饲粮维生素A添加水平对生长獭兔生长性能、毛皮品质、维生素A沉积、血清生化指标及抗氧化性能的影响

朱晓强 李福昌 李万佳 付朝晖 张彩霞

(山东农业大学动物科技学院，泰安 271018)

维生素A是动物体内必需的一种脂溶性维生素，研究表明，维生素A对于维持上皮细胞的完整性、正常视觉、基因调节、动物繁殖、免疫功能、抗氧化作用等方面都是必不可少的。近年来的研究发现，维生素A能增强机体抗感染能力，参与蛋白质的合成，维持骨骼的正常生长代谢［1］。Maden［2］进一步研究表明维生素A在胚胎发育中也起重要作用。目前，我国还未正式出台獭兔完整的饲养标准，因此对獭兔维生素A需要量的研究具有重要意义。本试验以生长獭兔为研究对象，探讨饲粮添加不同水平维生素A对其生长性能、毛皮品质、维生素A沉积、血清生化指标和抗氧化性能的影响，寻求獭兔饲粮中维生素A适宜添加水平，为我国制定獭兔饲养标准提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验饲粮

基础饲粮参照NRC(1977)家兔饲养标准配制而成，其组成及营养水平见表1。在基础饲粮中分别添加 0(对照组)、5 000、10 000、20 000、40 000 IU/kg维生素A醋酸酯，制成5种试验饲粮，加工成直径4～6 mm的颗粒饲料，通风干燥保存。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.2 试验设计与饲养管理

试验选用健康、平均体重为(1.50±0.14)kg的3月龄獭兔200只，公母各占1/2，随机分成5组，每组40个重复，每个重复1只獭兔。分别饲喂以上5种饲粮，预试期7 d，正试期53 d。试兔单笼饲养，试验期间早晚各喂1次，采用常规饲养管理和免疫程序，自然采光、通风。

1.3 样品采集与制备

在试验开始后第53天早晨空腹称重，每组随机抽取8只试兔，立即心脏采血10 mL，37℃水浴40 min后，3 000 r/min离心15 min，分离所得血清分装于Eppendorf管中，置于-20℃冷冻保存，待测血清维生素A含量、血清生化指标和抗氧化性能指标。

采血完成后将试兔颈动脉放血屠宰，取毛皮进行称重，将毛皮沿腹中线剪开，量其长、宽，记录数据，计算毛皮面积;摘取肝脏放于液氮罐中保存，待测肝脏维生素A含量及抗氧化性能指标。

1.4 测定指标与方法

1.4.1 生长性能指标

试验结束后，以重复为单位称量试兔的体重，并统计全期的喂料量，计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.2 毛皮品质

屠宰后，称取毛皮重量，将毛皮平铺后量取皮长、皮宽(肩部、腰部、臀部各量1次，取平均值)计算毛皮面积，毛囊密度采用石蜡切片及苏木精-伊红(HE)染色法进行图像分析，每只试兔选取3张HE染色切片(肩部、背部及臀部各1张)，每张切片选2个视野拍照，用Image-Plus软件对每个视野的毛囊个数、初级毛囊个数、次级毛囊个数进行统计，计算出毛囊密度、初级毛囊密度和次级毛囊密度，并计算次级毛囊密度/初级毛囊密度(S/P)［3］。

1.4.3 血清和肝脏维生素A含量

高效液相色谱法，参照文献［4］的方法。

1.4.4 血清生化指标

血清尿素氮(UN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量均在日立7020型全自动分析仪上测定，试剂盒购自日本和光纯药工业株式会社。

1.4.5 血清和肝脏抗氧化性能指标

血清和肝脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量均在UV-2450型紫外可见分光光度计上测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.5 数据处理与分析

数据采用SAS 9.1统计软件中的GLM进行数据的方差分析，若有显著差异，则采用Duncan氏法进行数据的多重比较。

2 结果与分析

2.1 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔生长性能的影响

由表2可以看出，在初始体重无显著差异(P＞0.05)的情况下，饲粮维生素A添加水平对獭兔ADG、ADFI影响不显著(P＞0.05)，对 F/G影响显著(P＜0.05)，其中10 000 IU/kg维生素A添加组F/G最低，显著低于对照组和5 000 IU/kg维生素A添加组(P＜0.05)，而10 000、20 000和40 000 IU/kg维生素A添加组之间差异不显著(P＞0.05)，ADG在饲粮维生素A添加水平为10 000 IU/kg时最高。

