2012－2013年淮南市某院手足口病实验室检测结果分析

余国庆，朱学龙

手足口病主要由肠道病毒71(EV71)型及科萨奇病毒A16(CoxA16)型引起的，多发生在3岁以下学龄前儿童，是我国法定报告的丙类传染病。患者和隐性感染者均为传染源，主要通过消化道、呼吸道和密切接触等途径传播。现对我院随机送检手足口病患儿咽拭子病毒检测结果进行分析，并比较EV71和CoxA16 2组患儿心肌酶、hs-CRP、Glu WBC计数检测及免疫球蛋白差异，以探讨心肌酶、hs-CRP及WBC在手足口病的诊断中的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 资料 2012年8月-2013年6月我院抽样送检91例手足口病患儿实验室检测结果。49例EV71手足口病患儿中男39例，女10例，平均年龄(1.77±1.06)岁。15例 CoxA16手足口病患儿中男13例，女2例，平均年龄(1.88±1.38)岁。所有病例均符合卫生部制定的《手足口病诊疗指南(2009年版)》诊断标准。

1.2 方法 所有病例采集咽拭子送淮南市疾病控制中心进行肠道病毒检测，并均于清晨空腹抽取静脉血，EDTA-K2抗凝试管2 ml及普通生化试管3 ml。采用罗氏LC480实时荧光PCR进行人肠道病毒特异性核酸检测;采用Sysmex XT-4000i全自动血细胞分析仪及配套试剂检测WBC;采用用西门子ADVIA 1800全自动生化分析仪进行hs-CRP、GLU、免疫球蛋白浓度和心肌酶检测，心肌酶包括天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)。hs-CRP、GLU、心肌酶谱试剂由Diasys公司提供;免疫球蛋白试剂由北京利德曼公司提供。

1.3 统计学方法 采用SPSS16.0统计软件，实验结果数据表示为±s，2组之间比较采用t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HFMD病毒核酸检测结果 应用实时荧光PCR的方法对91例HFMD患者的咽拭子进行了肠道病毒的核酸检测，结果显示:10例手足口病患儿标本检测结果阴性，阴性率为10.99%，EV阳性率 89.01%(81/91)，其中 EV71阳性率53.85%(49/91)、CoxA16 阳性率 16.48%(15/91)、其他肠道病毒阳性率21.98%(20/91)。结果见表1。

表1 2012.8～2013.6送检HFMD病毒核酸检测结果

2.2 EV71组与CoxA16组实验室指标结果比较 EV71组与CoxA16组两组病例发病年龄、血糖、心肌酶谱(除肌酸激酶)、IgA、IgG及中性粒细胞比例和淋巴细胞比例差异无统计学意义(P＞0.05);肌酸激酶、WBC、hs-CRP及IgM差异有统计学意义(P ＜0.05)，见表2。

2.3 EV71组与CoxA16组WBC计数、hs-CRP阳性数比较以WBC计数大于10×109/L、hs-CRP大于5 mg/dl为阳性，比较EV71组与 CoxA16组 WBC计数、hs-CRP阳性数，结果EV71组 WBC计数、hs-CRP阳性数均高于 CoxA16组，且EV71组WBC计数阳性率显著高于CoxA16组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

3 讨论

手足口病可由20多种病毒引起，常见病毒是EV71和CoxA16，近年来EV71的流行呈上升趋势。本研究中采集的淮南市潘集区91例病例检出病毒81例(89.01%)，其中EV71阳性49例(53.85%)、CoxA16阳性15 例(16.48%)，其他肠道病毒共20例(21.98%)，证实本地区手足口病流行的主要病原体是EV71，而COXA16相对较少。安徽太和县及其邻近县的手足口病流行的主要病原体也是EV71，如本文报道结果相似[1]。而其他地区报道结果不尽相同，据报道上海市2009年以CoxAl6病毒占优势(52.3%)，2010年两种病毒感染病例数基本持平，2011年以EV71病毒占优势(41.2%)，手足口病的优势病原体交替出现[2]。江苏省2008至2010年普通手足口病例以EV71和CoxA16共同主导流行[3]。由此可以看出，引起手足口病优势病毒在不同地方不同年份不尽相同。

表2 2组患儿实验室指标结果比较(±s)

