两款农药残留速测仪应用分析

冯向阳

摘 要：达元DY-5000和托普NY-16D两款酶抑制率法—比色法农残速测仪用于农产品蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测，具有检测灵敏度高、重现性较好、检测速度快和成本低等优势。通过对比、研究两款仪器在工作原理、操作步骤和检测结果判定上的不同之处，使其能更好地服务于农产品质量安全检测工作。

关键词：酶抑制率法；达元DY-5000；托普NY-16D；农药残留检测仪

中图分类号：S481.8 文献标识码：A 文章编号：2095-6835（2014）15-0062-02

蔬菜、水果中残留的农药会危害食用者的身体健康，确保人民群众舌尖上的安全是政府食品质量安全监管的重要职责。蔬菜水果农药残留检测仪适用于各级食品安全监测部门、蔬菜生产基地、蔬菜批发市场和食品超市的蔬菜、水果农药残留检测，通过农药残留检测仪对农药残留含量进行科学的检测，并根据数据判断蔬菜的农药残留量是否超标，是当前确保食品安全的重要环节。近年来，基于酶抑制率法—比色法的原理，开发了适用于蔬菜、水果农药残留检测的仪器，具有快速、简便、灵敏和成本低等优点，深受广大基层监督部门、生产基地和市场的欢迎。我市在农产品质量安全监管检测中，配备了达元DY-5000和托普NY-16D两款农药残留速测仪，经过一段时间的使用后，对这两款仪器的性能有了更好的了解和撑握，现将两款仪器的使用事项与大家讨论分享，以便更好地服务于检测工作。

现阶段，蔬菜水果农药残留主要是有机磷和氨基甲酸酯类农药超标，而对人体造成危害的是农药残留的总量。农药残毒速测法正适应了以上两个特点，可以快速检测上述两类农药严重超标的蔬菜、水果，防止因食用引起的急性中毒；同时，还具有短时间内检测大量样本、检测成本低、对检测人员技术水平要求低、易于在基层推广等特点，是现阶段我国控制高毒农药残留的一种有效方法。

酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对部分农药残留进行快速检测的技术，我国已将其列入国家标准《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》（GB/T 5009.199—2003）中，并作为快速检测农产品中农药残留的方法。光电比色法是用光电比色计测量溶液的吸光度，根据待测组分溶液吸光度的变化和空白溶液吸光度的变化计算浓度，具有较高准确度，是一种非常经典的分析方法。

1 酶抑制率—比色法农残速测的工作原理

有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶或丁酰胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常条件下，乙酰胆碱酯酶（AchE）或丁酰胆碱酯酶（BuChE）能催化神经传导代谢产物类似物——碘化硫代乙酰胆碱（ATCI）或碘化硫代丁酰胆碱（BTCI）水解，水解产物与显色剂二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）发生反应，产生黄色物质，用农残测试仪在410 nm波长比色法测定固定时间内空白对照溶液和样品溶液的吸光度的变化值（△A），计算酶抑制率，可以判断出样品中有机磷或氨基甲酸酯类中农药的残留剂量。

2 两款仪器的共同点

2.1 仪器特点

两款仪器都是由光学、机械、电子软件等部分组成，可以同时检测多个样品，自动检测、记录、计算和显示最终抑制率和浓度值；内置样品测试数据库可连接电脑进行测试、分析、汇总；置热敏打印，方便快捷；中文菜单操作人机对话界面便于输入操作，步骤简单、明了。

2.2 试剂开放，无特定限制

试剂可以选用仪器厂家的商品化小包装专供试剂。

试剂的储存和使用要求有：①缓冲剂。粉状物常温存放，蒸馏水溶解制成pH 8.0提取液。②显色剂。5，5二硫代双（2-硝基苯甲酸）和碳酸氢钠以一定比例混合，用缓冲液溶解，在0～4 ℃的环境下保存期较长。③底物。碘化硫代乙酰胆碱，粉状在0～4 ℃的环境下保存期在半年以上，加蒸馏水溶解在0～4 ℃的环境下保存期为7 d。④酶。粉状的胆碱酯酶冷冻储存，溶解后应储存在0～4 ℃的环境下冷藏，一周内用完。

