合肥地区腹泻儿童2011—2013年志贺菌、沙门菌属菌群分布及耐药性分析

刘红娟，查 巍，祖 方

(安徽省儿童医院检验中心，安徽合肥 230054)

急性肠道感染好发于2岁左右儿童，与成人相比较，病原菌的危害率更高。志贺菌、沙门菌属感染引起细菌性痢疾、伤寒、副伤寒等相关性腹泻，是全年都可发病的肠道传染病，好发于夏秋季节，严重危害儿童健康，可造成电解质紊乱、营养不良，严重者出现休克症状。为了解合肥地区志贺菌、沙门菌属以及各分离菌株对临床常用抗菌药物的耐药情况，我们对2011—2013年肠道门诊(时间为每年5月1日到10月31日)16 354例腹泻患儿的粪便标本进行细菌血清型和耐药性分析，现将菌属鉴定结果及相应的药敏实验结果报道如下。

1 资料和方法

1.1 标本来源 收集2011—2013年间肠道门诊腹泻患儿粪便标本，患儿来自合肥市及附近周边地区。

1.2 试剂 诊断血清购自宁波天润生物药业有限公司。六种药敏纸片购自OXIDE公司。生化鉴定管购自杭州微生物试剂有限公司。麦康凯及M-H琼脂平板购自生物梅里埃公司。

1.3 检测方法 将粪便标本划线接种于麦康凯琼脂上，经36.5℃18～24 h孵育后挑选无色半透明的可疑菌落转种血平板，再经36.5℃18～24 h孵育后，进行菌种生化鉴定，符合者做血清凝集试验，同时以生理盐水为阴性对照。

1.4 药敏试验 采用K-B纸片扩散法测定耐药性。挑取孵育18～24 h后的单个菌落，用生理盐水调制成0.5麦氏单位，接种 M-H琼脂平板，贴药敏纸片置36.5℃24 h，按NCCLS标准判断。质控菌株为ATCC25922。

2 结果

2.1 沙门菌属检出率及菌型分布情况 2011—2013年肠道门诊共有就诊患儿16 354例，男女比例1.58∶1，最小的4 d，最大的13岁，沙门菌属93株，检出率逐年上升。具体见表1。经血清凝集试验证实，B群沙门菌属共51株(58.4%)，其中22株(43.1%)诊断为鼠伤寒沙门菌，其余各群分别为D群22株(23.7%)、C群16株(17.2%)、E群2株(2.2%)、A群2株(2.2%)，菌种各异。

2.2 福氏志贺菌、宋氏志贺菌检出率及菌型分布情况 福氏志贺菌47株、宋氏志贺菌29株、未检出鲍氏志贺菌、痢疾志贺菌。B/D1.62∶1，检出率及菌型分布情况具体见表2。

2.3 沙门菌、志贺菌属感染确诊患者性别、年龄及分布特征169株病原菌(属)感染者包括男性99例，女性70例，男女比例为1.41∶1。年龄最小的4 d，7～12月的婴幼儿是主要的易感人群，占确诊总数的53.3%。见表3。

2.4 沙门菌、志贺菌属药敏实验结果 2011—2013年沙门菌属对头孢噻肟耐药率呈逐年上升趋势;福氏志贺菌对头孢他啶呈逐年上升趋势;宋氏志贺菌对复合磺胺呈逐年上升趋势，头孢他啶2013年增幅明显;氯霉素三年耐药率为0，见图1～3。药敏结果显示两种菌属对头孢他啶的耐药率相对较低。2011至2013年各菌种对常用抗生素的耐药情况并无明显的增减趋势。

表1 2011—2013年志贺菌属、沙门菌属检出率%

表2 2011—2013年福氏志贺菌株、宋氏志贺菌株检出数量

表3 确诊患者不同年龄组感染病原菌(属)的种类及数量

3 讨论

志贺菌属是引起细菌性痢疾的病原菌，其感染率一直高居甲、乙类法定传染病前5位［1］。2011—2013年我院肠道门诊细菌性痢疾检出率无差异，与患儿总人数有关。但明显低于本地区成人［2］。差异的来源主要是因为成人从事工作、社交活动范围广，接触病原菌机会多有关，另外，也说明本地区婴幼儿健康喂养、儿童保健有效。但引起婴幼儿腹泻的原因很多，有研究表明，轮状病毒、致病性大肠埃希菌［3］导致的腹泻高于由志贺菌、沙门菌属。所以，传统的粪便培养已不能满足病原学变迁的要求，建议监测肠道传染病的同时，有针对性的开展肠道病毒及其它病原学检测，更准确地找到病因，及时治疗。本次调查发现，2011—2013年沙门菌属检出率逐年增高，其中2013年最显著，并且高于志贺菌属检出率，需要引起重视。各个地区和医院分离的优势菌群不同［4］，我院以B群鼠伤寒沙门菌为主，与报道一致［5］。7～12月婴幼儿是主要的易感人群。因为此年龄段婴幼儿来自母体的保护性抗体减少，而自身免疫系统发育尚未完善有关。沙门菌属在自然界中分布广泛，存在于水，多种动物和食品中，此年龄段婴幼儿活动逐渐增多，喜好抓食等生活习惯，可能触摸到被沙门菌属污染的食物、玩具等，更容易引发相关性腹泻有关。

