血清高尔基体膜蛋白73在原发性肝癌早期诊断中的应用价值

李庆芝

(附属菏泽市立医院，山东菏泽274000)

血清高尔基体膜蛋白73在原发性肝癌早期诊断中的应用价值

李庆芝

(附属菏泽市立医院，山东菏泽274000)

目的探讨原发性肝癌血清中高尔基体膜蛋白-73的表达水平及其早期诊断价值。方法选择住院患者和健康体检人群，分别用酶联免疫吸附法和化学发光免疫分析法检测63例原发性肝癌、56例肝硬化、87例慢性乙型肝炎、48例其他恶性肿瘤、58例健康对照组血清高尔基体膜蛋白-73与AFP水平，分析两指标各组间差别，绘制其诊断原发性肝癌的ROC曲线。结果高尔基体膜蛋白-73在不同年龄、性别、肿瘤大小间及不同AFP浓度的表达差异无统计学意义，高尔基体膜蛋白-73、AFP在PHC鉴别诊断的ROC曲线下面积分别为0.808、0.758。高尔基体膜蛋白-73诊断PHC组敏感性及特异性分别为88.6%，92.1%，均显著高于AFP。结论血清高尔基体膜蛋白-73对原发性肝癌的诊断价值优于AFP，有望成为原发性肝癌早期诊断的血清标记物。

肝；肿瘤；肝癌/诊断；GP73/诊断应用

原发性肝癌（PHC）是一种恶性程度高、进展快、治疗难度大、病死率高的恶性肿瘤，随着影像技术的发展，使得部分小肝癌患者得以及时发现，但影像学检查对肝内小的恶性病变发现仍很困难，而肿瘤越小，手术效果越好。因此，早发现、早诊断对提高PHC患者的生存率非常重要，目前PHC所依赖的早期诊断手段临床尚不满意。在诊断PHC的血清标志物中，AFP是最常用的指标，但其阳性率仅50%~ 60%，在小肝癌中阳性率仅30%，且在部分良性肝病、妊娠期女性中也会增高，这使得AFP用于PHC预警和监测带来一定的限制。高尔基体膜蛋白-73（GP73）是近年新发现的存在于高尔基体的一种跨膜糖蛋白，其在正常人的肝组织中有所表达，近来国内外研究发现GP73在PHC患者血清和肝组织中表达显著升高，提示其可作为一种新发现的早期诊断PHC的血清肿瘤标志物[1]。为此，我们对GP73在正常人群组、肝炎组、肝硬化组、原发性肝癌患者及其他恶性肿瘤患者血清中的表达水平进行检测，判断其作为PHC诊断标志物的敏感性与特异性，现报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料收集2012年10月-2014年10月我院住院、门诊患者和健康查体人群，分为5组，分别为原发性肝癌组（PHC）63例，男50例、女13例，年龄40~76岁，平均51岁；乙肝后肝硬化组56例，男38例、女18例，年龄21~68岁，平均52岁；乙型病毒性肝炎组：87例，男58例、女29例，年龄20~68岁，平均40岁；其他恶性肿瘤组48例（胃癌20例、胰腺癌8例、食管癌10例、结肠癌3例、胆囊癌2例、直肠癌3例、十二指肠癌2例），男35例、女15例，年龄21~ 85岁，平均63岁。健康对照组58例，男30例、女28例，年龄20~70岁，平均36岁。

1.2 方法GP73测定采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测；AFP测定采用电化学发光法，仪器为瑞士罗氏公司Cobas6000全自动生化免疫分析仪，试剂盒为仪器配套试剂。据实体或影像学检查测量肿瘤病灶的大小，将原发性肝癌患者分为瘤体≥5 cm及<5 cm两组。

1.3 统计学处理SPSS17.0，所获数据采用方差分析和秩和检验。方差不齐的使用秩和检验，设定P＜0.05有统计学意义。同时对GP73和AFP在原发性肝癌的诊断进行ROC曲线分析，确定诊断PHC的临界值。GP73的参考值为0～150μg/L，当≥150μg/ L时为阳性；AFP参考值为0~200μg/L，当≥200μg/ L时为诊断PHC临界值。

2 结果

2.1 原发性肝癌组不同年龄、性别、肿瘤大小及AFP浓度的水平原发性肝癌组＞55岁患者45例，血清GP73水平为454.045±114.852μg/L；≤55岁患者18例，血清GP73水平为423.260±98.615μg/L。男性患者50例，血清GP73水平为438.840±99.313μg/ L；女性患者13例，血清GP73水平为436.375± 122.616μg/L。原发性肝癌组患者中，肿瘤直径＞5 cm的39例，血清GP73水平为439.833±109.108μ g/L；肿瘤直径≤5 cm的24例，血清GP73水平为414.061±88.251μg/L。甲胎蛋白浓度＞200μg/L的患者36例，血清GP73水平为448.045±104.832 μg/L；甲胎蛋白浓度≤200μg/L的患者27例，血清GP73水平为423.260±95.625μg/L。63例肝脏肿瘤患者中，不同年龄、性别、肿瘤大小及不同AFP浓度的患者血清GP73水平进行比较，差异无显著性，P> 0.05。

2.2 各组待检血清GP73和AFP的表达水平见表1。各组血清GP73和AFP水平比较所有患者血清均可测出GP73、AFP，原发性肝癌患者血清GP73、AFP水平均显著高于其他各组人群，P<0.05。

表1 各组GP73和AFP测定值比较(μg/L)

