急性肺炎患儿肠道病毒感染状况研究

西安市儿童医院内分泌科（西安710002） 王旭艳 冯 媛

急性肺炎是儿童常见的感染性疾病，严重影响儿童的生命安全。病毒是引起急性肺炎的主要病原，常见的病毒病原主要有呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus，RSV）、腺病毒（Adenovirus，ADV）、流感病毒（Influenza virus，IFV）等［1，2］。肠道病毒广泛存在于自然界，是心肌炎、手足口病、肝炎等临床常见疾病的致病病毒。近年来新发现肠道病毒（Enterovirus，EV）是引起儿童急性肺炎的重要病毒病原［3］。我院于2010年6月至2012年6月对130例急性肺炎患儿进行肠道病毒病原的检测，以了解肠道病毒引起急性肺炎的感染状况，为本地区儿童急性肺炎的防治工作提供依据。

资料与方法

1 临床资料 选择急性肺炎患儿130例，标本采集均经患儿家属同意。所有急性肺炎患儿抽取鼻咽抽吸物作为研究样本。其中男74例，女56例。年龄10d至7岁，平均14．7±4．9个月，临床资料按照标本采集登记表通过病历查阅获得，所有急性患儿均做血常规、血气分析、鼻咽分泌物细菌培养、肝功能和心肌酶等实验室检查。

2 标本采集 患儿入院后根据临床诊断标准诊断为急性肺炎，在24h内取出样本，样本采集方法：一次性无菌吸痰管经鼻腔插入约8cm，吸取分泌物约2ml，每份分别加入1ml病毒保护液，成分为200U／ml的青霉素、链霉素、两性霉素B及0．125%BSA，充分震荡混匀后，在冰箱中冻融2次，离心，上清液－80℃保存。病毒RNA采用QLAamp提取试剂盒提取，操作严格按照说明书进行。提取的RNA逆转录为cDNA，然后采用PCR进行反应监测肠道病毒（EV71）。第一轮PCR操作反应条件为95℃变性4min，55℃退火30s，70℃延伸20s，25个循环；巢式PCR操作条件95℃预变性4min，50℃退火30s，70℃延伸15s，20个循环。扩增产物经1．5%琼脂糖凝胶电泳，之后进行核苷酸序列测定。

3 核苷酸序列测定及对比分析 阳性扩增产物纯化后送国家权威定点基因研究中心进行序列测定。采用专门软件将所测得的序列与标准参考株进行同源性对比剂核苷酸、氨基酸序列的变异分析，种系进化分析采用MEGA3．1软件进行。

4 统计学分析 本研究统计学分析采用SPSS15．0软件包进行，计量资料比较采用t检验，计数资料比较采用卡方（χ2）检验，以P＜0．05为有显著性差异，P＜0．01为有极显著性差异。

结 果

1 急性肺炎患儿中肠道病毒的检出情况 见表1。在130例急性患儿标本中，检测出肠道病毒引起感染的12例，阳性率为9．2%，其中混合病毒感染9例，分别为混合流感病毒4例，混合腺病毒3例，混合鼻病毒2例。肠道病毒阳性检出患儿的年龄为16d至29个月，平均5．2±2．7个月，大部分患儿在2岁以下（8例，占88．8%），12个月以下的6例，占66．6%；各年龄段患儿肠道病毒检出率无显著性差异。

表1 急性肺炎患儿各年龄段肠道病毒检出情况

2 急性肺炎患儿不同性别肠道病毒感染情况见表2。12例肠道病毒检出阳性的患儿中，男8例，占男性患儿的10．8%；女4例，占7．1%，两组统计学比较无显著差异（P＞0．05）。

表2 不同性别急性肺炎患儿肠道病毒感染情况

3 肠道病毒感染阳性患儿的临床资料 12例肠道病毒患感染患儿中有8例（66．6%）出现发热，6例（50%）出现咳嗽，7例（58．3%）出现气喘症状，4例（33．3%）合并其他症状，主要表现为腹泻（4例），急性呼吸窘迫症（3例）和粒细胞减少症状（1例）。

4 肠道病毒感染的时间分布 见表3。12例肠道病毒感染在2010年6月至2012年6月，感染部分发生在4～9月份，占91．7%，与其他月份比较有显著性差异（P＜0．05）。

