加味皮康颗粒中橙皮苷的含量测定
2014-10-27于玲王晓飞葛海生
于玲 王晓飞 葛海生
【摘要】目的：建立以高效液相色谱法测定加味皮康颗粒中橙皮苷含量的方法。方法：色谱柱：SHISEIDO C18 （4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液（12∶[KG-*2]13∶[KG-*2]75），柱温：35℃，检测波长：284nm，流量：1.0ml/min。结果：橙皮苷进样量在0.06336～2.5344μg/ml范围内线性良好（r=0.9998），平均回收率为98.83%，RSD为1.34%（n=6）。结论：本方法简便快速、准确、可用于加味皮康颗粒的质量控制。
【关键词】高效液相色谱法；加味皮康颗粒；橙皮苷；含量测定
【中图分类号】R284.1【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）19-0013-02
加味皮康颗粒是由牡丹皮、陈皮等多味中草药组成[1]，临床用于玫瑰糠疹、湿疹的治疗，为更好的控制药品质量，确保用药安全，本文采用高效液相色谱（HPLC）测定制剂中橙皮苷的含量，方法简单、准确，可用于本品的质量控制。
1仪器与试药
1.1仪器SHIMADZU LC-2010HTC高效液相色谱仪（二极管阵列紫外检测器）。
1.2试药橙皮苷对照品（批号：110721-201115，中国食品药品检定研究院）；加味皮康颗粒（批号：20130701、20130702、20130703、20130704，武警医院自制）；乙腈、甲醇为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件[2]色谱柱：SHISEIDO C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液（12∶[KG-*2]13∶[KG-*2]75）；柱温：35℃；检测波长：284nm；流量：1.0ml/min；进样量：10μl。理论塔板数按橙皮苷峰计算不低于7000，分离度符合规定。
2.2溶液制备
2.2.1对照品溶液制备精密称取橙皮苷对照品（含量为96.3%）约7.92mg，置于50ml量瓶中，加甲醇适量溶解后，稀释至刻度，摇匀制得贮备液。精密吸取贮备液2ml置5ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液（约每1ml含橙皮苷60μg）。
2.2.2供试品溶液取本品约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20min使溶散，加热回流45min，放冷，再称定重量，加80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
2.2.3阴性对照溶液按处方中各药味的比例和制法项下规定配制缺陈皮的阴性样品，再按“2.2.2”项下方法对样品进行制备，作为阴性样品溶液。
2.3方法专属性试验精密吸取橙皮苷阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液各10μl，分别注入色谱仪，按“2.1”项下色谱条件进行测定，记录图谱，结果阴性对照溶液在与橙皮苷对照品相同保留时间色谱峰处未显色谱峰，因此无干扰。
2.4线性关系考察精密量取橙皮苷对照品溶液（浓度为：61.02μg/ml）各1、5、10、15、20、25、30、35、40μl注入色谱仪中，按“2.1”项下色谱条件测定橙皮苷峰面积（A），作为纵坐标，同时以橙皮苷进样量（μg）为横坐标，得回归方程为Y=11400+1725506X，r=0.9998，橙皮苷进样量在0.06336～2.5344μg/ml范围呈良好的线性关系。
2.5精密度试验精密量取“2.4”中同一橙皮苷对照品溶液（浓度为61.02μg/ml），按“2.1”项下色谱条件重复进样6次，每次10μl，记录橙皮苷峰面积，依法进行计算，结果芍药苷的峰面积RSD为0.12%（n=6）。
2.6稳定性试验将“2.2.2”项下的供试品溶液于室温放置，分别在0、2、4、6、8、10、12h进样10μl，经计算得橙皮苷峰面积RSD为0.80%（n=7），表明供试品溶液在12h内稳定。
2.7重复性试验取同一批号的样品0.5g，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，平行制备6份。依法测定，结果橙皮苷含量的RSD=0.69%（n=6），表明本法重复性良好。
2.8加样回收率试验取已知橙皮苷含量的供试品（批号：20130704，含量为5.1425 mg/g）6份，每份约0.5g，精密称定，分别置于锥形瓶中，精密加入橙皮苷对照品溶液（浓度为2.6913mg/ml）各1ml，再精密加入80%甲醇50ml，按“2.2.2”项下方法制成供试品，分别吸取供试品溶液10μl，注入HPLC仪，依法测定橙皮苷含量，计算加样回收率，结果见表1。
