益肾更宁合剂对围绝经期大鼠血清E2、LH 及FSH水平的影响*

王新斌，马睿玲

(甘肃中医学院，甘肃 兰州730000)

围绝经期综合征指妇女绝经前后由于性腺生殖轴功能衰退所致的一系列以自主神经系统功能紊乱为主，伴有神经心理症状的一组症候群。在中医古籍中，无本病的单独记载，有医家结合临床实践，称之为“绝经前后诸证”。中医临证分为肾阴虚和肾阴阳两虚，其病机除肾虚为主外，可兼心阴不足、肝阴亏虚、肝气郁结等，见症复杂，其中多脏同病为本病证主要特点。笔者以祖国医学理论为依托，汲先贤近人之精华，衷中参西，拟定以补肾清心平肝为治法的方药益肾更宁合剂治疗围绝经期综合征，临床疗效较好。为了进一步探讨益肾更宁合剂的作用机制，笔者观察了其对围绝经期大鼠血清雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)及卵泡刺激素(FSH)水平的影响。

1 材料与方法

1．1 动 物

15～18 月龄SD 雌性大鼠60 只，体质量(250±20)g;4～6 月龄SD 雌性大鼠10 只，体质量(200 ±20)g。均为SPF 级，购自甘肃中医学院中心实验室，合格证号SCXK(甘)2004－0006。分笼饲养，空气清新，通风良好，自由摄食、饮水，饲养温度(20 ±2)℃，每日光照12 h，饲料、水、垫料由专人每日及时加换。

1．2 药品、试剂与仪器

益肾更宁合剂药物组成:酒熟地黄12 g，山茱萸10 g，炙淫羊藿18 g，珍珠母30 g，生白芍12 g，麦冬10 g，川黄连6 g，软紫草(后下)12 g 等。药剂由甘肃中医学院制剂室提供，水煎并按4∶1 比例浓缩，2 ℃冰箱中储存备用。尼尔雌醇片，北京四环制药有限公司产品，生产批号2071101。血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)放射免疫分析盒，购自北京科美东雅生物技术有限公司，批号依次为20070605，20060601，20060412。80－1 型电动离心机，金坛市恒丰仪器厂产品;GC－911型γ－放射免疫计数器，中国科技大学实业总公司产品。

1．3 模型的建立、动物分组与给药

选取60 只15～18 月龄大鼠，进行阴道脱落细胞涂片及光学显微镜观察，连续10 d。选取32 只符合围绝经期大鼠模型标准者［1］，采用随机数字法分为模型对照组、尼尔雌醇组和益肾更宁合剂高、低剂量组4 组，每组8 只。另选青年(4～6 月龄)大鼠8 只作为青年对照组。参照文献［2］方法，按人与动物表面积等效量1∶0．018 给药。模型对照组、青年对照组以蒸馏水10 μL/g 灌胃，1 d 1 次;尼尔雌醇组用蒸馏水配成混悬液0．24 μg/g 灌胃，每2 周1 次;益肾更宁合剂高、低组依次设定生药量26．56，6．64 g/kg 灌胃，1 d 1 次。各组均以10 μL/g 体质量灌胃，连续4 周。

1．4 检测指标

末次给药后，禁食、禁水24 h，称体质量，于腹主动脉采集血标本，置普通生化管，离心(3 000 r/min)分离血清，－20 ℃保存备用。采用放免法测定E2、LH、FSH 含量，操作严格按试剂盒说明书进行。

1．5 统计学方法

采用SPSS 13．0 统计分析软件处理。数据以均数()±标准差(s)表示，组间比较采用单因素方差分析(One－Way ANOVA)。以P＜0．05 为差别有统计学意义。

2 结 果

与青年对照组对比，模型对照组大鼠血清E2降低，LH、FSH 升高，差别有统计学意义(P＜0．01)。与模型对照组对比，益肾更宁合剂高剂量组和尼尔雌醇组E2升高，FSH、LH 降低，差别有统计学意义(P＜0．01 或P＜0．05)。结果表明:益肾更宁合剂可提高围绝经期大鼠血清E2含量，降低LH、FSH 水平，并存在一定量效关系。见表1。

