疑似败血症病例内毒素测定的临床意义

孙安民，王 伟

（1.开封市中心医院 检验科，河南 开封475000；2.新乡市新医三附院 检验科，河南 新乡453000）

内毒素是革兰氏阴性菌菌体中存在的毒性物质的总称。是革兰氏阴性菌细胞壁成分，由菌体裂解后释出的毒素，又称之为“热原”。其化学成分是磷脂多糖－蛋白质复合物，其毒性部分主要为类脂质A[1]。内毒素位于细胞壁的最外层、覆盖于细胞壁的黏肽上。各种细菌内毒素的毒性作用较弱，作用机理大致相同，可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。革兰氏阴性菌菌血症占相当大的比例，越来越引起人们的重视，对菌血症实验室诊断的传统方法是细菌培养，这种方法准确率和特异性都很高，但较费时，容易延误病情。近年来发展起来的内毒素检测具有速度快，敏感度高，特异性强，是一种能够早期快速诊断革兰氏阴性菌败血症理想的实验室检测方法[2]。

1 资料与方法

1.1 一般资料 采集我院临床上疑似败血症患者200例。患者均有起病急骤、畏寒或寒战、烦躁不安、神志不清、呼吸急促、心率加快、血压下降等典型的败血症症状，其中男120例，女80例，平均年龄（42±15）岁。正常对照组200例，来自我院正常职工体检，男122例，女78例，平均年龄（40±16）岁。

1.2 标本采集 用专用无热原抗凝管采血2ml，摇匀，3 000r／min离心1分钟。如果不能马上测定，可以先吸出富含血小板的血浆至别一无热原小瓶中，放入－30℃的冰箱中保存，标本无溶血、黄疸和乳糜。同时采10ml血液加入血培养瓶，轻轻摇匀，放入血培养箱孵育。

1.3 方法 内毒素在 MB－80微生物检测仪上测定[3]，吸取0.1ml富含血小板血浆至0.9ml标本处理液中，摇匀，放入70℃干热器中温育10分钟，再转入冰浴槽冷却5分钟。取冷却后的处理液0.2 ml加入反应主剂中，轻摇后吸取0.2ml加入平底透明玻璃管中，放入MB－80微生物检测仪上进行检测，正常参考值＜10pg／ml。血培养孵箱温度为37℃，血培养瓶有细菌生长时自动报警，阳性瓶涂片革兰氏染色，油镜下查找细菌，记录镜检结果。无细菌生长者继续培养，第5天发阴性报告。

1.4 统计学处理 采取SPSS15统计学软件处理，配对计数资料比较采用χ2检验，非配对计量资料采用均数±标准差（±s），组间均数比较采用非配对t检验，P＜0.05，差别具有统计学意义。

2 结果

2.1 内毒素测定和血培养结果，见表1。

表1 内毒素测定和血培养结果

2.2 血培养阳性者经血涂片染色镜检分为G–菌组和非G–菌组，内毒素及血培养结果见表2。

表2 血培养阳性者内毒素测定结果

2.3 从表1和表2可知，疑似败血症组内毒素测定值、细菌培养阳性数与正常对照组比较有明显差异（P＜0.01），具有统计学意义。在疑似败血症组中，细菌培养阳性者共185例，分成G－菌组与非G－菌组，二者内毒素测定值存在明显差异（P＜0.01），具有统计学意义，其G－菌占111例。

3 讨论

3.1 败血症是指致病菌或条件致病菌侵入血循环，并在血中生长繁殖，产生毒素而发生的急性全身性感染。临床上主要表现为寒战、高热，心动过速，呼吸急促，皮疹，关节肿痛和肝脾肿大等，严重者可出现急性器官功能障碍，称之为重型败血症[4]。引起败血症的细菌多为革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌，还有部分厌氧菌。本实验中革兰氏阴性杆菌占60%，是引起败血症的主要细菌[5]。

3.2 内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，称为脂多糖。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来，所以叫做内毒素，其毒性成分主要为类脂质A。正常健康人体内毒素含量甚微，定性测定为阴性，定量测定＜10pg／ml，一旦有细菌进入血液，引起菌血症或败血症，就有可能引起内毒素血症，本实验疑似败血症组内毒素为（183.25±41.05）pg／ml，明显高于正常对照组。

3.3 内毒素血症分为内源性和外源性两大类[6]。内毒素血症临床症状主要决定于宿主对内毒素的抵抗力。全身网状内皮系统功能障碍，免疫机能下降，肠道吸收的内毒素过多而超过机体清除能力，引起内源性内毒素血症；人体免疫力正常，局部组织或器官由于创伤感染导致内毒素入血，引起外源性内毒素血症。内源性内毒素血症较多见，本实验所研究的败血症病例全部为内源性内毒素血症。

3.4 引起败血症的细菌主要有以下几类[7]，革兰氏阴性菌，革兰氏阳性菌，厌氧菌和真菌，只有革兰氏阴性菌和部分非芽胞厌氧菌产生内毒素，所以对内毒素的测定主要针对革兰氏阴性菌和部分厌氧菌[8]。

3.5 对内毒素的检测主要包括两大类：一是凝胶法，二是光度测定法，以凝胶法为准[9]。本实验内毒素测定采用凝胶测定法，原理是鲎实验[10]：鲎血液中的细胞溶解物可以与内毒素形成凝胶反应，反应速度和凝胶的坚固程度与内毒素的浓度有关。

3.6 本实验中非G－菌组内毒素为（24.30±9.32）pg／ml，明显高于正常对照组，是由于革兰氏阳性菌致病因子的协同效应引起[11]。以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌细胞壁成分十分复杂，其中PepG和LTA具有很强的“内毒素样”生物活性，所以革兰氏阳性菌不产生内毒素，但也会使血中内毒素测定结果轻度增高并引起相应症状。

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