2.2 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔毛皮品质的影响

由表3可以看出，饲粮维生素A添加水平对生长獭兔毛皮重量和毛皮面积的影响极显著(P＜0.01)，毛皮重量及毛皮面积都随饲粮维生素A添加水平增加呈先升高后降低的变化，10 000 IU/kg维生素A添加组均显著高于其他4组(P＜0.05)，饲粮维生素A添加水平对毛囊密度、初级毛囊密度、S/P均无显著影响(P＞0.05)。

表3 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔毛皮品质的影响Table 3 Effects of dietary vitamin A level on fur quality of growing Rex rabbits

2.3 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清及肝脏维生素A沉积的影响

由表4可以看出，饲粮维生素A添加水平对血清中维生素A含量影响显著(P＜0.05)，当饲粮维生素A添加水平在0～20 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，血清维生素A含量呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过20 000 IU/kg后，血清维生素A含量趋于平稳;饲粮维生素A添加水平对肝脏中维生素A含量影响显著(P＜0.05)，随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏维生素A含量呈升高趋势，且呈线性关系。

表4 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清及肝脏维生素A沉积的影响Table 4 Effects of dietary vitamin A level on vitamin A deposition in serum and liver of growing Rex rabbits

2.4 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清生化指标的影响

由表5可以看出，饲粮维生素A添加水平对血清 UN含量影响显著(P＜0.05)，10 000、20 000 IU/kg维生素A添加组显著低于其他组(P＜0.05)，饲粮维生素A添加水平对血清TP含量影响不显著(P＞0.05)，对血清ALB含量影响显著(P＜0.05)，对照组显著低于其他组(P＜0.05)，其他各组间无显著差异(P＞0.05)，其中饲粮维生素A添加水平为10 000 IU/kg时血清ALB含量最高;饲粮维生素A添加水平对血清TG、CHO、HDL和 LDL含量影响均不显著(P＞0.05)。

表5 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清生化指标的影响Table 5 Effects of dietary vitamin A level on serum biochemical indices of growing Rex rabbits

2.5 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清和肝脏抗氧化性能指标的影响

由表6可以看出，饲粮维生素A添加水平对血清GSH-Px和T-SOD活性影响极显著(P＜0.01)，当饲粮维生素 A添加水平在0～10 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，血清GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过10 000 IU/kg时，都趋于平稳;饲粮维生素A添加水平对血清MDA含量影响显著(P＜0.05)，随饲粮维生素A添加水平增加，血清MDA含量呈降低趋势，40 000 IU/kg维生素A添加组血清MDA含量最低。

饲粮维生素A添加水平对肝脏GSH-Px活性影响极显著(P＜0.01)，对T-SOD活性影响显著(P＜0.05)，当饲粮维生素 A添加水平在0～10 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过10 000 IU/kg时，都趋于平稳;饲粮维生素A添加水平对肝脏MDA含量影响显著(P＜0.05)，随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏MDA含量呈降低趋势，40 000 IU/kg维生素A添加组肝脏MDA含量最低;饲粮维生素A添加水平对肝脏T-AOC影响不显著(P＞0.05)，但随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏T-AOC先升高后降低，10 000 IU/kg维生素A添加组肝脏T-AOC最高。

表6 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清和肝脏抗氧化性能指标的影响Table 6 Effects of dietary vitamin A level on serum and liver antioxidant indices of growing Rex rabbits

3 讨论

3.1 饲粮维生素A添加水平与生长獭兔生长性能

谢登玉等［5］以肉兔为研究对象，发现6 000 IU/kg维生素A可显著提高獭兔的ADG，降低 F/G。林 映 才 等［6］研 究 表 明 添 加 300～10 000 IU/kg维生素A显著提高仔猪ADG，极显著降低F/G。郭晓宇等［7］以肉鸡为研究对象，发现饲粮维生素A水平为3 000 IU/kg时，肉鸡生长性能较高;饲粮维生素 A水平为1 500、45 000 IU/kg时，生长性能显著下降;饲粮维生素A水平为15 000 IU/kg时，生长性能呈降低趋势。本试验研究发现，随饲粮维生素A添加水平的提高，獭兔ADG、ADFI有上升趋势，F/G呈降低趋势。当饲粮维生素A添加水平达到10 000 IU/kg时，獭兔的F/G显著低于其他4组，说明当饲粮维生素A添加水平为10 000 IU/kg时，可以显著提高獭兔的饲料转化率。因此，从生长性能指标分析可知，在本试验条件下，生长獭兔饲粮的适宜维生素A添加水平为10 000 IU/kg。

