肺宁胶囊中氢醌TLC鉴别方法的优化

唐姗，刘冬，孙佳明，李欣悦，张辉*

(1.长春中医药大学，吉林 长春 130117；2.吉林农业大学，吉林 长春 130118)

中药工业

肺宁胶囊中氢醌TLC鉴别方法的优化

唐姗1，2，刘冬1，孙佳明1，李欣悦1，张辉1*

(1.长春中医药大学，吉林 长春 130117；2.吉林农业大学，吉林 长春 130118)

目的：对肺宁胶囊中氢醌TLC鉴别方法进行优化。方法：对3种TLC鉴别方法进行对比研究，对比提取方法、展开剂和显色剂。结果：以超声提取法制备供试品溶液，展开剂为三氯甲烷-丙酮(7∶ 3)、10%铁氰化钾水溶液和2%三氯化铁水溶液的混合溶液(1∶ 1)为显色剂获得的TLC图谱清晰。结论：所建立的方法简便、可靠，可用于肺宁胶囊中氢醌的质量控制。

肺宁胶囊；返魂草；氢醌；TLC鉴别

肺宁胶囊为已上市的临床常用中成药，由返魂草提取加工制成。返魂草地上部分主要含有的生物碱为千里光啡啉，千里光碱A、B、C；含有的酚酸类成分为氢醌、绿原酸、熊果苷、对羟基苯乙酸甲酯、邻羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸等[1-2]。肺宁胶囊具有清热祛痰，镇咳平喘的功能，用于肺内感染，慢性支气管炎，喘息性支气管炎，急性呼吸道感染等。氢醌为肺宁胶囊中主要成分。原质量标准规定[3]对其特征成分进行TLC鉴别检验，但执行过程中，出现检不出的现象，笔者通过对该制剂质量标准中氢醌TLC鉴别方法的优化，得到了满意、可靠的结果。

1 材料

返魂草药材(吉林省通化博祥药业股份有限公司)；肺宁胶囊(合格品、不合格品)(吉林省通化博祥药业股份有限公司，批号：131101，121001)，不合格品为吉林省食品药品药检所抽检检测不出氢醌的样品。

氢醌对照品(中国食品药品检定研究院，批号：100221-200301)；薄层层析用硅胶G预制板；三氯甲烷、丙酮、石油醚、乙醚、三氯化铁、铁氰化钾等试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备

取肺宁胶囊内容物(合格品、不合格品)2 g，研细，加丙酮-甲醇(9∶ 1)混合溶液25 mL，超声处理30 min，过滤，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL，使其溶解，作为供试品溶液1。取本品内容物(合格品、不合格品)2 g，加100 mL水煮沸1 h，离心，取上清液，加入5%明矾溶液15 mL，搅拌，放置，离心，取上清液用乙醚萃取3次，每次40 mL，合并乙醚液，用5%碳酸氢钠溶液洗涤3次，每次15 mL，乙醚层再用去离子水洗涤2次，每次15 mL，取乙醚液置水浴锅上低温挥干，残渣加去离子水1 mL使其溶解，用45 μL微孔滤膜过滤作为供试品溶液2[4]。取本品内容物(合格品、不合格品)1 g，研细，加甲醇20 mL，超声处理20 min，过滤，滤液蒸干，残渣加水20 mL使其溶解，用乙醚提取3次，每次10 mL，合并提取液，挥干，残渣加乙醇1 mL使其溶解，作为供试品溶液3[5]。

2.2 药材溶液的制备

取返魂草药材10 g，加水200 mL，回流提取2 h，加硅藻土5 g，混匀，过滤，滤液蒸干，作为药材溶液1。另取返魂草，同供试品溶液2制备方法制成药材溶液2[4]。另取返魂草，同供试品溶液3制备方法制成药材溶液3[5]。

2.3 对照品溶液的制备

取氢醌对照品适量，加乙醇制成质量浓度为0.4 mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液1。取氢醌对照品，加甲醇制成质量浓度为0.2 mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液2[4]。取氢醌对照品适量，加乙醇制成质量浓度为1 mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液3[5]。

2.4 薄层层析

方法一：吸取对照品溶液1 2 μL，药材溶液1 15 μL，供试品溶液1 5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮(7∶ 3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%铁氰化钾水溶液和2%三氯化铁水溶液的混合溶液(1∶ 1)。供试品色谱中，在与对照品及药材色谱相应的位置上显相同的蓝色斑点，见图1。

方法二：吸取供试品溶液2 10 μL，药材溶液2 15 μL，对照品溶液2 5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板，以三氯甲烷-丙酮(7∶ 4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁和2%铁氰化钾混合溶液(临用前等体积混合)。供试品色谱中，在与对照品及药材色谱相应的位置显相同颜色斑点[4]，见图1。

