北京市房山区种植黄芩黄芩苷含量测定
2014-11-05北京市房山区药品检验所0200吴艳苹刘德江李灵
北京市房山区药品检验所(0200)吴艳苹 刘德江 李灵
北京市房山区食品药品监督管理局(102488)王明贵2
黄芩为唇形科植物黄芩的干燥根。具有清热燥湿,泻火解毒,止血,安胎功效。用于湿温、暑温,胸闷呕恶,湿热痞满,泻痢,黄疸,肺热咳嗽,高热烦渴,血热吐衄,痈肿疮毒,胎动不安。因野生资源不足,近年各地多有栽培。我区西部山区于2009年开始种植黄芩,但当地群众只于6~8月采集嫩叶做黄芩茶,而一直未采收其根,致资源严重流失。黄芩苷是黄芩的主要有效成分之一[1],我所检验员依据《中国药典》,采用HPLC法测定了我区种植黄芩的黄芩苷含量,以供参考。
附表1 线性关系考察的测量结果
附表2 加样回收试验的测定结果
1 仪器与试药
仪器:岛津LC-20AT高效液相色谱仪、赛多利斯-CP225D电子天平、回流装置、电热恒温水浴锅、干燥箱等。试药:甲醇(上海赛默飞世尔)为色谱纯,水为上海康雷-HF Super NW超纯水,乙醇、磷酸为分析纯,黄芩苷对照品购于中国药品生物制品检定所,批号为110715-200815。药材:黄芩采自房山区南窖乡,3年生。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件 Waters C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);检测波长280nm;流速:1.0ml/min;柱温:30℃;理论塔板数按黄芩苷峰计算大于2500。
2.2 对照品溶液制备 精密称定黄芩苷对照品12.44mg,加甲醇定容至200ml容量瓶中,即得。
2.3 供试品溶液制备 取药材粉末约0.3g,精密称定。至锥形瓶中,加入70%乙醇40ml,95℃回流3h,放冷,滤过,滤液至100ml容量瓶,用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣,洗液滤至同一量瓶中,用70%乙醇定容,摇匀。精密量取1ml,至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀即得。
2.4 线性关系的考察 对照品溶液,分别设定进样量为3μl、6μl、9μl、12μl、15μl,测定峰面积,每个进样量测定3次。以黄芩苷对照品的进样量(μg)为横坐标X,峰面积积分值Y为纵坐标进行回归,得回归方程Y=3377.3X+0.8,R2=1,线性范围0.1866μg~0.933μg,见附表1。
2.5 稳定性试验 取1供试品溶液,分别在配制后0h、1h、2h、3h、6h、9h、12h、24h测定,平均峰面积依次为1554、1571、1553、1570、1557、1550、1582,RSD为0.722%,表明样品溶液在24h内稳定性良好。
2.6 精密度试验 取1供试品溶液,连续进样5次,记录峰面积依次为1558、1582、1570、1564、1559,RSD为0.643%,理论塔板数为3921。
2.7 加样回收试验
2.7.1 对照品溶液 精密称定黄芩苷对照品8.04mg,置100ml容量瓶中,加甲醇定容,摇匀,精密吸取15ml,置20ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀即得。
2.7.2 供试品溶液 精密称定黄芩药材粉末0.1879g,按2.3制备。
2.7.3 加样 取与2.7.2同一黄芩药材粉末约0.1g精密称定3份,每份加入适量黄芩苷对照品,按2.3制备,每份测定3次,数据结果见附表2。
2.8 含量测定 供试品溶液5份,与对照品溶液进样量均为10μl,以外标面积法计算,含量依次为16.0%,15.6%,16.4%,16.0%,16.2%,RSD为1.85%。
3 讨论
黄芩苷是黄芩的主要有效成分,我区种植黄芩黄芩苷含量达16.0%,高于药典规定。因此将与道地药材黄芩进行比较,为开发其药用价值提供科学依据。