三种方法检测潜伏妊娠梅毒的临床评价

朱巧英，李 宁，罗红权，倪雪梅

（四川省妇幼保健院，四川 成都610045）

近年来随着梅毒的发病率上升，妊娠梅毒和胎传梅毒的发病率不断增加。胎传梅毒可造成流产、死胎、早产、死产、畸形或分娩先天梅毒儿[1]，在流产、死产、死胎中梅毒高达41.67[2]。有效预防和控制胎传梅毒的关键是孕妇的产前保健，对妊娠梅毒早期诊断进而进行正规治疗[3－5]。但研究发现妊娠可改变梅毒的自然病程和临床表现，使多数妊娠梅毒表现为潜伏状态[6－8]，不易早期发现，对预防胎传梅毒增加了难度。目前，临床上对潜伏梅毒的诊断主要靠实验室检查，包括非梅毒螺旋体抗体检测如甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等，梅毒螺旋体抗体检测如酶联免疫吸附试验（ELISA）、金免疫层析试验（GICA）和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）等，梅毒螺旋体核酸检测如聚合酶链反应（PCR）等[9，10]。TPPA 的灵敏度和特异性都高，常作为梅毒螺旋体抗体的确认试验，但费用较高，梅毒螺体抗体阳性可能为既往感染或潜伏梅毒；PCR试验敏感性高，核酸阳性是梅毒螺旋体存在的直接证据，但费用高，技术及条件要求高，不适基层开展，并因污染或抑制剂和（或）核酸损失而出现假阳性或假阴性[9，10]。本实验对临床上广泛应用的常规梅毒血清学试验－TRUST、ELISA和GICA的临床价值进行了评价。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 对象 2010年8月－2013年1月2年间来本院做围产保健的孕妇1236例，年龄20－38岁，均无梅毒症状和体征。真空采血管抽取晨空腹肘静脉采5ml，3000转／分离心10分钟，分离出血清备用。

1.2 仪器试剂 TP－ELISA试剂盒由英科新创（厦门）科技有限公司生产，GICA试剂由艾康（杭州）生物有限公司生产，TRUST试剂盒由上海荣盛有限公司生产，TPPA试剂盒由日本富士瑞必欧株式会社生产，室内质控血清由科华公司提供，梅毒螺旋体核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒由达安基因（深圳）公司生产。

1.3 仪器 酶标仪和洗板机为北京普朗公司生产。核酸扩增荧光检测仪为罗氏lightcycler2.0。

1.4 实验方法 ELISA和GICA为双抗原夹心法，TPPA和TRUST为间接凝集试验，PCR为核酸扩增实时荧光检测法，各实验均严格试剂说明书进行，并随标本一起做室内质控试验。

1.5 检测程序 所有孕妇血清标本都采用盲法同时做TRUST、ELISA、GICA和TPPA试验。TPPA试验阳性血清再做PCR试验。

1.6 诊断标准 参照文献[9]，本实验以TPPA试验和PCR试验都阳性判断为潜伏妊娠梅毒。

2 结果

2.1 潜伏妊娠梅毒检出率 1236例围产保健孕妇中共检出潜伏梅毒12例，检出率为0.97%。

2.2 符合率评价 TRUST试验与ELISA试验和GICA试验结果的总符合率分别为89.8%和86.9%。GICA试验与ELISA试验结果的总符合率为92.3%。

2.3 临床价值评价 以TPPA试验和PCR试验都阳性为潜伏妊娠梅毒诊断标准，TRUST试验、ELISA试验和GICA试验的临床效能评价结果见表1。

表1 TRUST试验、ELISA试验和GICA试验诊断潜伏妊娠梅毒的临床效能评价结果

3 讨论

近年来我国妊娠梅毒检出率逐年上升，妊娠期梅毒筛查及干预已成为控制胎传梅毒的重要措施[11]。本实验结果显示，潜伏妊娠梅毒检出率为0.97%，低于天津市的2.25%[11]、哈尔滨市的1.32%[1]和长沙市的1.24%[12]，这主要是地域和被检人群差异所致。在妊娠期，孕妇体内滋养层细胞产生的各种激素、Th1／Th2平衡的改变、炎症因子水平的变化以及促进胎盘和胎儿生长的因子等因素影响梅毒的自然病程和临床表现，使母体表现为无症状感染[13]。我国妊娠梅毒发生率已达1%－2%，且多数为潜伏梅毒，临床应加强产前梅毒筛查，尽早发现和治疗孕妇梅毒，最大限度地阻断梅毒的母婴垂直传播。

梅毒血清学筛查是发现潜伏妊娠梅毒的有效方式[11]。TRUST、ELISA和 GICA具有简单、快速、经济等优点，为临床常规梅毒血清学筛查试验。本实验结果显示，ELISA试验对潜伏妊娠梅毒的诊断灵敏度最高（91.7%），TRUST 试验最低（75.0%），这应与实验本身的敏感性、检测针对不同抗原的抗体以及被测抗体的产生规律有关；TRUST、ELISA和GICA试验对潜伏妊娠梅毒的诊断特异度都大于95%，TRUST 的假阳性率（2.5%）高于 ELISA（1.8%）和 GICA（1.1%）。TRUST试验假阳性主要是其检测非梅毒螺体抗体－抗心磷脂抗体，由螺旋体或宿主组织细胞受损而释放的脂类物质诱导机体产生，在自身免疫病等多种其它疾病时也可检出[9]。ELISA和GICA试验假阳性是由于既往感染产生的抗体持续存在，或对人不致病的密螺旋体感染诱导机体产生与梅毒螺体交叉反应的抗体，在低危人群中假阳性率约 1%[9，10，14]。TRUST、ELISA和GICA试验的阴性预测值都高（＞99%），阳性似然比最大、阴性似然比最小的是ELISA试验。综上，临床筛查潜伏妊娠梅毒最好选择双抗原夹心ELISA试验，同时联合TRUST、金免疫层析试验（GICA）检测梅毒可以提高阳性检测率，为临床预防和阻断梅毒母婴垂直传播提供更可靠的理论依据。

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