3.2 饲粮维生素A添加水平与生长獭兔毛皮品质

獭兔是典型的皮用型兔，其经济价值主要在于其毛皮，毛皮品质除了与品种有一定关系外，饲粮营养供应也不可忽视。毛皮品质可以从毛皮重量、毛皮面积、毛囊密度等诸多指标进行综合评定。张福勋［8］通过研究发现，断奶至3月龄的獭兔应保证足够的营养水平与采食量，这样可以提高商品獭兔的毛皮品质。任殿付等［9］通过研究发现饲粮中性洗涤纤维水平对断奶至3月龄獭兔的皮毛重量影响极显著。本试验中，饲粮维生素A添加水平对生长獭兔毛皮重量和毛皮面积的影响极显著，毛皮重量及毛皮面积都随饲粮维生素A添加水平增加呈先升高后降低的变化，而且均在维生素A添加水平10 000 IU/kg时达到最大值。

毛囊根据发生时间的早晚和结构特点分为初级毛囊和次级毛囊，毛和绒都是由毛囊产生的，獭兔的初级毛囊长出的毛又被称为针毛，次级毛囊长出的毛称为绒毛。由于毛囊发育的优劣是影响毛皮重量的关键因素，所以对獭兔毛囊进行研究为提高獭兔毛皮品质具有重要的理论和实践意义。张焱如［10］研究绒山羊羊皮表明，绒山羊在刚出生时其所有的初级毛囊基本完全发育成熟，而只有少数的次级毛囊发育成熟，出生后山羊针毛的数量是不变的，只是随着皮张大小的变化，针毛的密度发生变化，受营养等其他因素的影响，绒毛数量会有差异。Rasmussen等［11］研究表明，极低的饲粮蛋白质水平可能阻碍毛囊的再生，而毛囊的再生直接影响着冬季毛皮的绒毛密度。本试验中饲粮维生素A添加水平对毛囊密度、初级毛囊密度、次级毛囊密度及S/P均无显著影响，可能与5组饲粮蛋白质水平一致有关。

3.3 饲粮维生素A添加水平与生长獭兔血清和肝脏维生素A沉积

饲粮维生素A添加水平与体内维生素A的状况密切相关，维生素A的体内代谢受饲粮中维生素A含量的影响很大［12-13］。血清维生素A和肝脏维生素A含量是监测动物机体维生素A的营养状况的常用指标［14］。Shaik 等［15］对鲈鱼的研究发现，血清维生素A含量在饲粮维生素A添加水平在210～3 764 IU/kg范围内，与饲粮维生素A添加水平呈正相关，在高水平维生素A饲粮下达到平台期而不再升高。本研究发现，饲粮维生素A添加水平对血清中维生素A含量影响显著，当饲粮维生素A添加水平在0～20 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，血清维生素A含量呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过20 000 IU/kg后，血清维生素A含量趋于平稳;饲粮维生素A添加水平对肝脏中维生素A含量影响显著，随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏维生素A含量呈升高趋势，且呈现线性关系。

3.4 饲粮维生素A添加水平与生长獭兔血清生化指标

梁鸿雁等［12］以獭兔为研究对象研究发现，血清维生素A含量随饲粮维生素A添加水平的提高而有升高的趋势，但不显著，血清UN含量随饲粮维生素A添加水平的提高而下降。谢登玉等［5］研究发现，饲粮维生素A添加水平对肉兔血液TG和CHO含量无显著影响，对血液UN含量影响显著。在本试验中，饲粮维生素A添加水平对血清UN含量影响显著，10 000、20 000 IU/kg维生素A添加组显著低于其他组，对血清ALB含量影响显著，对血清 TP、TG、CHO、HDL和 LDL含量影响均不显著。

3.5 饲粮维生素A添加水平与生长獭兔血清和肝脏抗氧化性能

GSH-Px是动物体内广泛存在的一种催化过氧化氢分解的酶，能催化已形成的过氧化氢生成水和氧气，并防止过氧化物进一步水解产生有害物质 MDA。Palacios等［16］报道维生素 A缺乏大鼠的肝组织中GSH-Px活性显著低于正常对照组动物。Dogra等［17］试验表明维生素A缺乏使小鼠肺中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著下降。Surai等［18］研究发现，大剂量维生素 A摄入可降低鸡SOD活性，促进体内脂质过氧化反应，使机体抗氧化能力减弱。李英哲等［19］研究发现，维生素A完全缺乏组和轻度缺乏组的大鼠血清、肝脏及脑组织的SOD活性显著下降，全血、肝脏及脑组织GSH-Px活性显著下降，而血清、肝脏及脑组织MDA含量显著升高。本研究结果与此相似，饲粮维生素A添加水平对血清和肝脏GSH-Px活性影响极显著，对血清T-SOD活性影响极显著，对肝脏T-SOD活性影响显著，当饲粮维生素A添加水平在0～10 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，血清和肝脏GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过10 000 IU/kg时，都趋于平稳;饲粮维生素A添加水平对血清和肝脏MDA含量影响显著，随饲粮维生素A添加水平增加，MDA含量呈降低趋势。饲粮维生素A添加水平对肝脏T-AOC影响不显著，但随饲粮维生素A添加水平增加，T-AOC呈先升高后降低趋势。饲粮中添加维生素A可以极大地改善血清和肝脏的抗氧化性能。

