保存的影响［J］.浙江农业科学，2015，56（10）：1574-1575，1657.

10.16178/j.issn.0528-9017.20151015

2015-05-05

史芳芳（1977-），女，山东昌邑人，助理研究员，硕士，从事农业技术推广及科研工作。E-mail：451784039@qq.com。