红景天对复合因素致慢性疲劳大鼠血清IL-2、TNF-α水平的影响

王著敏，金 杰

(1.河南省第二人民医院 内科二病区 河南郑州 451191;2.河南中医学院第一附属医院 脑病三区 河南郑州 450000)

慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome，CFS)患者长期的虚弱性疲劳严重影响日常工作和生活质量。目前CFS的病因不清，临床尚无有效治疗药物。从目前公认的CFS诊断标准来看，诊断依据主要为患者的主诉，无客观的体征和实验室检查、影像学资料，符合中医学审症求因、辨证论治的整体观认知疾病方式。本实验通过观察红景天对慢性疲劳大鼠IL-2、TNF-α的影响，试图从免疫调节角度阐述红景天治疗CFS的作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物及分组 雄性SD大鼠40只，质量(200±20)g，由河南省动物实验中心提供(动物质量合格证号:SYXX(豫)2005-0012)。大鼠自然进食饮水，5只/笼，饲养环境为正常光照、室温(20±2)℃、相对湿度40%。适应5 d后，称量大鼠质量;按数字表法随机分为正常组、模型组、红景天组、归脾丸组，每组10只。

1.2 动物模型制备

1.2.1 造模用具:①游泳池:长80 cm，宽50 cm，高50 cm;②自制束缚筒:管状，长18 cm，内径5.8 cm，筒前端有一通气口，内径1.8 cm;③自制敞箱:立方形，高33 cm，长、宽均为80 cm，周壁为黑色，底面用蓝线划分为面积相等的25个方块;④电子天枰，型号:DS-671，d=0.5 g，由上海寺冈电子有限公司制造;⑤秒表;⑥温度计。

1.2.2 造模方法:①冷水游泳:在不同时间到冷水中游泳，大鼠游泳时水温为(16±1)℃，水深36 cm，每次游泳持续7 min。②束缚:采用上述介绍的自制束缚筒，大鼠头向通气口置入后，抵住其尾端，每次束缚30 min。③造模之日起，除正常组外，其余3组单号日期进行冷水游泳，双号日期进行夹尾激怒(每次夹尾30 min)，并每日进行束缚，造模时间为21 d。④从造模之日起，正常组普通饲养，模型组按3 ml/只给予生理盐水灌胃;红景天组按168 mg/(kg·d)给予圣地红景天混悬液(红景天:诺迪康胶囊，由西藏红景天药业股份有限公司制造，国药准字 Z10980020，0.28 g/粒)灌胃;归脾丸组按900 mg/(kg·d)给予归脾丸混悬液灌胃(归脾丸，由河南省宛西制药股份有限公司制造，国药准字Z41021897，每8丸相当于原药材3 g)，3 ml/只，每日1次，连续21 d。

1.3 仪器与试剂 低速自动平衡离心机(型号:LDZ5-2，产地:北京);放射免疫 γ计数器(型号:SN-682，上海核福光电仪器有限公司生产);电热恒温水槽(型号:DK-8A，上海医用恒温设备厂生产);IL-2放免试剂盒(解放军总医院科技开发中心提供);TNF-α放免试剂盒(北京科美东雅生物技术有限公司提供)。

1.4 取材及检测方法 腹腔注射10%乌拉坦400 mg/kg麻醉大鼠后，打开腹腔，从腹主动脉取血3 ml收集到普通试管中，待血清析出后吸出血清，放置－70℃低温冰箱中保存。采用放射免疫方法检测血清中IL-2、TNF-α的含量。具体操作按试剂盒说明书进行，由专业人员一次完成检测。

1.5 统计学处理 采用SPSS 13.0统计学软件进行数据处理，组间差异采用单因素方差分析:方差齐时采用LSD法(最小显著差异法);方差不齐时采用Dunnett’s T3法。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

正常组、红景天组、归脾丸组大鼠血清IL-2、TNF-α水平均较模型组高，差异具有统计学意义(P＜0.05)。与正常组比较，红景天组IL-2、TNF-α含量降低，差异无统计学意义(P＞0.05)。与正常组比较，归脾丸组IL-2、TNF-α含量降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。具体数据见表1。

表1 各组大鼠血清IL-2、TNF-α的比较(±s)

表1 各组大鼠血清IL-2、TNF-α的比较(±s)

组别 n IL-2 TNF-α正常组10 2.52±0.37 1.07±0.33模型组 10 1.46±0.27 0.46±0.19红景天组 10 2.21±0.54 0.93±0.32归脾丸组10 2.04±0.37 0.77±0.36

3 讨论

CFS表现为长期原因不明的强疲劳感和身体不适，目前临床上尚无有效治疗药物。CFS诊断主要根据患者的主诉，具有自限性，发病机制尚不清楚。本实验从免疫调节角度观察红景天对慢性疲劳大鼠的影响，以阐明红景天治疗CFS的作用机制。

IL-2是一种具有高活化的多功能小分子蛋白，是由活化的CD4+T细胞及少量CD8+T细胞产生的一种免疫调节淋巴因子，能够增强NK细胞和CD8+T细胞的活性，刺激NK细胞和CD8+T细胞，诱导IL-1β受体的生成，产生γ-INF，维持T细胞在体外的生长，激活多种免疫细胞。IL-2水平的高低反映了T细胞的功能状态，其产生能力是机体细胞免疫功能的重要指标。

TNF-α是由活化的NK细胞释放产生的多肽类介质，具有广泛的生物学作用，大量临床研究表明，TNF-α参与了炎症感染、内毒素休克、恶液质性消瘦和营养不良综合征、免疫调节等一系列病理过程，在细胞反应中发挥了重要作用。TNF-α具有剂量依赖性，高剂量时可降低心输出量，激活凝血系统，引起低糖血症，致全身中毒性休克;中等剂量时以内分泌方式作用于全身组织，导致发热，刺激肝细胞分泌蛋白质，抑制骨髓造血;低剂量时以自分泌和旁分泌方式作用于局部白细胞和内皮细胞，诱导炎症反应。也就是说，低剂量的TNF-α对机体具有免疫调节和保护作用，中、高等剂量参与机体多种病理改变，造成多器官损伤。

实验结果显示，模型组与正常组血清IL-2和TNF-α含量差异均有统计学意义(P＜0.05)。这些差异可能是慢性疲劳综合征发生的病理机制之一。经红景天、归脾丸治疗后，大鼠模型血清IL-2和TNF-α含量均有明显升高，且红景天治疗组IL-2和TNF-α血清含量恢复至接近正常水平，优于归脾丸组(P＜0.05)。该结果说明，红景天较归脾丸具有更强的免疫调节作用。综上所述，免疫调节可能是红景天治疗慢性疲劳综合征获效的机制之一。

［1］马云.应用白细胞介素-2增强运动员免疫力的效果观察［J］.中国运动医学杂志，2002，21(1):107-108.

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