2.3 计算公式

采用两点法检测，相比于终点法，两点法可以检出本身带有较深颜色的农产品，受干扰程度较小。检测时通过测定固定时间段对照和样品溶液吸光度变化计算抑制率，公式如下：

抑制率=（△A对照-△A样品）/ △A对照×100%. （1）

检测结果不会出现负值，但需要注意审核0抑制率数据。

3 两款仪器的不同点

3.1 试剂用量方面

DY-5000仪器取2 g蔬果样品+20 mL缓冲液进行浸提；样液比率为1︰10；测试时，180 uL缓冲液（检测样品时则为浸提液）+10 uL酶液+10 uL显色剂，静置10 min+10 uL底物，立即测试；反应物浓度，例如以显色剂计算，为10 uL/210 uL。

NY-16D仪器取2 g蔬果样品+10 mL缓冲液进行浸提；样液比率为1︰5；测试时，2.5 mL缓冲液（检测样品时则为浸提液）+100 uL酶液+100 uL显色剂，静置15 min+100 uL底物，立即测试；反应物浓度，以显色剂计算，为100 uL/2 800 uL。

3.2 测试反应时间不同

DY-5000仪器的标准反应测试时间为60 s，而NY-16D仪器的标准反应测试时间180 s。则在公式（1）中：△A对照表示对照溶液反应60 s/180 s的吸光度变化值；△A样品表示样品溶液反应60 s/180 s的吸光度变化值；

3.3 空白吸光值作用不同

DY-5000仪器的空白吸光值△A在0.4～0.8之间，且必须>0.4.每进一批次样品都需要同时做双孔空白检测，并作为本批次样品的参照标准。这样能够较好地克服仪器工作点漂移的影响。

NY-16D仪器的空白吸光值△A在0.3以上，即采用国标标准。必须先单独进行空白检测，作为不同批次样品的空白参考值参与计算；也可随时根据仪器状况进行空白测试，作为下批次空白值参与计算。这样可以在保证空白检测值准确的情况下进行样品检测，一般不会使批次样品检测数据作废。

3.4 样品重复检测方式不同

DY-5000仪器可默认双孔检测，自动设立重复，并计算平均值，能通过平行测定的结果一致性比对判断两次结果的可信度。

NY-16D仪器的单孔检测需要手动设立重复和计算平均值。

摘 要：达元DY-5000和托普NY-16D两款酶抑制率法—比色法农残速测仪用于农产品蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测，具有检测灵敏度高、重现性较好、检测速度快和成本低等优势。通过对比、研究两款仪器在工作原理、操作步骤和检测结果判定上的不同之处，使其能更好地服务于农产品质量安全检测工作。

关键词：酶抑制率法；达元DY-5000；托普NY-16D；农药残留检测仪

中图分类号：S481.8 文献标识码：A 文章编号：2095-6835（2014）15-0062-02

蔬菜、水果中残留的农药会危害食用者的身体健康，确保人民群众舌尖上的安全是政府食品质量安全监管的重要职责。蔬菜水果农药残留检测仪适用于各级食品安全监测部门、蔬菜生产基地、蔬菜批发市场和食品超市的蔬菜、水果农药残留检测，通过农药残留检测仪对农药残留含量进行科学的检测，并根据数据判断蔬菜的农药残留量是否超标，是当前确保食品安全的重要环节。近年来，基于酶抑制率法—比色法的原理，开发了适用于蔬菜、水果农药残留检测的仪器，具有快速、简便、灵敏和成本低等优点，深受广大基层监督部门、生产基地和市场的欢迎。我市在农产品质量安全监管检测中，配备了达元DY-5000和托普NY-16D两款农药残留速测仪，经过一段时间的使用后，对这两款仪器的性能有了更好的了解和撑握，现将两款仪器的使用事项与大家讨论分享，以便更好地服务于检测工作。

