星形胶质瘤患者癌组织中S100、Survivin和Ki-67表达及其临床意义

刘玲丽 (海南省人民医院检验科，海南 海口 570311)

星形胶质瘤依据细胞分化和异型性的不同可分为Ⅰ～Ⅳ级，随级别升高，胶质瘤呈逐渐恶性进展的趋势〔1〕。正确判断其病理分级，是合理治疗的前提。某些蛋白的表达情况可反映肿瘤的良恶程度及预后。S100蛋白是一种主要表达于中枢神经系统星形胶质细胞及肿瘤细胞的酸性钙结合蛋白〔2〕。Survivin属于凋亡抑制蛋白，具有抑制细胞凋亡和促进细胞分裂的功能〔3〕。Ki-67是与细胞增殖关系密切的核蛋白，可准确反映肿瘤细胞增殖活性状态，预测患者的预后〔4〕。本文探讨S100、Survivin和 Ki-67在星形胶质瘤肿瘤细胞中的表达情况及在判断星形胶质瘤临床病理级别中的作用。

1 资料与方法

1.1一般资料 我院收治的星形胶质瘤患者68例，其中男37例，女31例，年龄60～66〔平均(64.1±1.2)〕岁。均接受手术治疗，手术后标本病理检查结果依据世界卫生组织肿瘤临床病例分级标准，低级别星形胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)30例，高级别(Ⅲ～Ⅳ级)38例。另选取20例正常脑组织标本作为对照组，男11例，女9例，年龄60～65〔平均(62.1±1.1)〕岁。两组性别、年龄等差异无统计学意义(P＞0.05)。

1.2检测方法 手术标本经10%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋切片，进行HE染色和SP法免疫组化染色，免疫组化操作步骤参考说明书执行，经脱蜡后，抗原修复，加一抗孵育过夜后冲洗，滴加二抗，DAB显色，苏木素复染，脱水透明，封片。每批染色均设立阳性和阴性对照。鼠抗人S100单克隆抗体，型号:ES-SM-003，规格:0.2 ml浓缩液，购自上海亿欣生物科技有限公司。兔抗人Survivin多克隆抗体，型号SC-10811，工作浓度为1∶175，购自 Santa Cruz Biochemology，Inc。鼠 Ki-67 单克隆抗体，型号SC-23900，规格:200 μg/ml，购自上海优宁维生物科技有限公司。

1.3免疫组化结果判断 S100免疫组化结果以肿瘤细胞细胞质或细胞核中出现棕色颗粒为阳性。Survivin染色阳性以胞核和胞质内出现棕色颗粒为阳性;Ki-67免疫组化阳性染色定位于肿瘤细胞细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。依照参照文献〔5〕报道的方法，综合染色强度和阳性细胞百分比的得分结果进行综合评分。(1)染色强度:无着色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色者为3分。(2)阳性细胞百分比:随机选取10个高倍视野(×200)，每个视野计数1 000个细胞，无阳性细胞为0分，阳性细胞数≤10%为1分，11% ～50%为2分，51% ～75%为3分，＞75%为4分。将两项得分相乘，0分为-，1～2分为+，3～6分为⧺，8～12分为⧻，其中⧺和⧻判为阳性。

1.4统计学处理 采用SPSS19.0统计学软件进行χ2检验。

2 结果

2.1各组S100表达情况 随肿瘤恶性程度增高，S100阳性率明显降低(χ2=12.79，P＜0.05)。正常脑组织中S100阳性率高于低级别星形胶质瘤组织，差异无统计学意义(χ2=0.40，P＞0.05);也明显高于高级别星形胶质瘤组织(χ2=11.59，P＜0.05)。低级别星形胶质瘤中S100阳性率明显高于高级别(χ2=8.88，P＜0.05)。见表1。

2.2各组Survivin表达情况 随肿瘤恶性程度增高，Survivin阳性率明显升高(χ2=14.41，P＜0.05)。高级别胶质瘤组织中Survivin阳性率高于低级别和正常脑组织(χ2=4.02、χ2=12.58，均P＜0.05);低级别星形胶质瘤中Survivin阳性率明显高于正常脑组织(χ2=5.45，P＜0.05)。见表2。

2.3各组Ki-67表达情况 随肿瘤恶性程度增高，Ki-67阳性率明显升高(χ2=12.69，P＜0.05)。高级别胶质瘤组织中Ki-67阳性率高于低级别和正常脑组织(χ2=3.95、χ2=10.95，均P＜0.05);低级别星形胶质瘤中Ki-67阳性率明显高于正常脑组织(χ2=4.01，P＜0.05)。见表3。

