输血前后子宫肌瘤患者淋巴细胞及体液免疫功能测定

刘波 裴银辉 于丹军 周明璐 王维维 张洪东 林翠

(河北联合大学基础医学院，232002)

子宫肌瘤，又称子宫平滑肌瘤，是女性生殖器最常见的一种良性肿瘤。通常可分为浆膜下肌瘤、肌壁间肌瘤、黏膜下肌瘤或宫颈肌瘤、阔韧带肌瘤等，多无症状，少数表现为阴道出血，腹部触及肿物以及压迫症状等。如发生蒂扭转或其他情况时可引起疼痛。以多发性子宫肌瘤常见。当子宫肌瘤导致出血，却没有及时采取积极的治疗，会引起贫血的发生。输血是纠正低血容量和贫血的有效措施，是外科治疗的重要手段。悬浮红细胞是成分输血中最常用的红细胞制剂之一，由于其输注既能纠正贫血，又能减少输血不良反应的发生率，因此在临床应用中所占比例越来越大。

然而输血在作为一种积极治疗手段的同时，也会引起副作用，约3%受血者输血时发生严重程度不同的副作用，甚至致命。随着研究的深入，输注同种异体血液的诸多危险开始被认识，这其中包括机体免疫功能的异常。

根据近年来的报道看，大多数学者认为输血引起的免疫调节主要是免疫抑制，尤其对肿瘤病人围手术期输血更可造成术后感染率和肿瘤复发率增加，直接影响病人的预后[1]。1999年靳艳华等学者对子宫肌瘤患者手术前后部分免疫指标进行观察，结果表明患者输用异体血后CD3，CD4，CD4/CD8，RBC-CR3，RBC-IAP值下降，RBC-IAR值上升并具有显著性差异，提示输用异体血可能降低机体的免疫功能[2]。

本研究主要是进一步探讨输血对子宫肌瘤患者的免疫功能是否有影响，通过对淋巴细胞数、免疫球蛋白及补体的检测，总结输血对子宫肌瘤患者的机体免疫功能的影响，从而为临床合理用血，预防术后并发症发生，提高治愈率提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验对象 对秦皇岛市第一医院妇科2008-01—2013-01收治的子宫肌瘤手术病人120例，术前Hb为70～90 g/L，无内外科合并症及并发症，年龄43～56岁，平均48.6岁，术中均有输注红细胞2 U。输血前后均未使用影响免疫功能的药物。每例病人输血前取外周血5 mL，输血后第2天、第5天以及第10天各取外周血5 mL。

1.2 主要仪器及试剂

1.2.1 主要仪器 全自动血细胞分析仪Sysmex XE-2100，贝克曼·库尔特IMMAGE全自动特种蛋白分析仪。

1.2.2 主要试剂 IgA检测试剂盒(免疫比浊法，Beckman Coulter，Inc)，IgM检测试剂盒(免疫比浊法，Beckman Coulter，Inc)，IgG检测试剂盒(免疫比浊法，Beckman Coulter，Inc)，补体C3检测试剂盒(免疫比浊法，Beckman Coulter，Inc)，补体C4检测试剂盒(免疫比浊法，Beckman Coulter，Inc)。

2 方法

2.1 血常规检测 ①无菌采集肘正中静脉血2 mL。②开启仪器，准备就绪发光二极管发亮响应。③颠倒试管，将样品管彻底混合，取下样品盖，将样品管置于取样针中，然后按开始开关。准备就绪发光二极管熄灭，并且连续两次发出短促的蜂鸣声后，取下样品管。当准备就绪发光二极管重新发亮时，准备下一个样品，并重复上述步骤。④标本分析。按终止键终止进样器运行，输入标本号，手工模式分析样本。

2.2 免疫球蛋白IgA含量测定 ①无菌采空腹静脉血2 mL，以999 g离心力离心10 min，分离血清。②准备试剂。使用IgA检测试剂盒。③标本检测：装载样品后运行监测。④检验后保存标本。⑤IMMAGE免疫化学系统将自动计算结果。

2.3 免疫球蛋白IgM含量的测定(同2.2)

2.4 免疫球蛋白IgG含量测定(同2.2)

2.5 补体C3的测定 ①无菌采集空腹静脉血2 mL，以999 g离心10 min，分离血清上机测定。②试剂准备：使用补体C3检测试剂盒。③标本上机检测：装载样品后运行监测。④检验后保存标本。⑤IMMAGE免疫化学系统将自动计算结果。

2.6 补体C4的测定 步骤同上补体C3检测，使用补体C4检测试剂盒。执行签收标本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。IMMAGE免疫化学系统将自动计算结果。