图1 2011-2013年福氏志贺菌对六种抗生素的耐药率

图2 2011-2013年福氏志贺菌属对六种抗生素的耐药率

图3 2011—2013年宋氏志贺菌对六种抗生素的耐药率

2011—2013年细菌性痢疾以福氏志贺菌感染为主，宋氏志贺菌次之，与文献报道一致［6］。但随着我国经济发展，生活环境、饮食卫生条件不断改善，流行的血清型规律发生着变化。宋氏志贺菌比福氏志贺菌抵抗力强，易耐受日常生活中使用的某些消毒剂［6］，经济发达地区消毒剂使用频率高，如对环境、饮水的消毒，导致宋氏志贺菌近年来检出比例增长。北京市2007年起宋氏志贺菌逐渐成为优势菌株［7］，欧洲发达国家宋氏志贺菌是主要的血清型且感染以儿童为主［8］。使用B/D群比值的变化能更好地反应卫生水平、传播因素的变化，比值下降，提示卫生条件的改善［9］。从表2得出2011—2013年合肥地区儿童细菌性痢疾感染B/D比值逐年升高，尽管总检出率为0.46%。也应加强婴幼儿食品安全、公共卫生监管工作，保护易感人群，防止病从口入。

药敏结果显示，福氏志贺菌、沙门菌属耐药率逐年上升。志贺菌R质粒介导的多重耐药性［10］是导致对氨苄西林、复合磺胺、氯霉素呈高度耐药的主要原因。治疗时不能作为首选药物。宋氏志贺菌耐药率低于福氏志贺菌，以往宋氏志贺菌引起的疾病较少，将质粒传给它的机会也少，是造成其耐药率低的原因之一。差别以氯霉素尤为突出，其原因须进一步探究。另外，宋氏志贺菌2012—2013年检出率低，也是导致结果差异较大的原因。喹诺酮类虽被列为治疗志贺菌的首选药物［11］，但有专家认为对儿童的关节软骨发育有影响，限制其在儿童中的应用。头孢类抗生素副作用少，被临床广泛使用，但其耐药率也在逐年上升。从结果看出，福氏志贺菌、宋氏志贺菌对头孢噻肟耐药率高，可能是志贺菌接合了产ESBLs基因，该基因对头孢噻肟水解能力强［12］。尽管头孢他啶耐药率低，但三年来耐药有逐渐增高的趋势，须引起重视。所以，在面对抗生素选择性强大压力下，既要防止抗生素的滥用，也要注意某类抗生素的使用强度［13］，做好耐药菌的检测工作，才能减少耐药菌株产生。

［1］ 钟豪杰，常照瑞，张 静.中国2007年细菌性痢疾监测分析［J］.中华流行病学杂志，2010，31(3):304-307.

［2］ 周 雪，孙秋林，叶丽军，等.合肥地区2004至2011年细菌性痢疾流行及菌群分布情况［J］.中华传染病杂志，2013，31(1):44-46.

［3］ 谢春燕，胡 慧，崔海燕，等.婴幼儿感染性腹泻的致病菌及肠道病毒监测结果分析［J］.检验医学与临床，11(2):168-170.

［4］ 刘迎春，衣美英，李 杰，等.192株志贺菌和76株沙门菌属菌群菌型分布及耐药性分析［J］.中日友好医院学报，2009，23(4):213-215.

［5］ 胡云海，范云祥，杜成雪.2010-2012年我院儿童细菌性腹泻病原菌及药敏分析［J］.医学前沿，2013，18(1):70-71.

［6］ 钱慧敏，庄 菱，蕫 晨，等.江苏省2008-2009年志贺菌菌型分布及耐药性分析［J］.江苏预防医学，2010，21(4):15-17.

［7］ 吴晓娜，贾 蕾，刘桂荣，等.北京市2004-2009年痢疾样病例流行病学特征分析［J］.中华疾病控制杂志，2011，15(10):872-875.

［8］ Muller L，Jensen T，Petersen RF，et al.Imported fresh sugar peas as suspected source of an outbreak of Shigella sonnei in Denmark，April-May 2009［J］.Euro Surveill，2009，14:24.

［9］ 纪金玲，廖华芳，崔恩博，等.儿童腹泻病原菌1004株构成及药敏试验结果分析［J］.中华临床医师杂志，2012，6(21):6892-6894.

［10］苑广盈，边锋芝，朱建美，等.质粒介导的志贺菌产超广谱β内酰胺酶及其耐药基因［J］.中华检验医学杂志，2008，31(11):1245-1248.

［11］胡亚美，江载芳.实用儿科学［M］.7版.北京:人民卫生出版社，2002:875.

［12］叶金艳，祝建军，李英龙，等.多重耐药志贺菌临床分离株耐药基因检测及指标聚类分析［J］.中国人兽共患病学报，2013，29(9):929-933.

［13］陈 薇，涂春莲，俞春芳，等.2010-2011年我院抗菌药物使用量与细菌耐药分析［J］.安徽医药，2013，17(2):325-327.