胃癌患者手术前后血清胸苷激酶1水平变化的临床研究

林琳等

[摘要] 目的 探讨检测血清胸苷激酶（TK1）水平对胃癌诊断及手术效果评估的意义。方法 采用免疫印迹-增强化学发光法检测35例健康查体者和68例胃癌患者血清TK1水平，比较43例胃癌患者根治术前后血清TK1水平。结果胃癌患者血清TK1水平明显高于正常对照组 （P<0.01）；血清TK1水平与胃癌患者性别、年龄无相关，与胃癌患者临床分期、细胞分化程度相关；Ⅳ期明显高于Ⅲ期、Ⅲ期明显高于Ⅱ期、Ⅱ期明显高于Ⅰ期、Ⅰ期明显高于正常对照组，两两比较差异有统计学意义（P<0.01～0.05），肿瘤细胞分化程度较差胃癌患者血清TK1水平明显高于分化程度较好胃癌患者；术后胃癌患者血清TK1水平明显低于术前（P<0.01）。结论 检测血清TK1水平对胃癌诊断、预测病情进展、疗效等有较大的临床价值。

[关键词] 胸苷激酶1； 胃癌； 手术治疗

[中图分类号] R735.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）27-0151-03

[Abstract] Objective To evaluate the use of Thymidine Kinase 1（TK1） in serum as proliferating tumor marker for gastric carcinoma and monitoring marker for the response to operation. Methods Serum level of TK1 expression were detected with sensitive chemiluminescence dot- blot assay in were available to detect the level of serum TK1 in 35 cases of normal healthy subject and 68 cases of patients with gastric carcinoma， compared with 43 cases of patients with gastric carcinoma pre-and post-operation. Results The level of serum TK1 were elevated in all subgroups of patients with gastric carcinoma compared to the normal healthy subject （P<0.01）， serum TK1 was correlated with TNM stage and histological grade， and not with sex and age； the serum TK1 level in stage Ⅳwas higher in comparison with stage Ⅲ， in stage Ⅲit was higher than that in stage Ⅱ， in stage Ⅱit was higher than that in stage Ⅰ， and in stage Ⅰit was higher than that in normal healthy subject （P<0.01-0.05）； Being lower in the well differentiated and moderately differentiated than the poorly differentiated （P<0.01-0.05）， the level of serum TK1 was higher in the cases of poorly differentiated adenocarcinoma， signet ring cell carcinoma and mucoid adenocarcinoma than those in the cases of well differentiated and moderately differentiated adenocarcinoma （P<0.05）， the serum TK1 levels remarkably reduced in patients with gastric carcinoma after operation （P<0.01）. Conclusion Detection the level of serum TK1 may be larger clinical value for cancer diagnosis， predict disease progression and the curative effect in patients with gastric carcinoma.

[Key words] Thymidine Kinase 1； Gastric carcinoma； Operation

胃癌在世界癌症死亡率中位居第2位，全球范围内胃癌呈逐渐上升的趋势，其发生、发展、浸润和转移机制尚未完全清楚[1，2]；肿瘤细胞的增殖、黏附能力与恶性肿瘤患者的预后密切相关[3，4]，胸苷激酶1 （thymidine kinase 1， TK1）是一种与细胞增殖密切相关并在细胞质中表达活性的激酶，TK1的检测可以准确测定肿瘤细胞的异常增殖情况，可用于恶性肿瘤患者进行病情、治疗效果监视和预后评估[5-7]；本研究采用免疫印迹-增强化学发光法检测35例正常健康查体者和68例胃癌患者血清TK1水平，比较43例胃癌患者根治性手术前后血清TK1水平，分析血清TK1水平与胃癌临床病理特征的关系，探讨其在胃癌病情变化、手术效果评估及预后判断中的临床价值。

1 资料与方法

1.1临床资料endprint

正常对照组35例为广东医学院附属医院健康查体者，男23例，女12例，年龄21～64岁，中位年龄 42岁。胃癌组68例为2009～2012年在广东医学院附属医院住院患者，按国际抗癌联盟（UICC）制定的胃癌最新分期标准进行分期，术前均未行放化疗，其中男42例，女26例，年龄20～63岁，中位年龄40岁；Ⅰ期14例，Ⅱ期20例，Ⅲ期18例，Ⅳ期16例；68例胃癌按病理类型分为：高分化腺癌15例，中分化腺癌18例，低分化腺癌16例，印戒细胞癌10例，黏液腺癌9例。本研究中将肿瘤细分成两个组织学亚型：分化程度较好包括高分化腺癌和中分化腺癌，分化程度较差包括低分化腺癌、印戒细胞癌和黏液腺癌。

