急慢性特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞亚群的表达

张红 刘庆华 田芳

特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura, ITP)是一种获得性器官特异性自身免疫性疾病, 以免疫介导的血小板减少为特征。其发病原因目前尚不清楚,发病机制也未完全阐明, 涉及免疫、遗传、环境等多方面因素。但是目前研究已经发现ITP患者在人体免疫调节的许多环节都存在异常。本研究通过分析ITP患者外周血的淋巴细胞亚群的表达, 探讨ITP患者的免疫状态与其发病机制的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2011年11月～2013年6月在泰山医学院附属医院就诊的74例ITP患者, 男28例, 女46例, 平均年龄36岁(3～77岁)。74例患者中急性型33例, 慢性型41例, 诊断标准参照文献［1］。对照组为30例健康查体人员,男10例, 女20例, 平均年龄37.5岁(21～58岁)。

1.2 标本的采集 取患者及健康查体人员的外周血标本2 ml, 采用肝素抗凝, 立即送检。急性ITP患者于治疗前采集外周血标本, 慢性ITP患者采集标本时血小板水平低于100×109/L。

1.3 方法 流式细胞仪测定淋巴细胞亚群。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行分析。计量资料以均数± 标准差(±s)表示, 采用t检验。P<0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 ITP患者淋巴细胞亚群的表达 ITP患者淋巴细胞亚群CD3+CD4+为 (34.15±8.55)%, 对 照 组 为 (36.74±3.65)%,t=2.166, P=0.033；ITP患者CD4+/CD8+为 (1.24±0.44)%, 对照组为(1.48±0.25)%, t=3.582, P=0.001；ITP患者CD3+CD8+为(30.63±7.72)%, CD19+为(18.23±7.67)%, 均显著高于正对照组(P=0.000)。见表1。

2.2 急慢性ITP患者淋巴细胞亚群的表达 急性ITP患者外周血CD19+细胞比例为(22.60±7.25)%, 慢性ITP患者为(14.14±5.57)%, 两者比较差异有统计学意义(t=5.677,P=0.000)；而慢性ITP患者的CD3+细胞的比例为(76.02±11.00)%, 急性ITP患者为(66.82±10.95)%, t=3.583, P=0.001。

表1 ITP患者和对照组之间淋巴细胞亚群所占比例的比较(±s, %)

表1 ITP患者和对照组之间淋巴细胞亚群所占比例的比较(±s, %)

注：at=1.53, P=0.129；bt=2.166, P=0.033；ct=4.858, P=0.000；dt=3.582, P=0.001；et=7.442, P=0.000

组别 例数 CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD4+/CD8+CD19+对照组 30 69.88±3.59 36.74±3.65 25.20±3.65 1.48±0.25 11.22±1.67 ITP 组 74 72.18±11.62a 34.15±8.55b 30.63±7.72c 1.24±0.44d 18.23±7.67e

表2 急慢性ITP患者淋巴细胞亚群所占比例的比较(±s, %)

表2 急慢性ITP患者淋巴细胞亚群所占比例的比较(±s, %)

注：at=3.583, P=0.001；bt=0.68, P=0.499；ct=1.891, P=0.063；dt=0.681, P=0.498；et=5.677, P=0.000

组别 例数 CD3+CD3+CD4+CD3+CD8+CD4+/CD8+CD19+急性型组 33 66.82±10.95 37.35±8.56 30.36±6.02 1.24±0.35 22.60±7.25慢性型组 41 76.02±11.00a 38.83±9.79b 33.34±7.54c 1.30±0.36d 14.14±5.57e

3 讨论

ITP是临床上最为常见的血小板减少症, 发病率约为5～10/10万人口［2］, 因为尚无明确的实验室检查指标,现在ITP诊断仍为排除性诊断。近年来,随着细胞生物学和分子免疫学的飞速发展,国内外针对ITP的病因和发病机制开展了一系列研究性试验。目前认为ITP的发生主要与免疫功能紊乱相关。不仅包括B淋巴细胞功能异常, 而且存在T淋巴细胞表达及功能的异常改变。自身反应性T细胞识别血小板抗原特定表位,进而活化,分泌细胞因子,并与相应B淋巴细胞作用,激活B淋巴细胞, B淋巴细胞增殖分化为浆细胞,导致自身抗体的产生。目前认为ITP患者血小板自身抗体主要是针对血小板膜糖蛋白 GPⅡb/Ⅲa和GP Ib/Ⅸ［3］。既然T淋巴细胞各亚群间正常的比例和功能是保持人体正常免疫应答的基础。那么, T淋巴细胞比例的失调就可以引起B淋巴细胞激活的增加, 从而产生抗血小板抗体, 使血小板的破坏增加［4］。因此, 目前学者认为T淋巴细胞功能和比例失调导致B细胞激活是ITP主要的发病机制［5］。

CD4+T细胞可辅助B淋巴细胞产生抗体及分泌细胞因子,起辅助细胞和体液免疫的作用；CD8+T细胞具有细胞毒作用,抑制细胞和体液免疫。辅助性T细胞/细胞毒性T细胞的平衡在自身免疫性疾病的发生发展过程中起重要作用［6］。本研究发现ITP患者淋巴细胞亚群CD4+、CD4+/CD8+比例低于正常对照组, 而CD8+、CD19+比例高于正常对照组, 说明了ITP的发生不仅存在B淋巴细胞异常, 也存在T淋巴细胞的异常。进一步分析发现, 急性ITP患者CD19+细胞比例高于慢性ITP患者；而慢性ITP患者的CD3+细胞的比例高于急性ITP患者。说明急性ITP和慢性ITP 的发病机制存在一定的差异, 急性ITP患者是以体液免疫功能亢进为主, 慢性ITP患者则以细胞免疫功能亢进为主。认识急慢性ITP发病机制的不同对治疗方案的选择具有一定的指导意义［7］。急性ITP患者以体液免疫功能亢进为主, 应用糖皮质激素往往能够收到较好效果,而存在细胞免疫功能亢进、对于糖皮质激素治疗欠佳的慢性ITP患者, 使用抑制细胞免疫功能的药物对治疗可能会有较大的帮助。

［1］张之南.血液病诊断及疗效标准.第2版.北京：科学技术出版社, 1998:279-289.

［2］陆再英, 钟南山.内科学.北京:人民卫生出版社, 2008:648-649.

［3］张之南, 郝玉书, 赵永强, 等.血液病学.第2版.北京：人民卫生出版社, 2011:1273-1280.

［4］Kuwana M, Kaburaki J, Kitasato H, et al.Immunodominant epitopes on glycoprote inⅡb/Ⅲa recognized by autoreactive T cells in patients with immune thrombocytopenic purpura.Blood, 2001,98(1):130-139.

［5］张峰, 侯明.T 细胞异常与特发性血小板减少性紫癜.中华血液学杂志, 2005, 26(3):188 -190.

［6］Haggqvist B, Hultman P.Effects of deviating the Th2-response in murine mercury-induced autoimmunity towards a Th1-response.Clin Exp Immunol, 2003, 134(2):202-209.

［7］伍星, 瞿文 , 王珺, 等.免疫性血小板减少症125 例临床分析.中国实验血液学杂志, 2011, 19(2):450-454.