表3 不同月份肠道病毒感染情况

讨 论

急性肺炎是儿科常见病，多发病，大多由病毒感染引起［4，5］，较常见的病毒为呼吸道病毒。近年来非呼吸道病毒肠道病毒引起急性肺炎的情况日益受到重视。肠道病毒为微小核糖核酸病毒科，有70余个血清型，主要包括新型肠道病毒5型，埃可病毒33型，脊髓灰质炎病毒3型，柯萨奇病毒A组24型，B组6型。肠道病毒广泛存在于自然界，与人类疾病关系密切，在温热带地区流行广泛，不同地区流行病毒类型常有改变。肠道病毒传染源为病毒携带者，在人与人之间经粪－口传播，由粪便和鼻咽物排除体外，健康人体感染肠道病毒后在鼻咽部持续存在1～2周，通过粪便开始排毒通常在2周至3个月，因此粪便污染的物件为主要传染源，同时还有昆虫、苍蝇等传播媒介，肠道病毒在儿童中感染较为常见［6］，近年来报道显示长春等地区肠道病毒感染在急性肺炎中占据重要地位［7］。临床病原体的诊断主要采取免疫学方法和RT－PCR技术，婴幼儿的治疗药物主要有免疫球蛋白和干扰素等抗病毒药物。

本研究中肠道病毒感染12例，阳性检出率为9．2%，远低于重庆地区的16．2%［8］，这可能与肠道病毒地区分布所致，但9．2%的阳性检出率仍然说明肠道病毒是急性肺炎的重要病原之一。从患儿的年龄来看，感染肠道病毒的患儿年龄主要在2岁以下，2岁以上的仅发现1例，这可能与较小患儿免疫系统发育不健全，体内缺乏肠道病毒的特异性抗体有关。从肠道病毒感染患儿的性别来看，男、女感染率无明显差异。感染肠道病毒的患儿临床症状主要有发热（占66．6%）、咳嗽（50%）、气喘（58．3%），少数患儿出现急性呼吸窘迫症和粒细胞减少症状，对于伴有腹泻的急性肺炎患儿，应首先考虑肠道病毒感染引起。本研究显示：肠道病毒的感染多发生在4～9月份，这是时间气候温热，而肠道病毒对温热气候比较适宜，所以夏秋时节应注意肠道病毒的感染。有研究报道称肠道病毒感染易引起患儿白细胞、心肌酶异常及肝功能等异常［9］，所以经注意这些指标的及时监测。

综上所述，肠道病毒在急性肺炎患儿中阳性检出率较高，对急性肺炎感染病毒病原谱是一个很好的补充，同时通过本研究认识到肠道病毒引起患儿急性肺炎的发病多发生在婴幼儿期，常伴有腹泻症状的出现，另外，临床医师应密切关注患儿白细胞、肝功能及心肌酶谱的变化，尽早确定是否为肠道病毒感染，及早治疗，以改善患儿的预后。

［1］ Pavia AT．Viral infections of the lower respiratory tract：old viruses，new viruses，and the role of diagnosis［J］．Clin Infect Dis，2011，52（4）：284－289．

［2］ 颜云盈，曾贵祥，邱宝强．儿童急性下呼吸道感染病毒病原学分析［J］．广西医科大学学报，2013，30（1）：108－110．

［3］ 谢正德，肖 艳，刘春艳，等．儿童急性下呼吸道感染病毒病原学2007－2010年监测［J］．中华儿科杂志，2011，49（10）：745－749．

［4］ 万凤国，陶云珍，张学兰，等．7岁以下儿童急性下呼吸道感染病原学研究［J］．中国实用儿科杂志，2008，23（12）：909－911．

［5］ 伏 瑾．肠道病毒感染在儿童手足口病及下呼吸道感染疾病中的研究［D］．北京协和医学院，2010：1－10．

［6］ 陈宗波．肠道病毒性下呼吸道疾病［J］．中国实用儿科杂志，2009，24（1）：7－10．

［7］ 梁 颖，李丽红，孙利炜．肠道病毒（EV71）所致小儿急性呼吸道感染的临床分析［J］．中国妇幼保健，2009，24（35）：5013－5014．

［8］ 张志勇，陈 昕，杨锡强，等．重庆地区急性呼吸道感染儿童肠道病毒的小儿急性呼吸道感染的研究［J］．临床儿科杂志，2008，24（35）：473－476．

［9］ 李 嘉，张 兵，肖霓光，等．急性下呼吸道感染儿童肠道病毒感染的状况［J］．中国当代儿科杂志，2013，15（5）：372－374．