【摘要】目的：建立以高效液相色谱法测定加味皮康颗粒中橙皮苷含量的方法。方法：色谱柱：SHISEIDO C18 （4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液（12∶[KG-*2]13∶[KG-*2]75），柱温：35℃，检测波长：284nm，流量：1.0ml/min。结果：橙皮苷进样量在0.06336～2.5344μg/ml范围内线性良好（r=0.9998），平均回收率为98.83%，RSD为1.34%（n=6）。结论：本方法简便快速、准确、可用于加味皮康颗粒的质量控制。
【关键词】高效液相色谱法；加味皮康颗粒；橙皮苷；含量测定
【中图分类号】R284.1【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）19-0013-02
加味皮康颗粒是由牡丹皮、陈皮等多味中草药组成[1]，临床用于玫瑰糠疹、湿疹的治疗，为更好的控制药品质量，确保用药安全，本文采用高效液相色谱（HPLC）测定制剂中橙皮苷的含量，方法简单、准确，可用于本品的质量控制。
1仪器与试药
1.1仪器SHIMADZU LC-2010HTC高效液相色谱仪（二极管阵列紫外检测器）。
1.2试药橙皮苷对照品（批号：110721-201115，中国食品药品检定研究院）；加味皮康颗粒（批号：20130701、20130702、20130703、20130704，武警医院自制）；乙腈、甲醇为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件[2]色谱柱：SHISEIDO C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液（12∶[KG-*2]13∶[KG-*2]75）；柱温：35℃；检测波长：284nm；流量：1.0ml/min；进样量：10μl。理论塔板数按橙皮苷峰计算不低于7000，分离度符合规定。
2.2溶液制备
2.2.1对照品溶液制备精密称取橙皮苷对照品（含量为96.3%）约7.92mg，置于50ml量瓶中，加甲醇适量溶解后，稀释至刻度，摇匀制得贮备液。精密吸取贮备液2ml置5ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液（约每1ml含橙皮苷60μg）。
2.2.2供试品溶液取本品约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20min使溶散，加热回流45min，放冷，再称定重量，加80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
2.2.3阴性对照溶液按处方中各药味的比例和制法项下规定配制缺陈皮的阴性样品，再按“2.2.2”项下方法对样品进行制备，作为阴性样品溶液。
2.3方法专属性试验精密吸取橙皮苷阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液各10μl，分别注入色谱仪，按“2.1”项下色谱条件进行测定，记录图谱，结果阴性对照溶液在与橙皮苷对照品相同保留时间色谱峰处未显色谱峰，因此无干扰。
2.4线性关系考察精密量取橙皮苷对照品溶液（浓度为：61.02μg/ml）各1、5、10、15、20、25、30、35、40μl注入色谱仪中，按“2.1”项下色谱条件测定橙皮苷峰面积（A），作为纵坐标，同时以橙皮苷进样量（μg）为横坐标，得回归方程为Y=11400+1725506X，r=0.9998，橙皮苷进样量在0.06336～2.5344μg/ml范围呈良好的线性关系。
2.5精密度试验精密量取“2.4”中同一橙皮苷对照品溶液（浓度为61.02μg/ml），按“2.1”项下色谱条件重复进样6次，每次10μl，记录橙皮苷峰面积，依法进行计算，结果芍药苷的峰面积RSD为0.12%（n=6）。
2.6稳定性试验将“2.2.2”项下的供试品溶液于室温放置，分别在0、2、4、6、8、10、12h进样10μl，经计算得橙皮苷峰面积RSD为0.80%（n=7），表明供试品溶液在12h内稳定。
2.7重复性试验取同一批号的样品0.5g，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，平行制备6份。依法测定，结果橙皮苷含量的RSD=0.69%（n=6），表明本法重复性良好。
2.8加样回收率试验取已知橙皮苷含量的供试品（批号：20130704，含量为5.1425 mg/g）6份，每份约0.5g，精密称定，分别置于锥形瓶中，精密加入橙皮苷对照品溶液（浓度为2.6913mg/ml）各1ml，再精密加入80%甲醇50ml，按“2.2.2”项下方法制成供试品，分别吸取供试品溶液10μl，注入HPLC仪，依法测定橙皮苷含量，计算加样回收率，结果见表1。