1.2实验方法

晨起空腹抽取静脉血2 mL，室温下静置3 h，4000 г/min离心15 min，分离出血清，置于1.5 mL聚丙二醇脂试管内，放入-20°C冰箱保存，按编号分装于2个离心管（分别用于初次检测和复检），成批采用免疫印迹-增强化学发光法检测血清TK1水平，由专人严格按说明书要求进行实验操作，检测试剂盒和仪器由深圳华瑞同康生物技术有限公司提供；健康对照组及胃癌患者于术前检测血清TK1水平，其中43例胃癌患者分别于根治性手术前及手术后（60±7） d检测血清TK1 水平。

1.3统计学方法

采用SPSS17.0统计学软件进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，各组间差异进行方差分析或t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

3讨论

人类TK1基因是分子质量为25KD的蛋白质，并且是胸腺嘧啶核苷合成DNA的关键酶，可将胸苷转化为磷酸胸苷，参与调控细胞周期，与细胞分裂增生关系密切，正常人机体中血清TK1含量极微，甚至检测不出，但是在细胞过度增生期，细胞内TK1合成显著增加，而且随着肿瘤的快速生长、坏死，TK1释放到外周血的机率成倍增加，TK1水平迅速升高，可超过正常水平的2～100倍[8，9]；Topolcan等[10]报道血清TK1水平可提示肿瘤生长速度；Chen等[11]研究表明87% TK1阳性患者存在恶性肿瘤相关疾病，而且与疾病病情的轻重程度相关，提示血清TK1有望成为一种新的潜在且有用的肿瘤标记物用于监测恶性肿瘤增殖及疗效判断。

本文结果显示胃癌患者血清TK1水平明显高于健康对照组，不同病期的胃癌患者血清TK1水平有差异，Ⅳ期胃癌患者血清TK1水平明显高于Ⅲ期，Ⅲ期高于Ⅱ期、Ⅱ期高于Ⅰ期，说明胃癌患者与正常健康人之间血清TK1水平有一定差异。血清TK1水平与胃癌患者临床分期相关，提示TK1水平在胃癌的发生、发展、转移过程中发挥重要作用，TK1有可能作为胃癌的一种新的肿瘤标记物；研究发现血清TK1水平与胃癌患者年龄和细胞分化程度无相关，进一步研究发现根治性手术后胃癌患者血清TK1水平较手术前减低，而且追踪发现根治性手术后胃癌患者血清TK1水平较高者复发机会较高，提示血清TK1水平可反映胃癌患者机体肿瘤负荷程度、预测胃癌患者病情进展、监测胃癌治疗效果、评估胃癌患者预后[12]。

检测血清TK1水平不需要组织标本，操作简便、无创伤、可重复性强，易于在临床实践中推广应用，进一步研究血清TK1水平在胃癌中的意义，具有重要的临床参考价值。

[参考文献]

[1] 韩玉龙. 影响胃癌预后的相关因素研究[J]. 中国现代医生，2013，51（23）：57-61.

[2] Liang QL，Wang BR，Li ZY，et al. Effect of TSLC1 gene on growth and apoptosis in human esophageal carcinoma Eca109 cells[J]. Arch Med Sci，2012，8（6）：987-992.

[3] 梁启廉，李志东，吴斌华，等. 抗CD105单克隆抗体对大肠癌生长的抑制作用[J]. 中华实验外科杂志，2009，26（2）：165-166.

[4] Liang QL，Li ZY，Zhou Y，et al. Construction of a recombinant eukaryotic expression vector containing PHD3 gene and its expression in HepG2 cells[J]. J Exp Clin Cancer Res， 2012， 31：64.

[5] Kiran Kumar J，Sharif H，Westberg S，et al. High levels of inactive thymidine kinase 1 polypeptide detected in sera from dogs with solid tumours by immunoaffinity methods：Implications for in vitro diagnostics[J]. Vet J，2013，197（3）：854-860.

[6] Agarwal HK，McElroy CA，Sjuvarsson E，et al. Synthesis of N3-substituted carboranyl thymidine bioconjugates and their evaluation as substrates of recombinant human thymidine kinase 1[J]. Eur J Med Chem，2013，60：456-468.

