埃索美拉唑镁肠溶微丸的制备

张文静 ，李明丽 ，樊永庆 ，薛晓霞 ，阚淑玲 ，刘建平 *

1中国药科大学药剂学教研室，南京 210009；2辰欣药业股份有限公司，山东济宁 272000；3西藏海思科医药集团股份有限公司，四川成都 610000

埃索美拉唑镁 [Esomeprazole Magnesium，（ESM）2-Mg]是奥美拉唑的 S-构型旋光异构体[1]，是通过特异性抑制胃壁细胞质子泵减少胃酸分泌的质子泵抑制剂（proton pump inhibitor，PPI）。 研究表明，（ESM）2-Mg对胃食管反流性疾病[2]、消化性溃疡[3-4]和十二指肠溃疡都有较好地疗效，其作为新一代PPI，具有抑酸效果持久、不良反应小的特点，是治疗消化性溃疡较理想的药物。（ESM）2-Mg是埃索美拉唑的镁盐，性质更稳定，便于贮存和加工。埃索美拉唑镁在酸性条件下不稳定。本实验采用流化床上药包衣的方法制备 （ESM）2-Mg肠溶微丸，并用Box-Behnken效应面法对其处方进行优化，处方工艺简单可行，有望用于工业化生产。

1 材 料

1.1 仪器

JHQ-100型流化沸腾颗粒包衣机（沈阳辽宁医联新药研究所）；ZRS-8G智能溶出试验仪 （天津天大天发科技有限公司）；UV-2102 PC分光光度计（上海尤尼柯仪器有限公司）；Aglient1260高效液相色谱仪 （Aglient公司）；Kromasil 100-5 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，Sweden）；电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；S-3000N扫描电子显微镜 （日本，Hitachi）。

1.2 药品和试剂

埃索美拉唑镁三水合物（山东诚创医药技术开发有限公司，以无水物计含C34H36MgN6O6S2100.20%，含水量 7.19%）；蔗糖丸心（德国 JRS）；丙烯酸树脂 （Eudragit L30D-55，上海德固赛辅料公司）；市售制剂（阿斯利康）；欧巴代03K19229（卡乐康）；羟丙纤维素LF（卡乐康）；柠檬酸三乙酯（阿拉丁）；其他试剂均为分析纯。

2 方 法

2.1 载药丸心的制备

以3.5%的羟丙纤维素LF（Hydroxypropyl cellulose，HPCLF）水溶液为黏合剂，将（ESM）2-Mg 分散于其中制成混悬液。将空白丸心置于料筒中，采用底喷法，制备载药丸心。控制床温30℃～31℃，雾化压力0.1 MPa～0.12 MPa，鼓风机频率22.5 Hz～24.5 Hz，喷液流速 3 mL·min-1～4 mL·min-1，药层增重 90%。上药结束后，流化干燥30 min。

2.2 载药微丸的包衣

实验使用的肠衣材料Eudragit L30D-55为酸性高分子材料，其pH值大约为4[5]。（ESM）2-Mg在酸性条件下不稳定，故微丸在包肠溶层之前需要先包隔离层[6]以避免药物与肠衣材料直接接触。欧巴代03K19229为专用的中性隔离材料，采用流化床工艺进行包衣。

2.2.1 隔离层包衣称取适量欧巴代03K19229，以水为溶剂配制含量为8%的溶液，将所配包衣液在持续搅拌状态下用喷枪喷洒至含药微丸上。控制床温 36℃～38℃，雾化压力 0.1 MPa～0.12 MPa，鼓风机频率 22.5 Hz～24.5 Hz，喷液流速 3～4 mL·min-1，包衣结束后流化干燥30 min。

2.2.2 肠衣层包衣取水10 g，加热至70℃。加入柠檬酸三乙酯0.9 g、吐温-80 0.6 g，加入0.4 g单硬脂酸甘油酯搅拌至单硬脂酸甘油酯溶解完全，加入7 g水。用普通搅拌机持续搅拌至30℃以下，最后将此混悬液缓慢倒入30 g EudragitL30D-55水分散体中，同时低速搅拌。包衣控制床温31℃～32℃，雾化压力 0.1 MPa～0.12 MPa，鼓风机频率 22.5 Hz～24.5 Hz，喷液流速2～3 mL·min-1，包衣结束后流化干燥30 min。

2.3 耐酸力的测定

按照《中国药典》2010版附录XC第一法，以氯化钠的盐酸溶液500 mL为溶出介质，转篮速度为100 r·min-1，120 min 后，取下转篮，用水冲洗转篮内颗粒，照“含量测定”项下方法制备样品溶液。另取奥美拉唑对照品适量，同法配制成对照品溶液，按高效液相色谱外标法测定并计算剩余药物含量。

2.4 释放度的测定

按照 《中国药典》2010版附录XD第二法，以0.1 mol·L-1盐酸溶液500 mL为释放介质，转速为100 r·min-1，2 h后，在盐酸溶液中加入预热至37℃的0.235 mol·L-1磷酸氢二钠溶液400 mL，转速不变，继续释放。在45 min时取样滤过，依法测定，按外标法以峰面积计算释放量。

2.5 Box-Behnken效应面法优化埃索美拉唑镁肠溶微丸处方

2.5.1 影响因素和考察指标的确定通过预实验发现（ESM）2-Mg肠溶微丸的含药溶液浓度、隔离层增重、肠衣层增重对微丸耐酸力和释放度影响较大。根据初步考察结果，采用含药层药物浓度（X1）、隔离层增重（X2）及肠衣层增重（X3）作为考察因素。根据Box-Behnken实验设计的原理，每个因素设置低、中、高 3 水平，编码分别为-1、0、1。以微丸耐酸力（Y1）、释放度（Y2）作为考察指标，其限度分别为 Y1＞90%、Y2＞80%。测定市售制剂耐酸力和释放度作为自制制剂的最终目标。以含药溶液浓度、隔离层增重、肠衣层增重为可变因素，以耐酸力、释放度为考察指标进行三因素三水平的优化。因素水平见表1。