现阶段，蔬菜水果农药残留主要是有机磷和氨基甲酸酯类农药超标，而对人体造成危害的是农药残留的总量。农药残毒速测法正适应了以上两个特点，可以快速检测上述两类农药严重超标的蔬菜、水果，防止因食用引起的急性中毒；同时，还具有短时间内检测大量样本、检测成本低、对检测人员技术水平要求低、易于在基层推广等特点，是现阶段我国控制高毒农药残留的一种有效方法。

酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对部分农药残留进行快速检测的技术，我国已将其列入国家标准《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》（GB/T 5009.199—2003）中，并作为快速检测农产品中农药残留的方法。光电比色法是用光电比色计测量溶液的吸光度，根据待测组分溶液吸光度的变化和空白溶液吸光度的变化计算浓度，具有较高准确度，是一种非常经典的分析方法。

1 酶抑制率—比色法农残速测的工作原理

有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶或丁酰胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常条件下，乙酰胆碱酯酶（AchE）或丁酰胆碱酯酶（BuChE）能催化神经传导代谢产物类似物——碘化硫代乙酰胆碱（ATCI）或碘化硫代丁酰胆碱（BTCI）水解，水解产物与显色剂二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）发生反应，产生黄色物质，用农残测试仪在410 nm波长比色法测定固定时间内空白对照溶液和样品溶液的吸光度的变化值（△A），计算酶抑制率，可以判断出样品中有机磷或氨基甲酸酯类中农药的残留剂量。

2 两款仪器的共同点

2.1 仪器特点

两款仪器都是由光学、机械、电子软件等部分组成，可以同时检测多个样品，自动检测、记录、计算和显示最终抑制率和浓度值；内置样品测试数据库可连接电脑进行测试、分析、汇总；置热敏打印，方便快捷；中文菜单操作人机对话界面便于输入操作，步骤简单、明了。

2.2 试剂开放，无特定限制

试剂可以选用仪器厂家的商品化小包装专供试剂。

试剂的储存和使用要求有：①缓冲剂。粉状物常温存放，蒸馏水溶解制成pH 8.0提取液。②显色剂。5，5二硫代双（2-硝基苯甲酸）和碳酸氢钠以一定比例混合，用缓冲液溶解，在0～4 ℃的环境下保存期较长。③底物。碘化硫代乙酰胆碱，粉状在0～4 ℃的环境下保存期在半年以上，加蒸馏水溶解在0～4 ℃的环境下保存期为7 d。④酶。粉状的胆碱酯酶冷冻储存，溶解后应储存在0～4 ℃的环境下冷藏，一周内用完。

2.3 计算公式

采用两点法检测，相比于终点法，两点法可以检出本身带有较深颜色的农产品，受干扰程度较小。检测时通过测定固定时间段对照和样品溶液吸光度变化计算抑制率，公式如下：

抑制率=（△A对照-△A样品）/ △A对照×100%. （1）

检测结果不会出现负值，但需要注意审核0抑制率数据。

3 两款仪器的不同点

3.1 试剂用量方面

DY-5000仪器取2 g蔬果样品+20 mL缓冲液进行浸提；样液比率为1︰10；测试时，180 uL缓冲液（检测样品时则为浸提液）+10 uL酶液+10 uL显色剂，静置10 min+10 uL底物，立即测试；反应物浓度，例如以显色剂计算，为10 uL/210 uL。

NY-16D仪器取2 g蔬果样品+10 mL缓冲液进行浸提；样液比率为1︰5；测试时，2.5 mL缓冲液（检测样品时则为浸提液）+100 uL酶液+100 uL显色剂，静置15 min+100 uL底物，立即测试；反应物浓度，以显色剂计算，为100 uL/2 800 uL。