表2 2组患儿实验室指标结果比较(±s)

组别 n AST(U/L) CK(U/L) CK-MB(U/L) HBDH(U/L) LDH(U/L) GLU(mmol/L)6 292.3 ±61.6 4.64 ±0.73 CoxA16 组 15 34.2 ±16.9 82.5 ±39.4 28.2 ±10.1 223.8 ±28.1 267.7 ±37.8 4.55 ±0.53 t值EV71 组 49 32.1 ±12.7 126.5 ±88.5 33.1 ±12.8 237.3 ±39.0.512 －2.717 －1.358 －1.223 －1.951 －0.522 P 值 － 0.61 0.009 0.18 0.226 0.058 0.605组别 n hs-CRP(mg/dl)WBC(×109/L) N(%) L(%) IgA(g/L) IgG(g/L) IgM(g/L)－22 1.07 ±0.58 9.82 ±2.73 1.24 ±0.39 CoxA16 组 15 4.39 ±3.53 7.87 ±1.94 42.08 ±15.8 47.73 ±13.25 1.06 ±0.57 9.32 ±1.54 0.98 ±0.36 t值 － －2.37 －2.464 0.334 0.493 －0.091 －0.888 －2.342 EV71 组 49 7.33 ±5.88 9.88 ±2.95 40.58 ±14.9 49.65 ±13.P值 － 0.023 0.017 0.749 0.624 0.928 0.38 0.028

表3 2组患儿hs-CRP及WBC计数阳性数比较(n，%)

有研究认为，EV71与CoxA16所致手足口病在临床症状上难以区别，但EV71感染易伴发无菌性脑膜炎、脑炎和神经源性肺水肿等，提示EV71感染比其他肠道病毒感染更严重，危害性更大[3]。嵇红等也报道手足口病重症病例和死亡病例以EV71为流行优势株[4]。目前有文献报道，手足口病能引起患儿心肌酶谱、外周血WBC及CRP的改变[5]。但少有报道EV71和CoxA16两种病毒引起的手足口病，以上实验室指标是否有差异。本研究发现实验室检查方面，EV71感染的患儿外周血WBC计数及其阳性率要高于CoxAl6感染的患儿，且有统计学意义(P＜0.05);而中性粒细胞比例和淋巴细胞比例，两组无显著性差异。EV71组患儿CK水平要显著高于CoxAl6组患儿，而两组患儿其他心肌酶谱指标 (AST、LDH、CK-MB、LDH、α-HBDH)差异无统计学意义。HFMD可致hs－CRP迅速持续升高，且与患儿病情轻重有关，hs－CRP可作为诊断和评判患者病情的有效指标[6]，本研究结果显示EV71组患儿hs-CRP显著高于CoxAl6组患儿，其结果与白细胞升高水平一致，但两者hs-CRP阳性率差异无统计学意义。从实验室结果分析可知EV71所致手足口病，病情更严重，应密切关注实验室指标变化。

机体抗病毒分为细胞免疫和体液免疫，其中体液免疫起着重要作用，IgG是病毒感染时重要的保护性抗体，在机体免疫防护中起主要作用，有中和病毒，调理吞噬细胞的吞噬作用，属于持久性免疫[7]。IgA是黏膜局部抗感染的主要免疫抗体，能结合抗原、中和病毒及其毒素 ;在体液免疫反应早期阶段产生的主要免疫球蛋白是IgM，具有中和病毒的作用[8]。有报道，EV71感染的手足口病患儿的体液免疫应答存在异常，IgM水平明显升高[9]。本研究免疫球蛋白检测结果显示，EV71组患儿血清IgM浓度显著高于CoxAl6组患儿，有统计学意义(P ＜0.05)，而IgG、IgA 无显著性差异，可能和 EV71、Cox-Al6两种病毒感染后机体的早期免疫应答反应强度不同，EV71组产生的IgM抗体较多，炎症反应较为严重有关。

综上所述，了解手足口病的病原对掌握EV71、CoxAl6的流行情况十分必要，有助于EV71感染的预防控制、早期治疗、重症病例的筛查。检测血清心肌酶、hs-CRP浓度、WBC计数及免疫球蛋白等实验室指标也有助于临床医生判断患儿病情轻重，从而治疗上采取更为积极的措施。

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