表1 各组大鼠血清E2、LH 及FSH 水平对比 ±s

表1 各组大鼠血清E2、LH 及FSH 水平对比 ±s

注:与青年对照组对比，* P ＜0．05，＊＊P ＜0．01;与模型对照组对比，# P ＜0．05，## P ＜0．01。

组 别 动物数 E2/(ng·L －1) FSH/(IU·L －1) LH/(IU·L －1)模型对照组 8 7．547 1 ±0．806 7＊＊ 5．688 0 ±0．364 9＊＊ 6．830 0 ±0．829 8＊＊青年对照组 8 14．340 0 ±0．627 5 2．334 7 ±0．405 7 4．351 3 ±0．861 8尼尔雌醇组 8 11．137 1 ±0．932 6## 3．940 3 ±0．127 6## 4．388 7 ±0．552 1##益肾更宁合剂高剂量组 8 9．213 1 ±0．782 1## 4．900 1 ±0．141 4## 5．493 7 ±0．830 2#益肾更宁合剂低剂量组 8 8．953 3 ±0．821 7##5．084 2 ±0．754 5 6．067 5 ±0．779 8

3 讨 论

围绝经期是妇女从性成熟期向老年期过渡的特殊时期，是必经的生理过程。妇女在绝经前后，卵巢功能开始衰退、出现内分泌系统失衡状况，导致下丘脑—垂体—卵巢—子宫性腺轴(HPOA)的改变，使LH、FSH 水平升高，平衡反馈失调，从而影响植物神经中枢及其支配下的各脏器功能，引起一系列躯体和精神症状。中医症状表现为潮热面赤，进而出现汗出、精神倦怠、烦躁易怒、头晕目眩、耳鸣心悸、失眠健忘、腰膝酸软、手足心热，或伴有月经紊乱症状。早在《素问·上古天真论》就认识到“女子七七，任脉虚，太冲脉衰少，天癸竭，地道不通，故形坏而无子。”《灵枢·海论》曰:“髓海有余，则轻劲多力，自过其度;髓海不足，则脑转耳鸣，胫酸眩冒，目无所见，懈怠安卧。”这些都明确指出了肾与月经、生殖、衰老的密切关系。妇女七七之年左右(五十岁左右)，肾气渐衰，体内天癸这种随肾气充盛而泌至物质趋于衰竭，月经也渐次断绝，且生育能力缺失。肾气虚衰为本病的发病根本。有学者［3］认为:围绝经期雌激素水平下降，出现潮热、汗出等“阴虚”症状，雌激素的这些作用类似“阴”的作用，而妇女的血虚症状与雌激素成负相关系，血属阴，与本病肾阴虚为主要病因病机相符合。

妇女以血为基本，以血为用，血属阴。天癸是一种重要的阴精，对人体的生长、发育与生殖起促进作用。任脉为阴脉之海。冲脉为血海，阴精衰少，从而导致月经断绝。方中酒熟地黄、山茱萸、生白芍、麦冬等药物着重滋补肾阴，补其不足以治本;煅珍珠母、川黄连、软紫草兼以清心平肝，泻其有余以治其标。根据中医学“阳生阴长”之理论，在大量的滋阴药中少佐助阳之品淫羊藿，是取《景岳全书》“善补阴者，必于阳中求阴，阴得阳升泉源不竭”之意。淫羊藿配伍甘咸寒之珍珠母可镇摄浮阳，此因围绝经期妇女出现烘热汗出、潮热面红、情志异常等植物神经功能紊乱的症状是阴阳平衡失约、阴不敛阳以致的虚阳上浮的表现，而珍珠母也可抑制淫羊藿温热升浮之气。此外，淫羊藿补肾温阳，主要成分为黄酮类化合物，现代研究表明，淫羊藿黄酮可增强HPOA促性腺功能，且具有雌激素样活性［4］。围绝经期妇女体内的性激素水平下降，使用补肾药物起到调整生殖内分泌的作用，复方在临床治疗围绝经期综合征已取得良好的疗效。

本实验结果显示:益肾更宁合剂高剂量组能够升高模型大鼠血清E2(P＜0．01)，降低LH、FSH 含量(P＜0．01 或P＜0．05)，且存在着一定的量效关系。此为益肾更宁合剂治疗围绝经期综合征提供了实验依据，即通过其微弱的雌激素样作用，提高更年期模型大鼠体内E2水平，改善垂体－性腺轴功能，使内环境趋于稳定。这可能是该方用于治疗围绝经期综合征的作用机制之一。

［1］程化奇，熊舜华，殷新尤，等．大鼠更年期实验模型研究［J］．实验动物与比较医学，1993，13(4):1921．

［2］黄继汗，黄晓晖，陈志扬，等．药理实验动物间和动物与人体间的等效剂量换算［J］．中国临床药理学与治疗，2004，9(9):1069－1071．

［3］杨敏，李灿东，李红，等．围绝经期综合征中医证素与性激素水平的相关研究［J］．中华中医药杂志，2012，27(2):368．

［4］张磊，王岚，吴霞，等．淫羊藿总黄酮对不同性别大鼠性器官及相关激素的影响［J］．中药药理与临床，2009，25(1):33．