2.3 血清GP73和AFP的ROC曲线分析应用ROC曲线分析GP73和AFP鉴别诊断PHC的效能。GP73曲线下面积为0.808(95%可信区间：0.761～0.854)，AFP的曲线下面积为0.758(95%可信区间：0.706~ 0.809)。根据ROC曲线以及“敏感度+特异度”取最大值的原则，确立GP73用于诊断PHC的临界值为150 μg/L，AFP用于诊断PHC的临界值为200μg/L。

2.4 血清GP73和AFP检测对原发性肝癌诊断中的灵敏度、特异度及阳性率AFP诊断PHC敏感性为65.3%、特异性为61.2%及阳性率为60.6%，而GP73诊断的敏感性为88.6%及特异性为92.1%及阳性率为90.6%。GP73的敏感性、特异性及阳性率均高于AFP，P<0.05。

3 讨论

原发性肝癌是一种恶性程度高，病程进展快，死亡率很高的恶性肿瘤。早期发现并有效治疗可以大大提高患者的生活质量和生存期。血清中甲胎蛋白(alpha-fetop rotein，AFP)作为肝癌的诊断及疗效随访观察指标已应用30多年，特别是属于肝癌高危监测人群的慢性肝炎、肝硬化患者，鉴于血清AFP检测诊断PHC的敏感度和特异度都存在一定的局限性，所以临床急切需要敏感的PHC标记物用来诊断早期阶段肝癌。GP73是存在于高尔基体的一种跨膜糖蛋白，是在研究成人巨细胞性肝炎病原学时发现的[2],并于2000年首先描述了在正常的人体肝组织中，GP73主要由胆管上皮细胞表达，而肝细胞表达很少或不表达，但当肝细胞发生癌变时，患者血清GP73水平显著上调。通过对352例血清标本行蛋白质印迹技术分析，证实PHC患者血清GP73水平显著高于肝硬化者，其早期发现PHC的敏感度较AFP显著升高[3]。国内多项研究亦证实血清GP73的监测有助于早期诊断PHC[4-6]。认为GP73可能成为临床上一个新的、比AFP更有效的PHC早期诊断的肿瘤标志物[7]。本研究则通过检测原发性肝癌、肝炎后肝硬化、慢性乙型肝炎、其他恶性肿瘤及健康对照者血清中GP73、AFP水平，结果提示PHC患者血清GP73及AFP水平显著高于其他各组，所有患者血清中均有GP73表达，在不同年龄、性别、肿瘤大小及不同AFP浓度间，GP73的表达水平差异无显著性，本研究应用ROC曲线客观地评价了GP73诊断肝癌的准确性，将它用于肝癌的诊断时，其灵敏度、特异度均优于AFP，尤其在AFP阴性的肝癌患者中有较高的检出率，提示血清GP73对PHC具有较高的诊断价值,应用ELISA法检测血清GP73具有方便、重复性好、易操作等优点，尽管GP73的生理功能还不清楚，其升高的具体机制和分泌途径也尚未完全研究透彻，但已经显示出比传统的AFP更好的应用价值。

[1]Zhou Y,Yin X,Ying J,etal.Golgiprotein 73 versusalpha-fetoprotein as a biomarker for hepatocellular carcinoma:adiagnostic metaanalysis[J].BMCCancer,2012,12:17.

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[3]Marrero JA,Romano PR,Nikolaeva O,et al.GP73，a residentGolgi glycoprotein，is a novel serum marker for hepatocellular carcinoma [J].Hepatology,2005,43：1007-1012.

[4]肖潇,陈东风.一种新的血清肝癌标志物-GP73[J].医学综述, 2012,(20):3380-3382.

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[7]Stefaniuk P,Cianciara J,Wiercinska-Drapalo A.Presentand future possibilities for early diagnosis of hepatocellular carcinoma[J].World JGastroenterol,2010,16(4):418-424.

The Clinical Va lue o f Serum Go lgi p ro tei73 in M ak ing Early D iagnosis of Prim ary Hepatoce llu lar Carcinom a

LiQingzhi
(Heze Muninal Hospital Affiliated to Heze Medical College,Heze 274000,Shandong)

ObjectiveTo investigate theexpression levelof serum Golgiprotein 73（GP73）in patientsw ith prima⁃ry hepatocellular carcinoma（HCC）and to discuss its clinical value in making early diagnosis.MethodsAmong w ards, out-patients and healthy check people in our hospital from October 2012 to October 2014,63 HCC,56 hepatic cirrhosis, 87 HBV carriers，48 other Malignant Tumor,and 58 healthy control people were involved in the study.GP73 in serum wasmeasured by ELISA and AFPwasmeasured by ADVIA Centaur XP Immunoassay System.The sensitivity,specifica⁃tionwere calculated.ResultsThe serum levelsof GP73 in differentages,gender,tumor sizesand concentriationsof AFP was not significantly different.The area of AFP,GP73 under the ROC curve in the differential diagnosis of PHC were 0.758,0.808.The sensitivity and specificity value of GP73 were 88.6%and 92.1%,higher than those of AFP.Conc lu⁃sion In diagnosing HCC，the expression level of serum GP73 is superior to AFP.It is hopeful that serum GP73may be proved to be an early serum tumormarker for HCC.

Liver;Tumor;Liver cancer/diagnosis;Golgiprotein-73/diagnostic use

R735.7

A

1008-4118（2015）02-0032-03

10.3969/j.issn.1008-4118.2015.02.012

2015-03-15