1例阿米巴滋养体诊断的思考

董宁艳，李岩，王会平，王琳，张惠中（第四军医大学唐都医院检验科，西安 710038）

本文通过对1例感染阿米巴痢疾患者粪便的检验，提出严格遵循实验分析前质量管理标准的重要性，以及区分阿米巴与吞噬细胞方法，采用碘液涂片法检验，查见阿米巴包囊，为临床医治节省了时间，为治愈患者获得了先机。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料2013年10月5日，临床送检患者粪便标本，标本外观为暗红色果酱样粪便，镜下查见红细胞＋＋＋／HP，白细胞＋＋／HP，脓球偶见，查见“吞噬细胞”，镜下查见疑似阿米巴滋养体；与临床主治医生沟通，该患者以“间断腹泻两周，加重伴上腹部痛1周”入院，诊治查体：体温36.4℃，呼吸频率每分钟18次，脉搏每分钟78次；血压120／80mm Hg，心肺、腹部超声、胸片、腹部立位平片都未见异常；心电图大致正常；给予左氧氟沙星和头孢甲肟联合抗感染，口服胃黏膜保护剂及调理菌群等对症治疗，精神较前好转，仍腹泻，共10～20次，为暗红色果酱样；结合患者粪便性状与诊治查体结果和用药无好转，考虑阿米巴感染。

在临床检验中，粪便在排出20min内阿米巴活动明显，但此患者标本送检时间已超过1h，不符合阿米巴的送检要求，可能导致未查见阿米巴滋养体。检验者叮嘱临床工作人员要求送检标本要新鲜、保温、不能混入尿液、消毒液，按照临床检验要求采集标本，取材后立即送检。临床按照检验标准重新采集粪便标本，10min后送检，经生理盐水涂片法和碘液涂片法查见阿米巴滋养体，粪便培养阴性。确诊为阿米巴痢疾后，临床改用静脉滴注奥硝唑，口服胃黏膜保护剂及调理菌群等对症治疗。粪便次数减少，精神好转，病情平稳后出院。

1.2 试剂与仪器试剂为0.9%生理盐水，碘液；仪器为Olympus光学显微镜、载玻片、盖玻片。

1.3 方法

1.3.1 活滋养体检查法取用干净的容器，粪便在排出20 min内保温送检，不能混入尿液或消毒液，于洁净玻片上加生理盐水1～2滴，挑取带脓血和黏液部分检查，该标本显示高倍镜下较白细胞稍大，有折光性，运动活泼，形态多变，直径约20～60μm，多数为20～30μm，内外质界限清楚，外质透明，伸出舌状或宽指状伪足作定向运动，为阿米巴滋养体。见图1。该标本镜下显示内质颗粒状，内含细胞核，食物泡及吞噬的红细胞。同时镜下可见大量聚集成团的红细胞，少量白细胞及梭形的夏科－雷登晶体［1］。

1.3.2 包囊检查法临床上常用碘液涂片法，取一洁净的载玻片，滴加碘液1滴，再以竹签蘸取少量粪样，在碘液中涂成薄片加盖玻片，然后置于显微镜下检查，包囊呈淡黄色或棕黄色，囊壁不着色，透明，核1～4个，见图2。单核和双核包囊是未成熟的包囊，囊内可见棕红色的糖原泡和反光性强、透明的棒状拟染色体。

2 结果

粪便标本在室温放置1h后检验，于洁净玻片上加生理盐水1～2滴，挑取带脓血和黏液部分检查，观察高倍镜下较白细胞稍大有折光性，内有颗粒及吞噬的红细胞，有伪足样突起，而不做运动，结果见图3阿米巴滋养体（不活动），这与图4吞噬细胞很难区分的。

图1 阿米巴滋养体

图2 碘染阿米巴包囊

图3 （不活动的）阿米巴滋养体

图4 吞噬细胞

3 讨论

本例病案提示，分析前质量控制对检验结果有非常重要的影响，不容忽视。对住院的腹泻成人患者，应采集住院3d内粪便标本送检，标本采集后应尽快送检，有条件的提倡使用运送培养基［2］。本病例之所以漏检主要是未严格按照SOP文件的标准来采集和运送标本，致使对不合格标本进行检测，结果检出“吞噬细胞”，而未检出阿米巴滋养体；严格按照SOP 文件标准采集后重新检测，经生理盐水涂片法镜下的“吞噬细胞”细胞并非真正的吞噬细胞，该细胞伸出舌状伪足作定向运动，是阿米巴滋养体；采用碘液涂片法检验，结果显示查见阿米巴包囊，确诊阿米巴感染。吞噬细胞和阿米巴滋养体两种细胞胞质内都有颗粒及吞噬的红细胞、有伪足样突起，但阿米巴滋养体伸出舌状或宽指状伪足作定向运动［3］，而吞噬细胞不做运动。

在检测标本时，有部分检验者怕臭，怕污染到手，都不愿去碰，没有仔细观察而忽视了外观的重要性，而阿米巴恰恰在外观上是很典型的暗红色果酱样，同时，粪便生理盐水涂片检查可见大量聚团状红细胞、少量白细胞和夏科－雷登结晶，检到伸展伪足活动、吞噬红细胞的阿米巴滋养体具有确诊意义［4］。因此，在检验过程中检验者必须具备敏锐、精细的观察力，防止因为误检漏检造成假阴性；并结合临床的治疗情况，随时审视实验结果，与临床达到和谐的协作和协调，提高工作和技术水平，增强为临床服务的意识，才能更好地服务于临床，服务于患者。

［1］沈继龙.临床寄生虫学与检验［M］.北京：人民卫生出版社，2007：60.

［2］倪语星，尚红.临床微生物与检验［M］.北京：人民卫生出版社，2007：565.

［3］汪学龙.临床寄生虫学与检验实验指导和习题集［M］.北京：人民卫生出版社，2007：18.

［4］杨绍基，任红.传染病学［M］.北京：人民卫生出版社，2008：262.