蜂王浆中氨基酸含量的测定

赵丽

（国家食品质量安全监督检验中心，北京100094）

蜂王浆又名蜂皇浆、蜂乳，蜂王乳，是蜜蜂巢中培育幼虫的青年工蜂咽头腺的分泌物，是供给将要变成蜂王的幼虫的食物。蜂王浆的成分十分复杂，含有大量蛋白质，糖类，氨基酸，核酸，脂肪酸，还有一定量的未知物质。蜂王浆的功能一直被人们所关注，大量研究表明，蜂王浆中含有多种活性成分[1-2]，具有一定生理和药理作用，如提高免疫力、抗菌、抗疲劳等，在临床，医药，食品，保健品，化妆品等方面都有着广泛的应用[3-6]，目前已有许多蜂王浆产品在国内市场销售。氨基酸是衡量蜂王浆营养价值的一项重要指标，本试验通过盐酸水解-氨基酸自动分析仪法测定蜂王浆中的氨基酸的含量。

1 材料与方法

1.1 仪器设备

L8800型氨基酸自动分析仪：日立公司；RE-2000型旋转蒸发器：上海市亚荣生化仪器厂；GZX-9140型显数鼓风干燥机：上海博迅实业有限公司；Milli-Q去离子水发生器：美国Milli-Q公司。

1.2 试剂

盐酸、柠檬酸三钠、氢氧化钠、氯化钠、柠檬酸、乙醇、乙酸钠、冰醋酸、茚三酮、乙二醇独甲醚、硼氢化钠，以上试剂均为分析纯

1.3 测定方法

称取混合均匀的蜂王浆样品0.5g（精确至0.0001 g）于水解管中，加入6 mol/L的盐酸溶液5 mL。水解管中冲入氮气，拧紧瓶盖使水解管密封，将水解管放入110℃恒温干燥箱内水解22 h后，取出冷却。

打开水解管，将水解液全部转入50 mL容量瓶中用去离子水定容至刻度，液体经0.22 μm的滤膜过滤，作为待测液。

待测液放入氨基酸自动分析仪中检测，外标法定量，色谱条件：标准分析柱4.6 mm×60.0 mm，反应柱温度57℃，反应器温度153℃，进样量20 μL。

2 结果与分析

2.1 六种市售蜂王浆产品中氨基酸的含量

蜂王浆中各氨基酸含量及谱图分别如表1和图1所示。

由表1测定结果可以看出，市售六种蜂王浆样品中均含17种氨基酸，其中有5种氨基酸含量较高，依次为天门冬氨酸（平均值为23.02 g/kg）＞谷氨酸（平均值为13.29 g/kg）＞脯氨酸（平均值为11.90 g/kg）＞亮氨酸（平均值为9.99 g/kg）＞赖氨酸（平均值为9.66 g/kg）。

表1 6种蜂王浆样品中氨基酸含量Table 1 The amino acid content of royal jelly g/kg

图1 蜂王浆样品氨基酸色谱图Fig.1 Chromatograms of amino acids in royal jelly

天冬氨酸又名天门冬氨酸，它是生物体内赖氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸等氨基酸的前体。它可作钾离子和镁高的载体向心肌送电解质，从而改善心肌的心缩功能，同时降低氧的消耗量。临床上用来治疗心脏病、肝病、糖尿病等。天冬氨酸铁盐可治疗贫血[7]。

谷氨酸是生物机体内氮代谢的基本氨基酸之一，在代谢上具有重要意义。谷氨酸是中枢神经系统主要的兴奋性神经递质，在脑缺血造成的神经元损伤过程中发挥重要作用。脑缺血时多种机制参与了谷氨酸释放的调节，如Ca2+依赖性的出胞式释放、谷氨酸转运体调节的释放、水肿诱发的释放和受体调节的释放等[8]。谷氨酸作为神经中枢及大脑皮质的补剂，对于治疗脑震荡或神经损伤，癫痫以及对弱智儿童均有一定疗效。

脯氨酸是身体生产胶原蛋白和软骨所需的氨基酸。脯氨酸的作用包括帮助人体分解蛋白质，用于创造体内健康细胞。它对维持皮肤和结缔组织健康成长非常重要（特别是组织创伤部位）。脯氨酸和赖氨酸都是生产羟脯氨酸和羟赖氨酸所需要的，这两种氨基酸构建胶原蛋白。胶原有助于愈合软骨，并给关节和脊椎提供缓冲，可作为各种软组织疾病的药物，如结缔组织受损、风湿性关节炎等，又可加快伤口愈合，以及治疗各种皮肤疾病[9]。

亮氨酸是哺乳动物的必需氨基酸和生酮生糖氨基酸，研究发现，亮氨酸是骨骼肌与心肌唯一可调节蛋白质周转的氨基酸，可以促进骨骼肌蛋白质的合成，在调节氨基酸与蛋白质代谢方面起重要作用[10]。另外也有研究表明，亮氨酸可以通过促进胰岛素和GLP-1分泌来降低血糖[11]。

赖氨酸能促进人体发育、增强免疫功能，并有提高中枢神经组织功能的作用。赖氨酸在体内参与体蛋白如骨骼肌酶和多肽激素的合成；是生酮氨基酸之一，当缺乏可利用的碳水化合物时，可参与生成酮体和葡萄糖的代谢（在禁食情况下，是重要的能量来源之一）；维持体内酸碱平衡；作为合成肉毒碱的前体物，参与脂肪代谢；另外，赖氨酸还可以提高机体抵抗应激的能力[12]。从表1中得知，所检测的不同蜂王浆样品中含有的氨基酸的种类相同，并且在含量上差异也不是很明显，说明蜂王浆产品氨基酸组成稳定且相似，其生理功能也相似。

2.2 蜂王浆中必需氨基酸的分析

对食物营养价值的评价，氨基酸起着十分重要的作用，尤其是必需氨基酸的含量与比例，对食物必需氨基酸的评价参考WHO/FAO推荐的氨基酸模式谱，各必需氨基酸的比例越接近标准模式谱规定的比值，说明其越符合人体的饮食所需其营养价值越高。本实验所测定的蜂王浆样品中，含有7种（苏氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸）人体必需氨基酸。从表2中可以看出，除蛋氨酸和苯丙氨酸较低外，其他6中人体必需氨基酸的比例均与WHO/FAO推荐的标准模式谱相接近，并且必需氨基酸占总氨基酸比例均高于推荐值，可见蜂王浆可以作为人体摄取必需氨基酸的一个重要来源。

表2 蜂王浆中必需氨基酸的比例与WHO/FAO标准模式谱的比较Table 2 The comparison between EAA in royal jelly and the WHO/FAO standard mode

3 结果与讨论

氨基酸在人体中具有重要的生理功能，尤其是必需氨基酸，在人体内有极其重要的生理和营养意义，也是食品营养价值评定的重要指标之一[7，13]。人体缺乏一种或几种必需氨基酸，就不能维持正常的生长发育。本研究表明国内市场普遍销售的几种蜂王浆产品中的氨基酸含量与组成十分丰富与合理，营养成分齐全，必需氨基酸和非必须氨基酸比例适宜，是一种天然营养的健康的食品，因此蜂王浆是有利于人体氨基酸营养平衡的优质食品原料[14-15]。加上蜂王浆的其他生理功效，使得蜂王浆成为市场上畅销的保健食品。

我国是蜂王浆高产国，相当一部分产品用于出口，进一步研究蜂王浆中复杂成分的活性，是我们应当重视的课题，蜂王浆中氨基酸含量的测定为以后人们的研究提供数据支持，也为更好的开发蜂王浆产品提供依据。

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