建立“二肾一夹”肾性高血压大鼠(2K1C-RHR)模型的体会

陈俊毅 周平安 张智锋 王楠楠 陈翱 郑嘉琪

作者简介：陈俊毅（1993—），男，汉族，湖南永州人，2011级临床医学本科在校生，【摘要】目的：探讨建立“二肾一夹”肾性高血压大鼠（2K1C-RHR）模型制作过程中的经验体会与技巧。方法：采用银夹夹闭一侧肾动脉造成其狭窄，导致该侧肾脏缺血，另一侧肾脏不触及，其血压升高主要原因是肾脏缺血而造成肾素增多，肾素—血管紧张素系统激活所致。结论：“二肾一夹”高血压模型具有造模较为便捷有效，成功率高，同一性强等优点，与人类高血压病理过程具有可比性。掌握注意事项及其相关技巧有助于高血压相关实验研究进一步更好的开展。

【关键词】二肾一夹；高血压；模型；大鼠

【中图分类号】R722.12 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2014)07-0030-01

基金项目：长沙医学院2014年校级大学生研究性学习和创新性验计划项目，长医教〔2014〕10号-91号；2014年湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目，湘教通〔2014〕248号-537号；

高血压为我国最常见的心血管疾病, 不仅发病因素复杂众多, 且常有诸多并发症,为了更好的研究高血压的发病机制, 阐明各种药物的作用机理, 并且开发出更多有效的药物, 众多医学工作者成功的建立了多种高血压的动物模型,，这对人类高血压病的发病机制、并发症的发生发展规律及防治措施起了重要的作用［1］。所建立的高血压大鼠模型亦可分为二大类：自发性高血压和继发性大鼠模型，其中又以“二肾一夹”法较为经典、应用较为广泛。本文即阐述了“二肾一夹”肾性高血压大鼠（2K1C-RHR）模型建立过程中的些体会感悟。

1.器材

乙醚,七氟醚，蒸馏水，75%酒精，碘酒，青霉素G，不锈钢U型夹，大鼠固定器，BP-6动物无创血压测量仪

2.方法

2.1手术过程

取体重在180~220g的健康雄性SD大鼠，术前12h禁食不禁水，在七氟醚诱导、乙醚麻醉下，仰卧位固定手术台上，头部及四肢固定，充分暴露腹部，棉花纱布及手术器械经煮沸消毒。于大鼠左侧腹部肾脏位置备皮减去毛发，先后用碘酒及75%酒精消毒皮肤，行纵向切口，长2.5~3cm，用止血钳钝性分离暴露肾脏，在靠近腹主动脉端用沙氏镊分离出肾动脉（其标志为牵拉肾动脉肾脏会缺血颜色变白，肾脏皱缩)，用浸有生理盐水纱布包住肾脏，用玻璃分针小心分离动脉，用一不锈钢U型夹（内径0.2mm，厚0.5mm）环绕左肾动脉，夹紧，造成左肾动脉狭窄，右肾不触及，复位肾脏，检查有无完全缺血。关闭切口，依次缝合肌肉和皮肤，用碘酒棉球消毒并用消毒纱布进行包扎。

2.2术后处理

术后给予相应保温措施，手术灯35cm照射未苏醒麻醉大鼠30min以上，术后腹腔注射青霉素2~3万单位/只，此后连续三天每天一次，以避免感染。手术后动物以1%盐水饲喂，持续三周，再以0.5%盐水饲喂约一周缓冲后停喂盐水，术后禁食12h后正常饲养。

2.3 相关指标测量

术后3~5天即可测量大鼠尾动脉收缩压，每周测量二次，每次测压三次，取其平均值，≥160mmHg（21.28KPa）者可认为是确定为两肾一夾高血压大鼠(2KIC—RHR)模型成功，否则为造模淘汰。

3.讨论与体会

关于“二肾一夹”（2K1C-RHR）肾性高血压大鼠模型的几个值得注意的细节，直接关系到模型建造成功与否。

3.1 手术需严格消毒，否则易造成动物感染和死亡

3.2 该模型不是很稳定，维持时间周期不是很长，血压测量有一定波动［2］

3.3.在分离肾动脉操作过程中应注意避免、保护其分支，如仅造成肾动脉分支狭窄则不能形成预期高血压模型效果

3.4一般采用成年大鼠，因为幼年大鼠生长相对较为迅速，肾脏对血液需要量增加过快，容易导致肾动脉狭窄后肾坏死［3］，且幼年动物自身动脉就细，血压不容易升高上去达不到预期效果

3.5手术操作要求较高，手术时分离肾动脉要靠近主动脉端，不然会有分支、撕裂等情况导致造模失败。

3.7“二肾一夹”高血压大鼠模型造模采用乙醚吸入麻醉方法，可能出现并发症，麻醉过深、呼吸暂停。抢救方法：给行人工呼吸，左手扶大鼠头部使其后仰，左手拇指压住大鼠左鼻孔，右手用洗耳球或20ml注射器给另一侧鼻孔进行通气处理。

3.8肾动脉的狭窄程度要引起相应重视。在一定范围内，肾动脉的狭窄水平与动物血压升高速率和程度成正比例关系。但如果肾动脉狭窄不够，则动物不能形成高血压；如果肾动脉狭窄过度，则引起肾坏死，亦可导致严重肾功能不全造成动物死亡。故夾闭动脉时的程度不好把控。现在有诸多改良的方法多但大都不稳定，比如腹主动脉结扎，一肾一夾，双肾双夾，，要加用参附汤或糖皮质激素等，在手术后饮食上也要给予盐水和高脂。

参考文献

［1］ 王东,蒋湘莲,聂亚雄等.高血压大鼠模型的研究进展［J］.中国动脉硬化杂志,2006,14(3):271-273,276.

［2］苏定冯. 血压波动性在高血压药物治疗中的意义［J］. 世界临床药物,2005,10:21-23+26.

［3］ 刘守钾.毛茛总苷对大鼠肾性高血压的影响及有效部位研究［D］.广东药学院,2011.DOI:10.7666/d.d155228.