香附化学成分的研究

罗淑文，邓远辉，黎 雄，邓金宝

(1.广州中医药大学，广州510407;2.广东省中医药科学院，广州510006)

香附是莎草科植物莎草(Cyperus rotundus L.)的干燥根茎，具有行气解郁，调经止痛的功效.根据现代药理研究表明，香附具有解热镇痛、抑制子宫收缩、抑制肠管收缩、雌激素样作用，此外还有抗炎、抗病原微生物、强心、减慢心率等多种药理活性.其主要成分为挥发油，此外还有糖类、黄酮类、三萜类化合物、生物碱、蒽醌等［1-3］.为了更全面地了解其物质基础，从而进一步合理的开发利用这一中药资源，我们开展了如下研究.

1 仪器与材料

1.1 仪器

Microfuge16台微量离心机(美国BACKMAN COULTER公司);BÜCHI C-660全自动馏分收器(瑞士 BÜCHI公司);Waters 2695HPLC(Waters 2998 PDA检测器，美国 Waters公司);Brucker ARX-500M超导核磁共振仪(TMS内标，瑞士Bruck公司)，Thermo LTQ Orbitrap液质联用质谱仪.

1.2 材料

香附(批号:100404791)，康美药业股份有限公司，已根据2005《中华人民共和国版药典》一部的相关内容鉴定为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根茎;硅胶GF254(青岛海洋化工厂分厂)，硅胶柱色谱 (100～200目，青岛海洋化工)，SephadexLH-20(美国Sigma公司);石油醚、二氯甲烷、冰醋酸、乙醇均为分析纯.

2 提取与分离

取药材粗粉，加95%乙醇回流提取3次，每次2 h，回收溶剂得浸膏.取浸膏加水混悬溶，分别用石油醚、二氯甲烷萃取，萃取液回收，得石油醚萃取浸膏、二氯甲烷萃取浸膏.

石油醚萃取层以硅胶柱色谱分离，采用中低压柱色谱分离，石油醚:乙酸乙酯(100∶0→01)梯度洗脱，每550 mL收集1份，共收集洗脱液131份.经TLC检识，10%的硫酸乙醇溶液显色后，将相同的馏分11-21合并.再经反复硅胶分离纯化得化合物1和化合物2.

二氯甲烷层萃取层以硅胶柱色谱分离，采用中低压柱色谱分离，石油醚∶乙酸乙酯(100∶1→0∶1)梯度洗脱，约500 mL为一馏分，每个比例收集两个柱体积.TLC分析后，将Fr.16-17合并.经Sephadex LH-20以二氯甲烷:甲醇(1∶1)分离后的液16-17-6经比较，为化合物2.合并液18～21经Sephadex LH-20用二氯甲烷∶甲醇(1∶1)洗脱后，再经薄层制备板制备，得2个化合物，经鉴定，与从石油醚中分离得到的化合物相同.将合并液117～120经凝胶Sephadex LH-20以二氯甲烷∶甲醇(1∶1)洗脱，再经薄层制备板制备得到化合物3.

3 鉴定

化合物1:黄色油状物，ESI-MS m/z 217［M-H］-，易溶于乙酸乙酯、二氯甲烷、石油醚，相对分子质量218，分子式为C15H22O.

化合物2:黄色油状物，易溶于石油醚、二氯甲烷.

化合物3:黄色油状物，UV(MeOH)242 nm.

以上数据经HSQC、HMBC等二维谱归属(见表1)，并与参考文献［3］报道的oxyphyllenone B核磁数据比较，基本一致(见图1)，只是碳谱中4，5位烯键，6位，7位手性碳化学位移相差较大(见图2)，故推测化合物3应当为oxyphyllenone B的构型异构体，为未见文献报道的新化合物，命名为oxyphyllenones C，但由于实验条件及样品量限制，没有对其6，7位手性中心绝对构型进行确认，只是确定了该化合物平面结构.

表1 化合物3的核磁数据

图1 化合物1－3的结构

4 讨论

香附中较多的挥发性化学成分，这些成分与其体内解热、镇痛、抗炎药效相关.因此，对香附中含量较多的挥发油进行系统化学成分研究具有重要意义.

图2 化合物3与oxyphyllenone B碳谱数据

本研究采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、薄层制备等分离技术，对山东产的香附95%乙醇提取物低极性部位化学成分进行了系统研究，共分离鉴定了3个成分，其中化合物3，我们通过SciFinder数据库检索，未见有文献报道，是一种新化合物，但其手性碳构型的确认及其生理活性仍有待进一步的研究.

［1］HAAKSMA A A，JANSEN B JM，GROAT A.Lewis Acid catalyzed Diels－Alder Reactions of S－(+)－Carvone with Silyloxy Dienes.Total Synthesis of(+)－ a－ Cyperone［J］.Temhedron，1992，48(15):3121－3130.

［2］XU Y，ZHANG H W，WAN X C，etal.Complete assignments of1H and13CNMR data for two new sesquiterpenes from Cyperus rotundus L［J］.Magn.Reson.Chem.，2009，47:527 －531.

［3］OSAMU M，MANABU F，GENZOH T，etal.Absolute stereostructures of novel norcadinane－ and Ttrinoreudesmane－type sesquiterpenes with nitric oxide production inhibitory activity from Alpinia oxyphylla［J］.Bioorg.Med.Chem.Lett.，2001，11:2217–2220.