方法三：照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录IVB)试验，吸取氢醌对照品溶液3 4 μL，吸取药材溶液3、供试品溶液3各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90 ℃)-乙醚(3∶ 5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%铁氰化钾水溶液和3%三氯化铁水溶液的混合溶液(1∶ 1)。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置显相同的蓝色斑点[5]，见图1。

1.氢醌对照品 2.返魂草药材 3.肺宁胶囊(合格品) 4.肺宁胶囊(不合格品)图1 肺宁胶囊中氢醌的3种方法TLC图

3 结论

图1显示，方法一中返魂草药材、肺宁胶囊合格品及不合格品在与对照品色谱相应位置上显相同蓝色斑点，表明方法一对供试品都能检测出氢醌。方法二和方法三均参考国家标准及文献方法，肺宁胶囊不合格品与对照品所显蓝色斑点未能对应，操作方法缺乏肺宁胶囊中氢醌质量控制的可行性。因此，方法一可作为肺宁胶囊的TLC鉴别法。

4 讨论

4.1 提取方法的选择

按照方法一、方法二和方法三对肺宁胶囊中的氢醌进行TLC鉴别，由图1可见，方法一中返魂草药材、肺宁胶囊(合格品)、肺宁胶囊(不合格品)均可检出含有氢醌；方法二、方法三中肺宁胶囊(不合格品)未能检出含有氢醌。方法一与方法二、方法三的区别在于其采用丙酮-甲醇混合溶剂超声提取方法，避免了水煎后乙醚萃取或醇提后乙醚萃取对氢醌含量的损失。提取液加入硅藻土助其滤过，有效地去除杂质的干扰。由此可知，供试品溶液1的制备方法最佳。

4.2 展开剂的选择

方法一中展开剂比较三氯甲烷-丙酮(1∶ 1)、三氯甲烷-丙酮(7∶ 3)，结果表明三氯甲烷-丙酮(7∶ 3)薄层层析展开斑点Rf值适中，展开效果较好。见图2。

1.氢醌对照品 2.返魂草药材 3.肺宁胶囊(合格品) 4.肺宁胶囊(不合格品)图2 方法一展开剂与改进后展开剂的 肺宁胶囊中氢醌的TLC鉴别

4.3 显色剂的选择

方法一显色剂曾比较了10%铁氰化钾水溶液和2%三氯化铁醇溶液的混合溶液(1∶ 1)、10%铁氰化钾水溶液和2%三氯化铁水溶液的混合溶液(1∶ 1)，结果表明前者易黏稠变质且显色效果不佳，后者不掩盖色谱斑点，得到的TLC图谱斑点清晰、持久。因此，采用10%铁氰化钾水溶液-2%三氯化铁水溶液(1∶ 1)为显色剂。见图3。

1.氢醌对照品 2.返魂草药材 3.肺宁胶囊(合格品) 4.肺宁胶囊(不合格品)图3 方法一显色剂与改进后显色剂的 肺宁胶囊中氢醌的TLC鉴别

通过实验研究，对肺宁胶囊中氢醌TLC鉴别进行优化，所建立的方法简便、可靠，可用于肺宁胶囊中氢醌的质量控制。

[1] 严仲铠.中国长白山药用植物彩色图志[M].北京：人民卫生出版社，1997：44.

[2] 王吉彦，李丽静，张连珠.HPLC法测定返魂草及其注射剂中绿原酸[J].中草药，2005，36(8)1166-1167.

[3] 卫生部.卫生部药品标准·中药成方制剂[S].第四册.1991：82.

[4] 南敏伦，邢振发，赫玉芳，等.返魂草的鉴别研究[J].黑龙江医药，2009，22(4)：454-456.

[5] 国家食品药品监督管理局.国家食品药品监督管理局标准(试行)[S].YB/Z 1078-2008.2008.

OptimizationofTLCIdentificationMethodsforhydroquinoneofFeiningCapsules

TANG Shan1,2，LIU Dong1，SUN Jiaming1，LI Xinyue1，ZHANG Hui1*

(1.ChangchunUniversityofChineseMedicine，Changchun130117，China； 2.JilinAgriculturalUniversity，Changchun130118，China)

Objective：To optimize the method of TLC Identification forSenecioCannabifoliushydroquinone of Feining Capsules.Methods：three TLC identification methods were studied by comparing the method of extraction，development and chromogenic.Results：Test sample solution were prepared by ultrasonic extraction method.By usinng the development of chloroform-acetone(7∶ 3)，the chromogenic of 10% potassium ferricyanide and 2% ferric chloride aqueous mixed solution(1∶ 1)，the TLC chromatogram were fairly clear.Conclusion：The established method was simple and reliable.It can be used for the quality control of Feining Capsules.

Feining Capsules；SenecioCannabifolius；Hydroquinone；TLC Identification

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.11.011

2014-03-19)

*

张辉，博士研究生导师，教授，研究方向：天然药物化学；Tel：(0431)86172080，E-mail：zhanghui_8080@163.com