3.2 测试反应时间不同

DY-5000仪器的标准反应测试时间为60 s，而NY-16D仪器的标准反应测试时间180 s。则在公式（1）中：△A对照表示对照溶液反应60 s/180 s的吸光度变化值；△A样品表示样品溶液反应60 s/180 s的吸光度变化值；

3.3 空白吸光值作用不同

DY-5000仪器的空白吸光值△A在0.4～0.8之间，且必须>0.4.每进一批次样品都需要同时做双孔空白检测，并作为本批次样品的参照标准。这样能够较好地克服仪器工作点漂移的影响。

NY-16D仪器的空白吸光值△A在0.3以上，即采用国标标准。必须先单独进行空白检测，作为不同批次样品的空白参考值参与计算；也可随时根据仪器状况进行空白测试，作为下批次空白值参与计算。这样可以在保证空白检测值准确的情况下进行样品检测，一般不会使批次样品检测数据作废。

3.4 样品重复检测方式不同

DY-5000仪器可默认双孔检测，自动设立重复，并计算平均值，能通过平行测定的结果一致性比对判断两次结果的可信度。

NY-16D仪器的单孔检测需要手动设立重复和计算平均值。

摘 要：达元DY-5000和托普NY-16D两款酶抑制率法—比色法农残速测仪用于农产品蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的检测，具有检测灵敏度高、重现性较好、检测速度快和成本低等优势。通过对比、研究两款仪器在工作原理、操作步骤和检测结果判定上的不同之处，使其能更好地服务于农产品质量安全检测工作。

关键词：酶抑制率法；达元DY-5000；托普NY-16D；农药残留检测仪

中图分类号：S481.8 文献标识码：A 文章编号：2095-6835（2014）15-0062-02

蔬菜、水果中残留的农药会危害食用者的身体健康，确保人民群众舌尖上的安全是政府食品质量安全监管的重要职责。蔬菜水果农药残留检测仪适用于各级食品安全监测部门、蔬菜生产基地、蔬菜批发市场和食品超市的蔬菜、水果农药残留检测，通过农药残留检测仪对农药残留含量进行科学的检测，并根据数据判断蔬菜的农药残留量是否超标，是当前确保食品安全的重要环节。近年来，基于酶抑制率法—比色法的原理，开发了适用于蔬菜、水果农药残留检测的仪器，具有快速、简便、灵敏和成本低等优点，深受广大基层监督部门、生产基地和市场的欢迎。我市在农产品质量安全监管检测中，配备了达元DY-5000和托普NY-16D两款农药残留速测仪，经过一段时间的使用后，对这两款仪器的性能有了更好的了解和撑握，现将两款仪器的使用事项与大家讨论分享，以便更好地服务于检测工作。

现阶段，蔬菜水果农药残留主要是有机磷和氨基甲酸酯类农药超标，而对人体造成危害的是农药残留的总量。农药残毒速测法正适应了以上两个特点，可以快速检测上述两类农药严重超标的蔬菜、水果，防止因食用引起的急性中毒；同时，还具有短时间内检测大量样本、检测成本低、对检测人员技术水平要求低、易于在基层推广等特点，是现阶段我国控制高毒农药残留的一种有效方法。

酶抑制法是研究最多且相对成熟的一种对部分农药残留进行快速检测的技术，我国已将其列入国家标准《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》（GB/T 5009.199—2003）中，并作为快速检测农产品中农药残留的方法。光电比色法是用光电比色计测量溶液的吸光度，根据待测组分溶液吸光度的变化和空白溶液吸光度的变化计算浓度，具有较高准确度，是一种非常经典的分析方法。

