参芪五味子浓缩丸的制备及质量研究

2014-11-25郑继宇孙长山席雪娇

锦州医科大学学报 2014年4期

郑继宇，孙长山，席雪娇

(1.辽宁好护士药业(集团)有限责任公司，辽宁桓仁 117201;2.沈阳药科大学，辽宁沈阳 110016)

参芪五味子浓缩丸是由黄芪、党参、五味子及酸枣仁等中药精制而成，其中黄芪与党参为常用中药，其性微温，味甘，具有补气固表、升阳止汗、利水消肿、托毒排脓生机等作用［1-2］。酸枣仁味甘，性平，有宁心安神、敛汗、养肝功能。用于虚烦不眠，惊悸怔忪，头晕眼花等症。五味子提取物能促进肝糖元异生，又能促进肝糖元分解，并使脑、肝肌肉中果糖的葡萄糖磷酸化过程加强，其乙醇提取物能明显降低血清谷丙转氨酶，对四氯化碳引起的肝脏损伤具有保护作用。五味子提取物能增加中枢神经系统的兴奋性，有血管舒张作用，当循环衰竭时，又有显著升压作用。此外还具有一定强心作用［3］。

参芪五味子制剂［4］适用于健脾益气，宁心安神。用于气血不足，心脾两虚所致的失眠、多梦、健忘、乏力、心悸、气短、自汗。目前，国内外尚无参芪五味子浓缩丸制剂上市。本文对自制的参芪五味子浓缩丸进行了质量研究。

1 试药与仪器

1.1 药品

参芪五味子浓缩丸:自制，规格:每丸重0.3 g。

南五味子对照药材(批号:121118-200502)购自中国药品生物制品检定所。

五味子甲素(批号:0764-200107)购自中国药品生物制品检定所。

黄芪甲苷(批号:110781-200613)购自中国药品生物制品检定所。

1.2 仪器

电子天平BS124S (北京赛多利斯科学仪器有限公司);三用紫外分析仪(上海康禾光电仪器有限公司，型号:ZF-C 型);高效液相色谱仪(日立公司，型号:L-7000)。

2 方法与结果

2.1 参芪五味子浓缩丸的处方及制法

处方:南五味子180 g，党参60 g，黄芪120 g，酸枣仁(炒)30 g。

制法:以上四味，党参与南五味子60 g 粉碎成细粉;黄芪、酸枣仁和剩余的南五味子照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法［5］，分别用45% 乙醇、70%乙醇、60%乙醇作溶剂，浸渍24 h 后进行渗漉;收集渗漉液，回收乙醇后合并，浓缩至适量;加入上述细粉和适量的辅料，按照浓缩水蜜丸的制备工艺制成1 000 丸，即得。

2.2 参芪五味子浓缩丸的质量研究

2.2.1 性状

本品为深棕色的水蜜丸，味微甜，苦。

2.2.2 鉴别

(1)取本品适量(约0.6 g)，切碎，加硅藻土4 g，研匀，加三氯甲烷25 mL，加热回流30 min，滤过，滤液蒸干三氯甲烷，残留物加三氯甲烷至5 mL，摇匀，作为供试品溶液。另取南五味子对照药材1 g，加三氯甲烷25 mL，同法制成对照药材溶液。再取五味子甲素对照品，加三氯甲烷制成每1 mL 含0.2 mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010 年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚 (30 ℃～60℃)—甲酸乙酯—甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (254 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取本品适量(约0.6 g)，切碎，加硅藻土4 g，研匀，加甲醇25 mL，加热回流1 h，滤过，滤液蒸干甲醇，残留物加水10 mL，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2 次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2 次，每次20 mL，再用水洗涤2 次，每次20 mL，正丁醇蒸干，残渣加甲醇0.5 mL 使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 mL 含1 mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010 年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷—甲醇—水(13∶6∶1)10 ℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点;紫外光下显相同颜色的荧光斑点。

另取阴性样品适量，同法操作。结果阴性样品对各项鉴别均无影响。结果:三批样品的鉴别检查均符合规定。

2.2.3 检查

2.2.3.1 重量差异照丸剂重量差异检查法(中国药典2010 年版一部附录ⅠA)项下进行试验。

方法:取供试品10 份，分别称定重量，再与平均重量相比较，超出重量差异限度的不得多于2份，并不得有1 份超出限度一倍。本品重量差异限度为±9%。结果:三批样品的重量差异均在±9%之内，符合规定。

2.2.3.2 溶散时限方法:取本品，照丸剂溶散时限检查法(中国药典2010 版一部附录ⅠA)测定，应在2 h 内全部溶散。结果见表1。

2.2.4 含量测定

2.2.4.1 高效液相色谱测定方法本品中五味子的含量采用高效液相色谱法(中国药典2010 年版一部附录ⅥD)测定。含量测定方法如下:

以C18键合硅胶为固定相;以乙腈—水—醋酸(64∶35∶1)为流动相;检测波长为249 nm。理论板数按五味子甲素峰计算应不低于4 000。

对照品溶液的制备取五味子甲素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL 含60 μg 的溶液。

供试品溶液的制备取本品适量，精密称定，剪碎，混匀，精密称取3 g，加硅藻土2 g，研细(过3 号筛)，混匀，取约5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理 (功率250 W，频率50 KHz)20 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得。测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定。

表1 3 批样品溶散时限测定结果

2.2.4.2 线性关系试验精密称取五味子甲素对照品15.1 mg，置25 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1.0 mL，置10 mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取3、5、8、10、12、15、20 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，五味子甲素峰的保留时间为8.1 min。

回归方程:A=1 772 140.65M-18 631.65 r=0.999 9 (单位:μg)

五味子甲素在0.181 2～1.208 0 μg 范围内进样量和峰面积呈良好的线性关系。

2.2.4.3 精密度试验取含量测定项下的同一供试品溶液，精密量取10 μL，注入液相色谱仪，连续进样6 次，记录色谱图。考察本法的精密度。结果:本法精密度较好。结果见表2。

2.2.4.4 溶液稳定性试验取含量测定项下的同一供试品溶液，分别于0，2，4，6，8 和12 h 各精密量取10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，考察供试品溶液的稳定性。结果见表3。

2.2.4.5 重复性试验取本品，按含量测定项下的方法制备供试品溶液6 份，精密量取10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，计算含量。考察本法的重复性。结果见表4。

2.2.4.6 加样回收率试验取已知含量的本品(批次:第一批)，剪碎，混匀，精密称取3 g，加硅藻土2 g，研细(过3 号筛)，混匀，精密称取约2.5 g，置同25 mL 具塞锥形瓶中，加入一定量的五味子甲素，按含量测定方法测定，计算回收率。结果见表5。

2.2.4.7 三批样品的含量测定取本品，照上述含量测定方法依法测定，结果见表6。