3 结果

3.1 输血前后子宫肌瘤患者血清中红细胞及血红蛋白测定结果 应用全自动血细胞分析仪测定120例子宫肌瘤手术患者输血前及输血第2天血液中红细胞及血红蛋白含量，各组数据符合正态分布，应用配对比较的t检验对资料进行统计学处理。输血后子宫肌瘤患者血液中红细胞及血红蛋白含量均高于输血前，差异均具有高度统计学意义(P＜0.01，表1)。

3.2 输血前后子宫肌瘤患者外周血中淋巴细胞和单核细胞数量测定结果 应用全自动血细胞分析仪测定120例子宫肌瘤手术患者输血前及输血第2天血液中淋巴细胞和单核细胞含量，各组数据符合正态分布，应用配对比较的t检验对资料进行统计学处理，输血前后不同时间子宫肌瘤患者血液中淋巴细胞和单核细胞含量差异均有高度统计学意义(P＜0.01，表2)。

3.3 输血前后不同时间子宫肌瘤患者血清中免疫球蛋白含量测定结果 应用免疫比浊法测定120例子宫肌瘤手术患者输血前及输血后第5天、第10天血清中IgA、IgM、IgG含量，各组数据符合正态分布，应用方差分析对资料进行统计学处理，输血前后不同时间子宫肌瘤患者血清中免疫球蛋白IgA、IgM及IgG含量差异均具有高度统计学意义(P＜0.01，表3～4)。

3.4 输血前后不同时间子宫肌瘤患者血清中补体C3和C4含量测定结果 应用免疫比浊法测定120例子宫肌瘤手术患者输血前及输血后第5天、第10天血清中补体C3和C4含量，各组数据符合正态分布，应用方差分析对资料进行统计学处理，输血前后不同时间子宫肌瘤患者血清中补体C3、C4含量差异均具有高度统计学意义(P＜0.01，表5～6)。

表1 输血前后子宫肌瘤患者红细胞及血红蛋白含量比较(n＝120)

表2 输血前后不同时间子宫肌瘤患者外周血中淋巴细胞和单核细胞数量比较(n＝120)

表3 输血前后不同时间子宫肌瘤患者血清中免疫球蛋白含量比较(n＝120)

表4 输血前后不同时间子宫肌瘤患者血清中免疫球蛋白含量组间两两比较

表5 输血前后不同时间子宫肌瘤患者血清中补体C3和C4含量比较(n＝120)

4 讨论

实验中子宫肌瘤患者输血后淋巴细胞和单核细胞数量明显低于输血前，这是由于输血导致了子宫肌瘤患者细胞免疫功能的下调，即T细胞和抗原提呈细胞功能下调，而细胞免疫功能的下调又主要表现为机体外周的免疫耐受和无能应答。它们在输血免疫的调节中起着关键的作用。如果缺乏适当刺激信号或抗原提呈细胞表面的调节因子，T细胞对这种抗原一般无反应。细胞免疫功能的下调可能包括以下几个方面：输血引起了子宫肌瘤患者T淋巴细胞的改变；输血引起子宫肌瘤患者体内B淋巴细胞的变化；输血引起子宫肌瘤患者体内NK细胞的变化；输血引起子宫肌瘤患者体内红细胞免疫系统的变化；输血引起子宫肌瘤患者体内其他细胞的变化。