1 酶抑制率—比色法农残速测的工作原理

有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶或丁酰胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常条件下，乙酰胆碱酯酶（AchE）或丁酰胆碱酯酶（BuChE）能催化神经传导代谢产物类似物——碘化硫代乙酰胆碱（ATCI）或碘化硫代丁酰胆碱（BTCI）水解，水解产物与显色剂二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）发生反应，产生黄色物质，用农残测试仪在410 nm波长比色法测定固定时间内空白对照溶液和样品溶液的吸光度的变化值（△A），计算酶抑制率，可以判断出样品中有机磷或氨基甲酸酯类中农药的残留剂量。

2 两款仪器的共同点

2.1 仪器特点

两款仪器都是由光学、机械、电子软件等部分组成，可以同时检测多个样品，自动检测、记录、计算和显示最终抑制率和浓度值；内置样品测试数据库可连接电脑进行测试、分析、汇总；置热敏打印，方便快捷；中文菜单操作人机对话界面便于输入操作，步骤简单、明了。

2.2 试剂开放，无特定限制

试剂可以选用仪器厂家的商品化小包装专供试剂。

试剂的储存和使用要求有：①缓冲剂。粉状物常温存放，蒸馏水溶解制成pH 8.0提取液。②显色剂。5，5二硫代双（2-硝基苯甲酸）和碳酸氢钠以一定比例混合，用缓冲液溶解，在0～4 ℃的环境下保存期较长。③底物。碘化硫代乙酰胆碱，粉状在0～4 ℃的环境下保存期在半年以上，加蒸馏水溶解在0～4 ℃的环境下保存期为7 d。④酶。粉状的胆碱酯酶冷冻储存，溶解后应储存在0～4 ℃的环境下冷藏，一周内用完。

2.3 计算公式

采用两点法检测，相比于终点法，两点法可以检出本身带有较深颜色的农产品，受干扰程度较小。检测时通过测定固定时间段对照和样品溶液吸光度变化计算抑制率，公式如下：

抑制率=（△A对照-△A样品）/ △A对照×100%. （1）

检测结果不会出现负值，但需要注意审核0抑制率数据。

3 两款仪器的不同点

3.1 试剂用量方面

DY-5000仪器取2 g蔬果样品+20 mL缓冲液进行浸提；样液比率为1︰10；测试时，180 uL缓冲液（检测样品时则为浸提液）+10 uL酶液+10 uL显色剂，静置10 min+10 uL底物，立即测试；反应物浓度，例如以显色剂计算，为10 uL/210 uL。

NY-16D仪器取2 g蔬果样品+10 mL缓冲液进行浸提；样液比率为1︰5；测试时，2.5 mL缓冲液（检测样品时则为浸提液）+100 uL酶液+100 uL显色剂，静置15 min+100 uL底物，立即测试；反应物浓度，以显色剂计算，为100 uL/2 800 uL。

3.2 测试反应时间不同

DY-5000仪器的标准反应测试时间为60 s，而NY-16D仪器的标准反应测试时间180 s。则在公式（1）中：△A对照表示对照溶液反应60 s/180 s的吸光度变化值；△A样品表示样品溶液反应60 s/180 s的吸光度变化值；

3.3 空白吸光值作用不同

DY-5000仪器的空白吸光值△A在0.4～0.8之间，且必须>0.4.每进一批次样品都需要同时做双孔空白检测，并作为本批次样品的参照标准。这样能够较好地克服仪器工作点漂移的影响。

NY-16D仪器的空白吸光值△A在0.3以上，即采用国标标准。必须先单独进行空白检测，作为不同批次样品的空白参考值参与计算；也可随时根据仪器状况进行空白测试，作为下批次空白值参与计算。这样可以在保证空白检测值准确的情况下进行样品检测，一般不会使批次样品检测数据作废。

3.4 样品重复检测方式不同

DY-5000仪器可默认双孔检测，自动设立重复，并计算平均值，能通过平行测定的结果一致性比对判断两次结果的可信度。

NY-16D仪器的单孔检测需要手动设立重复和计算平均值。