肠道菌群状态与特应性皮炎病变程度的相关性分析

郭 震，戴景斌，姜丽亚，赵丙波

(聊城市人民医院，山东聊城252000)

大量研究表明，肠道微生物在诱导免疫耐受、抑制过敏性疾病的发生和改善过敏性疾病症状方面起重要作用［1，2］。特应性皮炎是与遗传有关的，具有产生lgE倾向的一种慢性、难治性皮肤病，随着世界工业化的发展，该病发病率逐年升高。特应性皮炎病因众多，遗传、环境、食物、情绪等均与其发病有关［3］。近年来，肠道菌群状况异常与过敏性疾病的关系引起临床重视，研究结果表明婴幼儿特应性皮炎的发生可能与肠道菌群紊乱有密切关系，但是目前国内外对成年特应性皮炎患者肠道菌群状况的研究尚少［4～6］。2011年7月～2013年7月，我们观察了68例特应性皮炎患者的肠道菌群状况，现分析结果，探讨肠道菌群数量与特应性皮炎病情程度的相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 于聊城市人民医院皮肤科门诊就诊的68例特应性皮炎患者(观察组)男33例，女35例;年龄18～45(32.62±1.46)岁;病程15～44(33±2.14)年;均符合Hanifin和Rejka特应性皮炎诊断标准［7］;无其他伴发症及系统疾病，治疗前 2周内未外用糖皮质激素及免疫抑制剂治疗;1个月内未系统使用过糖皮质激素;6个月内未系统使用过益生菌、抗生素、免疫抑制剂或中药治疗。采用欧洲特应性皮炎特别工作组制定的特应性皮炎评分系统(SCORAD)［8］评估病情严重程度，病情为轻度(总分＜15分)20例，中度(总分15～40分)28例;重度(总分＞40分)20例。本院体检健康者20例作为对照组，男 11例，女 9例，年龄 20～43(31.67±1.89)岁;排除过敏性疾病、食物过敏、湿疹及过敏体质者。两组性别比例及年龄无组间偏倚。

1.2 肠道菌群数量检测 取两组的新鲜中段大便500 mg(天平称取)，-4℃冰箱保存，时间不超过1 h［9］。预处理后，采用PCR荧光定量法检测粪便内乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、粪肠球菌及屎肠球菌数量;结果以每克湿便的细菌拷贝数的对数(以10为底数)表示。双歧杆菌、乳酸杆菌及大肠杆菌特异性引物根据16S rRNA基因序列设计;粪肠球菌和屎肠球菌特异性引物根据其ddl基因序列设计;引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。标准菌株:ATCC29212(粪肠球菌)、ATCC25922(大肠杆菌)。

1.3 统计学方法 采用SPSS18.0软件行统计学处理。实验数据以±s表示，进行方差检验。P＜0.05为差异有统计学意义，P＜0.01为差异有显著统计学意义。

2 结果

两组粪便标本中5种细菌数量比较见表1。

3 讨论

肠道菌群是一个复杂的微生态系统，肠道内的各类微生物处于一种平衡的共生状态。研究表明，人结肠部位有400～500种细菌，细菌总数是人体细胞总数的10倍。肠道微生物菌群不仅在调节宿主量与代谢、促进营养物质的吸收中起重要作用，且可通过代谢药物及有害外源复合物、抵抗外源性致病微生物和内源性条件致病菌、影响肠道免疫系统、促进肠道黏膜屏障的免疫功能和成熟等作用维持人体的健康［10，11］。肠道微生物菌群是肠道和免疫系统发育的重要刺激物，缺乏正常的健康肠道共生菌群时，正常的保护性黏膜屏障就会受到破坏，黏膜屏障的破坏增加抗原的转运和高水平抗原的暴露，导致促炎因子的分泌，引起异常的免疫反应和早期过敏性疾病的发生。大量研究表明，微生物暴露和肠道微生物包括益生菌在诱导免疫耐受、抑制过敏性疾病的发生和改善过敏性疾病症状方面起重要作用［12］。肠道菌群有助于恢复肠道正常的通透性，改善肠道免疫屏障功能，上调免疫调节性细胞因子，下调局部和全身过敏炎症反应特征性的促炎细胞因子的产生，调节机体的免疫反应，降低肠道炎症反应［13～16］。

表1 两组粪便标本细菌定量检测结果(±s)

表1 两组粪便标本细菌定量检测结果(±s)

注:与对照组比较，﹟ P ＜0.01;与病情轻度者比较，*P ＜0.01

组别 n 双歧杆菌 乳酸杆菌 大肠杆菌 粪肠球菌 屎肠球菌观察组 68 7.38±0.38﹟ 6.05±0.26﹟4.71 ±0.23 4.65 ±0.16 4.49 ±0.16轻度 20 8.46 ±0.43 6.91 ±0.23﹟ 4.58 ±0.22 4.57 ±0.13 4.27 ±0.17中度 28 7.02 ±0.34* 5.87 ±0.32* 4.47 ±0.26 4.63 ±0.15 4.55 ±0.14重度 20 6.81 ±0.37* 5.45 ±0.20* 5.02 ±0.19 4.44 ±0.17 4.39 ±0.16对照组 20 8.57 ±0.32 7.26 ±0.18 4.66 ±0.17 4.72 ±0.15 4.43 ±0.06

双歧杆菌及乳酸杆菌是人体肠道内的两种常见益生菌。本研究结果显示，特应性皮炎患者粪便中双歧杆菌及乳酸杆菌的数量明显低于健康者，提示成年特应性皮炎患者存在肠道菌群失调的情况。近期Roessler等［17］进行的一项随机双盲对照研究结果显示，成人特应性皮炎患者粪便中乳酸杆菌数量明显低于健康者，与本研究结果一致;但双歧杆菌数量与健康人无统计学差异，与本研究不同，可能与两研究的检测方法、欧亚地区人种及饮食习惯等不同有关。

本研究结果显示，特应性皮炎患者病情为轻度者乳酸杆菌数量较健康人显著降低，中、重度者双歧杆菌和乳酸杆菌均较轻度及健康人显著降低，而中度和重度者双歧杆菌及乳酸杆菌数量无显著差异，提示特应性皮炎患者肠道菌群失调主要发生在中度及重度患者。

分析本研究结果，特应性皮炎患者，尤其是病情为中、重度者存在肠道菌群失调，主要表现为乳酸杆菌、双歧杆菌降低数量减少;而肠道菌群失调诱发或加重了特应性皮炎的过敏反应。对此类患者应采取改善肠道菌群异常、加强肠道免疫屏障功能、降低肠道炎症反应的相关措施。本研究的不足之处是样本量较少，后续研究中将进行多中心、大样本的临床研究，以更全面的反映成人特应性皮炎患者的肠道菌群状况。

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