[7] Liu QL，Liang QL，Li ZY，et al. Function and expression of prolyl hydroxylase 3 in cancers[J]. Arch Med Sci，2013，9（4）：589-593.

[8] Bolayirli M，Papila C，Korkmaz GG，et al. Serum thymidine kinase 1 activity in solid tumor （breast and colorectal cancer） patients treated with adjuvant chemotherapy [J]. J Clin Lab Anal，2013，27（3）：220-226.

[9] Mutahir Z，Clausen AR，Andersson KM，et al. Thymidine kinase 1 regulatory fine-tuning through tetramer formation[J]. FEBS J，2013，280（6）：1531-1541.

[10] Topolcan O，Holubec L Jr. The role of thymidine kinase in cancer diseases[J]. Expert Opin Med Diagn，2008，2（2）：129-141.

[11] Chen Z，Zhou H，Li S，et al. Serological thymidine kinase 1（STK1） indicates an elevated risk for the development of malignant tumours[J]. Anticancer Res，2008，28（6B）：3897-3907.

[12] 毛建军，王韧，刘建平. 42例青年胃癌治疗结果分析[J]. 实用中西医结合临床，2011，11（2）：53-54.

（收稿日期：2014-02-10）endprint

正常对照组35例为广东医学院附属医院健康查体者，男23例，女12例，年龄21～64岁，中位年龄 42岁。胃癌组68例为2009～2012年在广东医学院附属医院住院患者，按国际抗癌联盟（UICC）制定的胃癌最新分期标准进行分期，术前均未行放化疗，其中男42例，女26例，年龄20～63岁，中位年龄40岁；Ⅰ期14例，Ⅱ期20例，Ⅲ期18例，Ⅳ期16例；68例胃癌按病理类型分为：高分化腺癌15例，中分化腺癌18例，低分化腺癌16例，印戒细胞癌10例，黏液腺癌9例。本研究中将肿瘤细分成两个组织学亚型：分化程度较好包括高分化腺癌和中分化腺癌，分化程度较差包括低分化腺癌、印戒细胞癌和黏液腺癌。

1.2实验方法

晨起空腹抽取静脉血2 mL，室温下静置3 h，4000 г/min离心15 min，分离出血清，置于1.5 mL聚丙二醇脂试管内，放入-20°C冰箱保存，按编号分装于2个离心管（分别用于初次检测和复检），成批采用免疫印迹-增强化学发光法检测血清TK1水平，由专人严格按说明书要求进行实验操作，检测试剂盒和仪器由深圳华瑞同康生物技术有限公司提供；健康对照组及胃癌患者于术前检测血清TK1水平，其中43例胃癌患者分别于根治性手术前及手术后（60±7） d检测血清TK1 水平。

1.3统计学方法

采用SPSS17.0统计学软件进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，各组间差异进行方差分析或t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

3讨论

人类TK1基因是分子质量为25KD的蛋白质，并且是胸腺嘧啶核苷合成DNA的关键酶，可将胸苷转化为磷酸胸苷，参与调控细胞周期，与细胞分裂增生关系密切，正常人机体中血清TK1含量极微，甚至检测不出，但是在细胞过度增生期，细胞内TK1合成显著增加，而且随着肿瘤的快速生长、坏死，TK1释放到外周血的机率成倍增加，TK1水平迅速升高，可超过正常水平的2～100倍[8，9]；Topolcan等[10]报道血清TK1水平可提示肿瘤生长速度；Chen等[11]研究表明87% TK1阳性患者存在恶性肿瘤相关疾病，而且与疾病病情的轻重程度相关，提示血清TK1有望成为一种新的潜在且有用的肿瘤标记物用于监测恶性肿瘤增殖及疗效判断。

本文结果显示胃癌患者血清TK1水平明显高于健康对照组，不同病期的胃癌患者血清TK1水平有差异，Ⅳ期胃癌患者血清TK1水平明显高于Ⅲ期，Ⅲ期高于Ⅱ期、Ⅱ期高于Ⅰ期，说明胃癌患者与正常健康人之间血清TK1水平有一定差异。血清TK1水平与胃癌患者临床分期相关，提示TK1水平在胃癌的发生、发展、转移过程中发挥重要作用，TK1有可能作为胃癌的一种新的肿瘤标记物；研究发现血清TK1水平与胃癌患者年龄和细胞分化程度无相关，进一步研究发现根治性手术后胃癌患者血清TK1水平较手术前减低，而且追踪发现根治性手术后胃癌患者血清TK1水平较高者复发机会较高，提示血清TK1水平可反映胃癌患者机体肿瘤负荷程度、预测胃癌患者病情进展、监测胃癌治疗效果、评估胃癌患者预后[12]。

检测血清TK1水平不需要组织标本，操作简便、无创伤、可重复性强，易于在临床实践中推广应用，进一步研究血清TK1水平在胃癌中的意义，具有重要的临床参考价值。

[参考文献]

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[3] 梁启廉，李志东，吴斌华，等. 抗CD105单克隆抗体对大肠癌生长的抑制作用[J]. 中华实验外科杂志，2009，26（2）：165-166.