程卫平等[3]研究表明恶性肿瘤患者输血后血清IgA，IgM和IgG含量发生改变是暂时的，这是由于血液作为异物成分进入机体后刺激所造成的，本研究中IgA、IgG输血后第5天增高，这是由于血液作为异物成分进入机体后刺激所造成的，尽管输血可以暂时缓解机体由于贫血所出现的一系列症状，但是输血后第10天其水平又下降至比输血前低的水平，IgM含量输血后一直下降，这说明输血对子宫肌瘤患者免疫系统产生了影响，而这种影响主要是免疫抑制。同样在对恶性肿瘤患者输血前后免疫球蛋白的研究中，毕琳等[4]研究的实验结果表明输血使患者的体液免疫功能发生改变。2007年严建新等[5]对103例手术患者输血前后的免疫球蛋白测定结果显示输血后第5天IgG升高，与输血前比较有显著性差异，严建新等认为这说明了输血后患者体液免疫功能增加，这是血液进入人体后作为异物刺激机体引起的，他的研究中输血后第10天IgA、IgM和IgG与输血前相比有显著地下降，说明输血对体液免疫产生了抑制作用。同年，严建新等[6]在对急诊外伤手术患者输血前后的免疫球蛋白的研究中表明输血后体液免疫功能增加只是暂时改变。此外，在同一研究领域刘静[7]对手术患者输血前后淋巴细胞及体液免疫功能的研究表明手术患者输血后淋巴细胞和单核细胞数量下降，且输血后第10天IgA、IgM和IgG与输血前比有显著性差异，这是因为输血对手术患者免疫功能产生了抑制。20世纪初杨鲜平等[8]对肿瘤患者输血前后的免疫球蛋白测定分析表明肿瘤患者输血后血清中IgA、IgM和IgG的含量发生改变只是短暂性的，输血会影响肿瘤患者的体液免疫功能。2011年李东杰等[9]对骨折手术患者输血前后免疫球蛋白的测定分析表明输血对骨折手术患者的体液免疫产生了抑制作用。输血对免疫系统的效应被称为免疫调制，因为它可能包含免疫反应增强或抑制。以往绝大多数的学者经过研究认为免疫抑制在输血引起的免疫调节中占主要地位。1999年靳艳华等[2]学者对子宫肌瘤患者手术前后部分免疫指标进行观察，结果表明患者输用异体血后CD3、CD4、CD4/CD8，RBC-CR3，RBC-IAP值下降，RBC-IAR值上升并具有显著性差异，提示输用异体血可能降低机体的免疫功能。而本实验通过对子宫肌瘤患者输血前后免疫球蛋白的测定比较，也提示输血可能降低了子宫肌瘤患者的免疫功能。

表6 输血前后不同时间子宫肌瘤患者血清中补体C3、C4含量组间两两比较

免疫球蛋白与抗原结合后，借助于补体的活化发挥溶细胞效应。实验数据显示补体C3、C4数量下降，与输血前相比差异有高度统计学意义，这可能与血液保存过程中血细胞产生的条件抗原物质及库血老化，免疫复合物过多，红细胞负担过重有一定的关系。现已知血液储存过程中释放的某些物质包括组胺、纤维蛋白酶原、因子、过氧化物、由嗜酸粒细胞及嗜碱粒细胞释放的阳离子蛋白等均能增加免疫抑制。卢文青等[10]对新生儿交换输血治疗后血清中补体变化的研究表明成人献血后由于在血液保存和合成血液的过程中操作的因素可能使补体不稳定，导致换血后的患儿血清补体C3、C4含量依然比新生儿正常水平低。此外，李东杰等[9]在20世纪对骨折手术患者输血前后的补体含量测定研究表明，实验组输血前血清C3、C4含量高于输血后3 d，且差异有统计学意义，实验组术后3 d血清中C3、C4含量比对照组术后3 d低。陈敏霞等[6]对外伤患者输血后补体含量变化的研究发现输血后补体C3、C4含量下降，并且这种改变可能是由于血细胞在血液保存过程中逐渐老化和产生条件抗原，免疫复合物增多以及红细胞负担加重。之后刘静[7]对手术患者输血前后补体含量的测定也证明了这一点。

综上所述，输血能够抑制子宫肌瘤患者的免疫功能。所以临床医生在决定是否给子宫肌瘤患者输血时要综合考虑。

[1]耿长辉，王锡山.围手术期输血对恶性肿瘤患者的影响[J].国际外科学杂志，2010，37(10)：703-704.

[2]靳艳华，曹峰林.自体和异体输血子宫肌瘤患者手术前后部分免疫指标观察[J].中国输血杂志，2000，13(3)：199-200.

[3]程卫平，王海涛.恶性肿瘤患者输血前后免疫球蛋白测定结果分析[J].泰山医学院学报，2008，29(1)：22-23.

[4]毕琳，孙维罗.输血对恶性肿瘤患者血清免疫球蛋白水平的影响与分析[J].中国初级卫生保健，2010，24(3)：107-108.

[5]严建新，陈敏霞.输血对病人淋巴细胞及体液免疫功能的影响[J].江西医学检验，2007，25(2)：170.

[6]严建新，陈敏霞.术中输血对外伤病人淋巴细胞亚群及免疫球蛋白影响[J].中国实验诊断学，2007，11(5)：697.

[7]刘静.输血前后患者淋巴细胞及体液免疫功能测定[J].中外医疗，2008，27(12)：45.

[8]杨鲜平，李春贵.肿瘤患者输血前后免疫球蛋白测定分析[J].中原医刊，2003，30(24)：2-3.

[9]李东杰，宋建生，朴文花.输血前后骨折手术患者血清免疫球蛋白及补体的检测分析[J].国际检验医学杂志，2011，32(19)：2203-2204.

[10]卢文青，王启新，何玲，等.新生儿交换输血术对新生儿血清补体C3、C4的影响[J].实用医学杂志，2012，28(3)：389-392.