2.4星形胶质瘤中Survivin和Ki-67的相关性 Survivin表达与 Ki-67呈高度正相关关系(r=0.31，P＜0.05)。见表4。

表1 各组S100表达情况(n)

表2 各组Survivin表达情况(n)

表3 各组Ki-67表达情况(n)

表4 星形胶质瘤中Survivin和Ki-67的相关性(n)

3 讨论

文献报道〔6〕，星形胶质瘤占颅内肿瘤的13% ～26%，占胶质瘤21.2%～51.6%。可应用于星形胶质瘤肿瘤特性的免疫组化标记物较多〔7〕。S100蛋白是一种在正常脑组织细胞中稳定表达的细胞，参与正常细胞的周期调控和增殖分化等多种生理过程。S100蛋白与肿瘤增殖呈负相关，有研究报道〔8〕，S100在低级别胶质瘤组织中高表达，随着恶性程度提高，S100表达水平降低，在高级别胶质瘤组织中呈低表达状态。本研究结果提示，星形胶质瘤细胞形成和恶性程度增高与S100表达下调或缺失有关，S100可作为诊断星形胶质瘤异常增生的一种特异性蛋白标记。

Survivin属于凋亡抑制蛋白中的一种，在肿瘤组织中表达但在正常组织中不表达。Survivin的这一特点提示其与肿瘤的病程进展有密切相关。有文献报道〔9〕，Survivin可能通过干扰肿瘤细胞的凋亡和增殖平衡促进肿瘤发生和发展。本研究结果提示，Survivin蛋白的表达水平随星形胶质瘤恶性程度的升高而增高，Survivin表达上调抑制了胶质瘤细胞的凋亡。

Ki-67是与细胞增殖关系密切的核蛋白，在正常组织中表达水平极低，可准确反映肿瘤细胞增殖活性状态〔10〕，预测患者的预后，是肿瘤增殖的标志物之一。本研究结果提示Ki-67蛋白的表达与星形胶质瘤恶性程度呈正相关，Ki-67表达升高反映星形胶质瘤呈高度增殖状态。Survivin蛋白在抑制肿瘤细胞的凋亡，可促进转化细胞的异常增殖。

综上，S100低表达、Survivin和Ki-67高表达提示星形胶质瘤的恶性程度较高。三者可反映星形胶质瘤的增殖状态，有助于鉴别肿瘤的恶性程度。

1 Lassman AB.Molecular biology of gliomas〔J〕.Curr Neurol Neurosci Reports，2004;4(3):228-33.

2 Donato R，Cannon BR，Sorci G，et al.Functions of S100 proteins〔J〕.Curr Molec Med，2013;13(1):24-57.

3 Ryan BM，O＇Donovan N，Duffy MJ.Survivin:a new target for anti-cancer therapy〔J〕.Cancer Treatment Rev，2009;35(7):553-62.

4 Nishimura R，Osako T，Okumura Y，et al.Clinical significance of Ki-67 in neoadjuvant chemotherapy for primary breast cancer as a predictor for chemosensitivity and for prognosis〔J〕.Breast Cancer，2010;17(4):269-75.

5 许良中，杨文涛.免疫组织化学反应结果的判断标准〔J〕.中国癌症杂志，1996;6(4):229-31.

6 许志强，徐伦山，蒋晓江，等.脑胶质瘤的临床治疗进展〔J〕.中国临床神经科学，2010;18(4):431-5.

7 张晓娟，朴月善，卢德宏.胶质瘤诊治相关分子标志物的研究进展〔J〕.中华神经外科杂志，2012;28(11):1179-81.

8 陈宏刚，唐运涛，刘伦波，等.胶质瘤中S100，Survivin和Ki-67的表达及其生物学意义〔J〕.局解手术学杂志，2011;20(3):287-9.

9 贾云峰，韦 玮，胡国良，等.神经胶质瘤Ki-67，PTEN和Survivin表达的临床研究〔J〕.局解手术学杂志，2012;21(4):343-5.

10 姜振富，李 梅，韦 鸿，等.脑胶质瘤中Ki-67，Kras和 Braf蛋白的表达及临床意义〔J〕.现代肿瘤医学，2013;21(3):507-10.