【摘要】目的：建立以高效液相色谱法测定加味皮康颗粒中橙皮苷含量的方法。方法：色谱柱：SHISEIDO C18 （4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液（12∶[KG-*2]13∶[KG-*2]75），柱温：35℃，检测波长：284nm，流量：1.0ml/min。结果：橙皮苷进样量在0.06336～2.5344μg/ml范围内线性良好（r=0.9998），平均回收率为98.83%，RSD为1.34%（n=6）。结论：本方法简便快速、准确、可用于加味皮康颗粒的质量控制。
【关键词】高效液相色谱法；加味皮康颗粒；橙皮苷；含量测定
【中图分类号】R284.1【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）19-0013-02
加味皮康颗粒是由牡丹皮、陈皮等多味中草药组成[1]，临床用于玫瑰糠疹、湿疹的治疗，为更好的控制药品质量，确保用药安全，本文采用高效液相色谱（HPLC）测定制剂中橙皮苷的含量，方法简单、准确，可用于本品的质量控制。
1仪器与试药
1.1仪器SHIMADZU LC-2010HTC高效液相色谱仪（二极管阵列紫外检测器）。
1.2试药橙皮苷对照品（批号：110721-201115，中国食品药品检定研究院）；加味皮康颗粒（批号：20130701、20130702、20130703、20130704，武警医院自制）；乙腈、甲醇为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件[2]色谱柱：SHISEIDO C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液（12∶[KG-*2]13∶[KG-*2]75）；柱温：35℃；检测波长：284nm；流量：1.0ml/min；进样量：10μl。理论塔板数按橙皮苷峰计算不低于7000，分离度符合规定。
2.2溶液制备
2.2.1对照品溶液制备精密称取橙皮苷对照品（含量为96.3%）约7.92mg，置于50ml量瓶中，加甲醇适量溶解后，稀释至刻度，摇匀制得贮备液。精密吸取贮备液2ml置5ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液（约每1ml含橙皮苷60μg）。
2.2.2供试品溶液取本品约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20min使溶散，加热回流45min，放冷，再称定重量，加80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
2.2.3阴性对照溶液按处方中各药味的比例和制法项下规定配制缺陈皮的阴性样品，再按“2.2.2”项下方法对样品进行制备，作为阴性样品溶液。
2.3方法专属性试验精密吸取橙皮苷阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液各10μl，分别注入色谱仪，按“2.1”项下色谱条件进行测定，记录图谱，结果阴性对照溶液在与橙皮苷对照品相同保留时间色谱峰处未显色谱峰，因此无干扰。
2.4线性关系考察精密量取橙皮苷对照品溶液（浓度为：61.02μg/ml）各1、5、10、15、20、25、30、35、40μl注入色谱仪中，按“2.1”项下色谱条件测定橙皮苷峰面积（A），作为纵坐标，同时以橙皮苷进样量（μg）为横坐标，得回归方程为Y=11400+1725506X，r=0.9998，橙皮苷进样量在0.06336～2.5344μg/ml范围呈良好的线性关系。
2.5精密度试验精密量取“2.4”中同一橙皮苷对照品溶液（浓度为61.02μg/ml），按“2.1”项下色谱条件重复进样6次，每次10μl，记录橙皮苷峰面积，依法进行计算，结果芍药苷的峰面积RSD为0.12%（n=6）。
2.6稳定性试验将“2.2.2”项下的供试品溶液于室温放置，分别在0、2、4、6、8、10、12h进样10μl，经计算得橙皮苷峰面积RSD为0.80%（n=7），表明供试品溶液在12h内稳定。
2.7重复性试验取同一批号的样品0.5g，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，平行制备6份。依法测定，结果橙皮苷含量的RSD=0.69%（n=6），表明本法重复性良好。
2.8加样回收率试验取已知橙皮苷含量的供试品（批号：20130704，含量为5.1425 mg/g）6份，每份约0.5g，精密称定，分别置于锥形瓶中，精密加入橙皮苷对照品溶液（浓度为2.6913mg/ml）各1ml，再精密加入80%甲醇50ml，按“2.2.2”项下方法制成供试品，分别吸取供试品溶液10μl，注入HPLC仪，依法测定橙皮苷含量，计算加样回收率，结果见表1。