[4] Liang QL，Li ZY，Zhou Y，et al. Construction of a recombinant eukaryotic expression vector containing PHD3 gene and its expression in HepG2 cells[J]. J Exp Clin Cancer Res， 2012， 31：64.

[5] Kiran Kumar J，Sharif H，Westberg S，et al. High levels of inactive thymidine kinase 1 polypeptide detected in sera from dogs with solid tumours by immunoaffinity methods：Implications for in vitro diagnostics[J]. Vet J，2013，197（3）：854-860.

[6] Agarwal HK，McElroy CA，Sjuvarsson E，et al. Synthesis of N3-substituted carboranyl thymidine bioconjugates and their evaluation as substrates of recombinant human thymidine kinase 1[J]. Eur J Med Chem，2013，60：456-468.

[7] Liu QL，Liang QL，Li ZY，et al. Function and expression of prolyl hydroxylase 3 in cancers[J]. Arch Med Sci，2013，9（4）：589-593.

[8] Bolayirli M，Papila C，Korkmaz GG，et al. Serum thymidine kinase 1 activity in solid tumor （breast and colorectal cancer） patients treated with adjuvant chemotherapy [J]. J Clin Lab Anal，2013，27（3）：220-226.

[9] Mutahir Z，Clausen AR，Andersson KM，et al. Thymidine kinase 1 regulatory fine-tuning through tetramer formation[J]. FEBS J，2013，280（6）：1531-1541.

[10] Topolcan O，Holubec L Jr. The role of thymidine kinase in cancer diseases[J]. Expert Opin Med Diagn，2008，2（2）：129-141.

[11] Chen Z，Zhou H，Li S，et al. Serological thymidine kinase 1（STK1） indicates an elevated risk for the development of malignant tumours[J]. Anticancer Res，2008，28（6B）：3897-3907.

[12] 毛建军，王韧，刘建平. 42例青年胃癌治疗结果分析[J]. 实用中西医结合临床，2011，11（2）：53-54.

（收稿日期：2014-02-10）endprint

正常对照组35例为广东医学院附属医院健康查体者，男23例，女12例，年龄21～64岁，中位年龄 42岁。胃癌组68例为2009～2012年在广东医学院附属医院住院患者，按国际抗癌联盟（UICC）制定的胃癌最新分期标准进行分期，术前均未行放化疗，其中男42例，女26例，年龄20～63岁，中位年龄40岁；Ⅰ期14例，Ⅱ期20例，Ⅲ期18例，Ⅳ期16例；68例胃癌按病理类型分为：高分化腺癌15例，中分化腺癌18例，低分化腺癌16例，印戒细胞癌10例，黏液腺癌9例。本研究中将肿瘤细分成两个组织学亚型：分化程度较好包括高分化腺癌和中分化腺癌，分化程度较差包括低分化腺癌、印戒细胞癌和黏液腺癌。

1.2实验方法

晨起空腹抽取静脉血2 mL，室温下静置3 h，4000 г/min离心15 min，分离出血清，置于1.5 mL聚丙二醇脂试管内，放入-20°C冰箱保存，按编号分装于2个离心管（分别用于初次检测和复检），成批采用免疫印迹-增强化学发光法检测血清TK1水平，由专人严格按说明书要求进行实验操作，检测试剂盒和仪器由深圳华瑞同康生物技术有限公司提供；健康对照组及胃癌患者于术前检测血清TK1水平，其中43例胃癌患者分别于根治性手术前及手术后（60±7） d检测血清TK1 水平。

1.3统计学方法

采用SPSS17.0统计学软件进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，各组间差异进行方差分析或t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