2.5.2 处方验证选择最优处方制备制剂，进行耐酸力、释放度研究。

2.5.3 溶出曲线比较按“2.5.1”优化得到的处方制备肠溶微丸3批。采用溶出度测定法（2010版《中国药典》附录XC第一法）装置，以pH 6.8的磷酸盐缓冲液为溶出介质，转篮速度为100 r·min-1，分别于5、10、15、45、60 min 取样，滤过，测定溶出量，计算累积溶出百分数，并绘制溶出曲线。

表1 Box-Behnken设计的因素和水平

2.5.4 电镜表征对自制制剂的表面、横切面进行电镜扫描，观察成膜情况及各层包衣的均匀性。

3 结果与讨论

3.1 模型拟合

本实验中不同处方的耐酸力和释放度结果见表2。

表2 Box-Behnken设计及响应值

从表2结果可以看出，当X3水平为1时，耐酸力最好；释放度最大的实验组为第5组，其释放度大于市售制剂（93.19%）。

所得到的耐酸力和释放度的拟合方程分别为：

效应面响应图见图1。

以市售制剂耐酸力和释放度作为自制制剂的最终目标，得到的最优处方：含药层药物浓度19.16%，隔离层增重17.15%，肠衣层增重66.15%。由方程计算的耐酸力和释放度分别为98.12%和95.97%。

图1 各因素与响应值的效应面图

从耐酸力和释放度的拟合方程和效应面响应图可以看出，肠衣厚度对微丸耐酸力的影响最大。随着肠衣膜厚度的增加，微丸的耐酸力亦增加。这可能是由于肠衣材料Eudragit L30D-55在酸中不能溶解所致[7]。

从药物释放的影响结果可以看出，药物浓度对微丸的释放度影响最大。这是由于药物浓度越大，粘合剂用量相对越小，药物从含药层溶出越快。肠衣材料尤特奇L30D-55在pH值5.5以上的介质中溶解，因此肠衣层对微丸的释放影响不大。隔离层对微丸的释放度影响最小，这可能是由于隔离层是水溶性高分子材料，在释放介质中能迅速溶解，故对微丸释放度影响较小。

3.2 处方验证

对最优处方进行耐酸力、释放度考察，结果见表3。

表3 预测值与实测值的偏差（n=3）

筛选的最终处方的耐酸力和释放度与预测结果较为接近，说明耐酸力和释放度方程拟合效果较好。

3.3 溶出曲线比较

分别测定3批自制制剂在pH 6.8磷酸盐缓冲液中的溶出度，结果见图2。

由图2可以看出，3批制剂在PBS的pH 6.8的溶出介质中溶出行为十分接近，说明本实验的处方工艺可行，重复性较好。

3.4 电镜表征

图2 （ESM）2-Mg肠溶微丸溶出曲线图

由图3-A中可以看出，微丸圆整度好，大小均匀，表面光滑，无空隙，表明衣膜形成良好；图3-B为微丸横切图，可以明显看出含药层、隔离层、肠衣层厚度均一，各层衣膜质量良好。

图3 （ESM）2-Mg肠溶微丸表面（A）和横切面（B）扫描电镜图

4 结 论

制备与市售制剂性质接近的埃索美拉唑镁肠溶微丸，须综合考虑各因素的影响，肠溶微丸的耐酸力和释放度是评价微丸性质的重要指标。本实验测定市售制剂的耐酸力和释放度，并以此为目标，采用Box-Behnken效应面法优化埃索美拉唑镁肠溶微丸的处方，得到最优处方并进行验证。结果表明，肠衣层厚度对肠溶微丸耐酸力影响最大，含药层药物浓度对微丸释放度影响最大。按优化得到的处方制得的肠溶微丸其耐酸力和释放度与预测值接近，表明Box-Behnken效应面优化可有效应用于埃索美拉唑镁肠溶微丸的制备。

[1]Hassan-Alin M,Niazi M,Rohss K,et al.Esomeprazole,the S-Isomer of omeprazole,is optically stable in humans[J].J Gastroenterology,2000,118(4):A1244-5.

[2]Szucs T,Thalmann C,Michetti P,et al.Cost analysis of long-term treatment of patients with symptomatic gastroesophageal reflux disease(GERD)with esomeprazole on-demand treatment or esomeprazole continuous treatment:an open,randomized,multicenter study in switzerland[J].J Value in Health,2009,12(2):273-81.

[3]Barkun AN,Sung JJ,Kuipers EJ,et al.225 Intravenous esomeprazole for prevention of peptic ulcer rebleeding in a predominantly caucasian population:results on clinical benefits and hospital resource use[J].J Gastroenterology,2009,136(5):A-43-A-49.

[4]Jiawu Song,Bo Guo,Lan Yao,et al.S1046 The clinical study of ilaprazole on duodenal ulcer,a randomize study compared with esomeprazole[J].J Gastroenterology,2010,138(5):S-166-7.

[5]胡海洋，宋华先，陈大为，等.奥美拉唑肠溶微丸的制备及其处方优化[J]. 中国药学杂志，2003，38（10）：780-1.

[6]周 欣，张 晶，王 娟.奥美拉唑肠溶微丸胶囊的制备[J]. 解放军药学学报，2010，28（1）：32-5.

[7]白 靖，李 骞，王 静，等.药用丙烯酸树脂在制剂中的应用进展[J]. 中国药房，2011，22（17）：1613-6.