DNA-PKcs蛋白在食管癌组织中的表达及临床病理相关性研究

2014-11-18王昆仑徐晓霞张忠献任景丽

河南医学研究 2014年12期

王昆仑，徐晓霞，张忠献，刘杨，任景丽，袁翎

(1.郑州大学附属肿瘤医院放疗科河南郑州 450008;2.郑州大学第二附属医院病理科河南郑州 450014)

DNA双键断裂是细胞发生癌变和死亡的重要原因。DNA-PKcs是修复DNA双键断裂、维护生物体基因组稳定的关键酶。有研究显示DNA-PKcs蛋白的分布和肿瘤的易感性、预后以及抗肿瘤治疗的敏感性密切相关［1］，但和食管癌关系的报道较少见，因此了解DNA-PKcs在食管癌组织中的表达及其和临床病理的关系对食管癌风险评估、预后判断有现实的临床意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料收集河南省肿瘤医院2009年1月至2011年12月病理诊断确诊并手术切除食管癌患者共41例，分别采集患者的食管癌组织、癌旁组织(距肿瘤边缘约1～2 cm组织)以及正常组织(距肿瘤边缘＞5 cm组织)。患者年龄 32～76岁，平均(51.27±7.19)岁，其中男性23例，女性18例，所有病例均有完整的临床资料及完好的存档蜡块。病理类型为鳞状细胞癌者28例，腺癌4例，其他病理类型9例(腺鳞癌3例，未分化癌2例，肉瘤1例，癌3例);低分化12例，中分化12例，高分化23例;病理分期为Ⅰ期5例，Ⅱ期24例，Ⅲ期12例。

1.2 方法和主要试剂实验采用免疫组化SP法，使用的主要试剂包括:DNA-PKcs浓缩型单克隆抗体、SP超敏试剂盒(鼠/兔抗)、胰酶消化试剂盒，DAB显色液等。

1.3 免疫组化结果的评定 DNA-PKcs为核蛋白，细胞核被染色呈棕黄色即为阳性表达细胞。显微镜下观察免疫组化染色后的病理切片，对每1张病理切片计数5个高倍视野(40×10)中细胞阳性表达数，以视野中阳性表达数占细胞总数的百分比来表示DNA-PKcs蛋白表达水平。“－”为阳性细胞表达率小于5%、“+”为5%～50%之间、“++”为50%～90%之间、“+++”为阳性表达细胞率大于90%。

1.4 统计学分析采用SPSS 17.0统计软件对数据进行处理和分析，定性资料采用χ2检验或Fisher精确概率法，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 癌组织、癌旁组织和正常组织中DNA-PKcs蛋白表达情况癌组织DNA-PKcs蛋白表达阳性率最高(87.8%)，其次为癌旁组织(63.4%)，正常组织 DNAPKcs表达阳性率最低(51.2%)。癌组织、癌旁组织和正常组织3组比较DNA-PKcs蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.05)，癌组织与癌旁组织和正常组织DNAPKcs表达两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05);而癌旁组织阳性率高于正常组织，但差异无统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 癌组织、癌旁组织和正常组织中DNA-PKcs蛋白表达情况［n，(%)］

2.2 DNA-PKcs蛋白表达临床病理特征的关系 DNA-PKcs蛋白表达在高分化组中阳性率为100%，在中分化组中阳性率为50%，在低分化组中阳性率为75%，3组间差别有统计学意义(P＜0.05);DNA-PKcs蛋白表达3组间两两比较高分化组与中分化组差异有统计学意义(P＜0.05)，而其他两两比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。DNA-PKcs蛋白表达与患者性别、年龄、病例类型和pTNM分期无关。见表2。

3 讨论

DNA依赖蛋白激酶催化单位(DNA-PKcs)是DNA双链损伤修复中关键酶。当各种因素引起DNA双链断裂时，DNA蛋白激酶的亚单位Ku70和Ku80迅速形成异源二聚体，与受损的DNA末端结合，通过非同源性末端接合(NHEJ)途径激活DNA-PKcs组成DNA依赖蛋白激酶，在DNA修复中发挥重要作用。

研究结果表明，食管癌癌组织DNA-PKcs蛋白表达阳性率高于癌旁组织和正常组织，且差异有统计学意义，这与胡航荣［2］对食管癌不同组织之间 DNAPKcs蛋白表达阳性率研究结果一致，也与其在肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌患者中不同组织表达情况一致［3-4］，提示 DNA-PKcs蛋白表达可能参与了食管正常细胞向恶性细胞转变的过程。黄梅芳等［3］发现DNA-PKcs蛋白表达与肺癌病理类型和病理分期有关，病理分期越晚，其表达越强，细支气管肺泡癌表达高于其它肺腺癌，且均高于肺腺鳞癌，而本研究结果显示，食管癌DNA-PKcs蛋白表达与病理类型和病理分期无关，提示DNA-PKcs蛋白表达情况与癌症类型有关。有研究［2］发现DNA-PKcs蛋白表达随肿瘤分化程度增高而增高，本研究结果也显示DNA-PKcs蛋白表达与食管癌组织的分化程度有关，高分化组表达强于中分化组和低分化组，且与中分化组差异有统计学意义，提示DNA-PKcs可能是预测食管癌分化程度的一项重要指标，有可能成为食管癌指示食管癌放疗预后的生物学标志物。同时食管癌低分化组DNA-PKcs蛋白表达要高于中分化组，但差异无统计学意义，可能与分化程度各组样本例数较少，产生统计学偏倚有关。