3讨论

人类TK1基因是分子质量为25KD的蛋白质，并且是胸腺嘧啶核苷合成DNA的关键酶，可将胸苷转化为磷酸胸苷，参与调控细胞周期，与细胞分裂增生关系密切，正常人机体中血清TK1含量极微，甚至检测不出，但是在细胞过度增生期，细胞内TK1合成显著增加，而且随着肿瘤的快速生长、坏死，TK1释放到外周血的机率成倍增加，TK1水平迅速升高，可超过正常水平的2～100倍[8，9]；Topolcan等[10]报道血清TK1水平可提示肿瘤生长速度；Chen等[11]研究表明87% TK1阳性患者存在恶性肿瘤相关疾病，而且与疾病病情的轻重程度相关，提示血清TK1有望成为一种新的潜在且有用的肿瘤标记物用于监测恶性肿瘤增殖及疗效判断。

本文结果显示胃癌患者血清TK1水平明显高于健康对照组，不同病期的胃癌患者血清TK1水平有差异，Ⅳ期胃癌患者血清TK1水平明显高于Ⅲ期，Ⅲ期高于Ⅱ期、Ⅱ期高于Ⅰ期，说明胃癌患者与正常健康人之间血清TK1水平有一定差异。血清TK1水平与胃癌患者临床分期相关，提示TK1水平在胃癌的发生、发展、转移过程中发挥重要作用，TK1有可能作为胃癌的一种新的肿瘤标记物；研究发现血清TK1水平与胃癌患者年龄和细胞分化程度无相关，进一步研究发现根治性手术后胃癌患者血清TK1水平较手术前减低，而且追踪发现根治性手术后胃癌患者血清TK1水平较高者复发机会较高，提示血清TK1水平可反映胃癌患者机体肿瘤负荷程度、预测胃癌患者病情进展、监测胃癌治疗效果、评估胃癌患者预后[12]。

检测血清TK1水平不需要组织标本，操作简便、无创伤、可重复性强，易于在临床实践中推广应用，进一步研究血清TK1水平在胃癌中的意义，具有重要的临床参考价值。

[参考文献]

[1] 韩玉龙. 影响胃癌预后的相关因素研究[J]. 中国现代医生，2013，51（23）：57-61.

[2] Liang QL，Wang BR，Li ZY，et al. Effect of TSLC1 gene on growth and apoptosis in human esophageal carcinoma Eca109 cells[J]. Arch Med Sci，2012，8（6）：987-992.

[3] 梁启廉，李志东，吴斌华，等. 抗CD105单克隆抗体对大肠癌生长的抑制作用[J]. 中华实验外科杂志，2009，26（2）：165-166.

[4] Liang QL，Li ZY，Zhou Y，et al. Construction of a recombinant eukaryotic expression vector containing PHD3 gene and its expression in HepG2 cells[J]. J Exp Clin Cancer Res， 2012， 31：64.

[5] Kiran Kumar J，Sharif H，Westberg S，et al. High levels of inactive thymidine kinase 1 polypeptide detected in sera from dogs with solid tumours by immunoaffinity methods：Implications for in vitro diagnostics[J]. Vet J，2013，197（3）：854-860.

[6] Agarwal HK，McElroy CA，Sjuvarsson E，et al. Synthesis of N3-substituted carboranyl thymidine bioconjugates and their evaluation as substrates of recombinant human thymidine kinase 1[J]. Eur J Med Chem，2013，60：456-468.

[7] Liu QL，Liang QL，Li ZY，et al. Function and expression of prolyl hydroxylase 3 in cancers[J]. Arch Med Sci，2013，9（4）：589-593.

[8] Bolayirli M，Papila C，Korkmaz GG，et al. Serum thymidine kinase 1 activity in solid tumor （breast and colorectal cancer） patients treated with adjuvant chemotherapy [J]. J Clin Lab Anal，2013，27（3）：220-226.

[9] Mutahir Z，Clausen AR，Andersson KM，et al. Thymidine kinase 1 regulatory fine-tuning through tetramer formation[J]. FEBS J，2013，280（6）：1531-1541.

[10] Topolcan O，Holubec L Jr. The role of thymidine kinase in cancer diseases[J]. Expert Opin Med Diagn，2008，2（2）：129-141.

[11] Chen Z，Zhou H，Li S，et al. Serological thymidine kinase 1（STK1） indicates an elevated risk for the development of malignant tumours[J]. Anticancer Res，2008，28（6B）：3897-3907.

[12] 毛建军，王韧，刘建平. 42例青年胃癌治疗结果分析[J]. 实用中西医结合临床，2011，11（2）：53-54.

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