4 结论

综合本试验测定的指标可以得出，生长獭兔的饲粮适宜维生素A添加水平为10 000 IU/kg。

［1］杨凤.动物营养学［M］.2版.北京:中国农业大学出版社，1993:125-128.

［2］MADEN M.Vitamin A and the developing embryo［J］.Postgraduate Medical Journal，2001，77(910):489-491.

［3］腾可导.彩图家畜组织学与胚胎学实验指导［M］.北京:中国农业大学出版社，2008:216-224.

［4］中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，全国饲料工业标准化技术委员会.GB/T 17817—2010饲料中维生素A的测定高效液相色谱法［S］.北京:中国标准出版社，2010.

［5］谢登玉，李福昌.日粮添加不同水平维生素A对2～3月龄肉兔生长发育、组织沉积及脂质过氧化反应的影响［J］.中国兽医学报，2008(11):1356-1358.

［6］林映才，蒋宗勇，杨晓建，等.维生素A水平对生长猪生产性能、肝脏维生素A含量和血清免疫参数的影响［J］.动物营养学报，2002，14(3):45-50.

［7］郭晓宇，闫素梅，史彬林，等.日粮维生素A水平对肉鸡生长性能及营养物质消化率的影响［J］.饲料工业，2010，31(4):4-8.

［8］张福勋.獭兔毛皮质量与取皮时间的相关性研究［J］.当代畜牧，2005(6):4-6.

［9］任殿付，李福昌，王雪鹏，等.饲粮中性洗涤纤维水平对断奶至3月龄獭兔生长性能、氮代谢、毛皮品质和盲肠发酵的影响［J］.动物营养学报，2012，25(3):543-549.

［10］张焱如.内蒙古白绒山羊皮肤毛囊活性的变化规律及生长激素受体在毛囊中的定位［D］.硕士学位论文.呼和浩特:内蒙古农业大学，2011:34-36.

［11］RASMUSSEN P V，BORSTING C F.Effects of variations in dietary protein levels on hair growth and pelt quality in mink(Mustela vison)［J］.Canadian Journal of Animal Science，2000，80(4):633-642.

［12］梁鸿雁，高宏伟，韩华，等.维生素A水平对獭兔生产性能及血液生化指标的影响［J］.中国养兔杂志，2003(3):15-17.

［13］SUNDARESAN P R，KAUP S M，WIESENFELD P W，et al.Interactions in indices of vitamin A，zinc and copper status when these nutrients are fed to rats at adequate and increased levels［J］.British Journal of Nutrition，1996，75(6):915-928.

［14］GREEN M H，GREEN J B，BERG T，et al.Vitamin A metabolism in rat liver:a kinetic model［J］.American Journal of Physiology，1993，264(3):G509-G521.

［15］SHAIK MOHAMED J，SIVARAMV，CHRISTOPHER ROY T S，et al.Dietary vitamin A requirement of juvenile greasy grouper(Epinephelus tauvina)［J］.Aquaculture，2003，219(1):693-702.

［16］PALACIOS A，PIERGIACOMI V A，CATALÁ A.Vitamin A supplementation inhibits chemiluminescence and lipid peroxidant in isolated rat liver microsomes and mitochondria［J］.Molecular and Cellular Biochemistry，1996，154(1):77-82.

［17］DOGRA S C，KHANDUJA K L，GUPTA M P，et al.Effect of vitamin A deficiency on pulmonary and hepatic protective enzymes in rat［J］.Acta Vitaminologica et Enzymologica，1983，5(1):47-52.

［18］SURAI P F，KUKLENKO T V，LONOV I A，et al.Effect of vitamin A on the antioxidant system of the chick during early postnatal development［J］.British Poultry Science，2000，41(4):454-458.

［19］李英哲，黄连珍，周丽玲.维生素A缺乏对大鼠脂质过氧化和抗氧化系统的影响［J］.营养学报，2001，23(1):1-5.