Prx6在胃癌患者中的表达
2014-12-13洪成雨
洪成雨,郑 建,李 婷
(辽宁省肿瘤医院内三科,辽宁沈阳 110042)
临床上大量研究表明H.pylori引起的氧化应激在胃癌发生中起着十分重要的作用[1]。Peroxiredoxin 6(Prx6)是抗氧化蛋白Peroxiredoxins家族中的一员,除了具有抗氧化功能外,还通过多种机制参与细胞的增殖与分化以及细胞信号的转导。目前,相关研究报道已经证实抗氧化蛋白Prx6参与了膀胱癌、食管鳞癌及乳腺癌等多种肿瘤的发生,但其在胃癌中的表达及作用机制尚未见研究报道[2]。本文以我院2011年1月—2013年1月期间收治的80例胃癌患者为研究对象,分析Prx6在胃癌患者中的表达及临床意义,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选择我院2011年1月—2013年1月期间收治的80例胃癌患者为观察组,所有患者均经手术病理检查及组织学诊断确诊为胃癌。其中男48例,女32例。年龄22~75岁,平均(58.7±5.6)岁。另选同期体检健康者30例为对照组,其中男17例,女13例。年龄23~74岁,平均(55.4 ±4.8)岁。
1.2 方法 观察组对象取胃癌手术切除组织标本,对照组对象取正常胃组织的切缘组织标本。所有组织标本均经85%福尔马林固定、石蜡包埋、连续切片处理后,取4张连续切片用于实验,其中观察组取1张进行HE染色处理,用作组织学病理学检查。另外3张切片作免疫组织化学染色,对照组4张切片均作免疫组织化学染色。免疫组织化学染色操作中,采用 PowerVisionTM二步法,将切片行抗原修复后,将兔抗人多克隆Prx6抗体稀释为1∶1 000的浓度加入切片组织中,0.5%H2O2室温孵育过夜[3]。阳性对照采用已知阳性的胃癌组织切片,以 PBS代替一抗作阴性对照。二抗采用HRP标记羊抗兔多聚体,DAB显色,用PBS充分冲洗中止反应。最后,苏木素复染,酒精梯度脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,显微镜下对染色结果进行观察[4]。
1.3 观察指标
1.3.1 两组患者组织标本Prx6表达情况 于两组患者组织切片染色后,于显微镜下对两组患者组织标本的Prx6表达情况进行判定,判定标准[5]为:Prx6主要为胞浆染色,胞核染色则为少数,以胞浆和(或)胞核出现黄棕色染色判定为阳性。同时,根据阳性细胞所占的百分比,将2组患者组织切片的Prx6表达分为:0级、1级、2级、3级。其中,0级和1级为低表达;2级和3级则为高表达[6]。
1.3.2 观察组患者Prx6表达与胃癌临床及病理特征的关系 根据观察组患者的病理学检查结果,分析患者Prx6表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、分化程度、TNM分期和有无淋巴转移的关系。
1.4 统计学方法 采用SPSS 10.0统计软件,组间两均数比较用t检验,计数资料比较用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者组织标本Prx6的表达情况 见表1。
表1 2组患者组织标本Prx6表达对比分析/例(%)
从表1可以看出,观察组Prx6阳性率为72.5%,对照组26.67%,两组比较,差异具有显著性(P<0.01)。同时,观察组患者Prx6高表达率为47.5%,对照组为0,两组比较,差异有显著性(P<0.01)。
2.2 观察组患者Prx6表达与胃癌临床及病理特征的关系见表2。
表2 观察组患者Prx6表达与胃癌临床及病理特征的关系
从表2可以看出,观察组患者在性别上,男性和女性Prx6阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);在年龄上,年龄≥60岁患者和<60岁患者的Prx6阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);在肿瘤部位上,肿瘤发生在胃贲门、胃体、胃窦的患者的Prx6阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);在分化程度上,低末分化组患者Prx6阳性表达率为85.42%,高中分化组为53.13%(P<0.05);在TNM分期上,Ⅰ+Ⅱ期组患者Prx6阳性表达率为53.33%,Ⅲ +Ⅳ组为84.13%,两组比较(P <0.05);在有无淋巴转移上,有淋巴转移组患者 Prx6阳性表达率为84.62%,无淋巴转移组为50%(P<0.05)。表明:胃癌患者Prx6表达与患者的性别、年龄、肿瘤发生部位无关,而与分化程度、TNM分期及淋巴转移与否有关,即Prx6在胃癌中的表达与胃癌的发生发展密切相关。
3 讨论
胃癌作为消化系统恶性肿瘤中发病率、死亡率最高的肿瘤疾病,已成为威胁人们身心健康的重要杀手。胃癌的起病、侵袭与转移是一个及其复杂的多基因调控异常的过程[7]。近年来,随着临床医学对胃癌发病机制研究的不断深入,抗氧化蛋白家族Peroxiredoxin(Prx)在胃癌患者中的表达成为临床研究的热点[8-9]。本研究中观察组患者Prx6阳性率明显高于对照组,且观察组患者Prx6高表达率明显高于对照组,提示Prx6表达可能成为胃癌临床诊断的有用指标。同时,本研究表明胃癌患者Prx6的表达与患者的性别、年龄、肿瘤发生部位无关。但在分化程度上,低末分化组患者Prx6阳性表达率高于高中分化组,Ⅲ+Ⅳ组患者的Prx6阳性表达率高于Ⅰ+Ⅱ期组,有淋巴转移组患者的Prx6阳性表达率为高于无淋巴转移组,表明Prx6在胃癌中的表达与胃癌的发生发展密切相关。
[1] 吴 博,杨幼林,李冬月.抗氧化蛋白与消化道肿瘤关系的研究进展[J].生物医学工程与临床,2012,4(5):113 -114.
[2] 郭启帅,黄 曦,张 俊,等.靶向PeroxiredoxinⅠ基因的 shRNA真核表达载体的构建及生物学功能鉴定[J].第三军医大学学报,2011,9(2):221 -223.
[3] 杨玲竹,高 萃,瞿小玲.抑癌基因PTEN和抗氧化蛋白PeroxiredoxinⅡ在自然流产患者绒毛组织的表达及意义[J].生殖与避孕,2013,6(2):55 -57.
[4] 章 波,向渝梅,白 云.抗氧化蛋白Peroxiredoxin家族研究进展[J].生理科学进展,2004,35(4):352 -355.
[5] 李秀琴,任 波,张淑兰.PeroxiredoxinⅡ在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义[J].中国现代医学杂志,2007,3(2):156 -157.
[6] 刘珊林,施冬云,潘喜华,等.抗氧化干预对肝癌细胞增殖及N-ras基因表达的作用[J].生物化学与生物物理学报,2001,8(4):133-135.
[7] 李克兵.老年胃癌与中、青年胃癌的临床表现、病理特征的比较及预后分析[J].安徽医药,2013,17(2):285 -286.
[8] Lee TH,Kim SU,Yu SL,et al.Peroxiredoxin II is essential forsustaining life span of erythrocytes in mice[J].Blood,2003,101:5033-5038.
[9] Chang TS,Jeong W,Choi SY,et al.Regulation of peroxiredoxin I activity by Cdc2-mediated phosphorylation[J].J BiolChem,2002,277:25370-25376.