阿德福韦酯抗病毒对慢性乙型肝炎的临床疗效及对外周血T淋巴细胞亚群的影响研究

马玉秀，辛晓恩，于国英，孙建琳，韩亚萍

（1.青海省第四人民医院 肝科，青海 西宁 810001；2.青海省第四人民医院 检验科，青海 西宁 810001；3.江苏省人民医院 感染病科，江苏 南京 210029）

阿德福韦酯抗病毒对慢性乙型肝炎的临床疗效及对外周血T淋巴细胞亚群的影响研究

马玉秀1，辛晓恩1，于国英1，孙建琳2，韩亚萍3

（1.青海省第四人民医院 肝科，青海 西宁 810001；2.青海省第四人民医院 检验科，青海 西宁 810001；3.江苏省人民医院 感染病科，江苏 南京 210029）

目的探讨阿德福韦酯抗病毒对慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）的临床疗效及对外周血淋巴细胞亚群的影响。方法从2009年10月～2012年6月青海省第四人民医院收治的慢性乙型肝炎患者中选取40例，应用阿德福韦酯进行抗病毒治疗，分别记录患者在治疗前、治疗后3个月、6个月及12个月谷丙转氨酶（alanine transaminase，ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase，AST）和总胆红素（total bilirubin，TBiL）及乙型肝炎病毒 DNA（hepatitis B virus-DNA，HBV-DNA）各项肝功能指标的变化情况；观察患者的临床有效率；采用流式细胞仪检测分析患者外周血T淋巴细胞亚群的变化情况。结果12个月后所有患者ALT、AST和TBiL均较治疗前显著下降，HBV-DNA检测均转为阴性，差异具有统计学意义（P＜0.05）；慢性乙型肝炎患者的总有效率为92.5%；抗病毒治疗3个月时患者外周血T淋巴细胞亚群无显著改善，治疗6个月和12个月后患者CD4＋T淋巴细胞及CD4＋T／CD8＋T淋巴细胞比值均较治疗前显著升高，CD3＋T和CD8＋T治疗前后未见显著变化。结论阿德福韦酯抗病毒治疗慢性乙型肝炎临床疗效好，能够显著改善患者的肝功能，使外周血T淋巴细胞亚群间的失衡得到改善。

阿德福韦酯；慢性乙型肝炎；外周血T淋巴细胞亚群

慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）简称乙肝，临床检测乙肝病毒为阳性，患者主要表现为乏力、恶心、腹胀、肝区疼痛等症状，病情严重的患者可以伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌等［1］。世界卫生组织报道［2］，全球约有20亿人曾感染乙肝病毒，其中慢性乙型肝炎患者约占3.5亿，每年因乙肝病毒感染而死亡的患者约有100万，故慢性乙肝在临床若不及时治疗将会导致严重的后果。中国是乙肝的高发区，据统计［3］，我国乙肝病毒感染率为57.6%，也就是说全国至少有6亿人曾经感染过乙肝病毒。现认为慢性乙型肝炎的发病与免疫系统密切相关，人体感染乙肝病毒后，发生一系列非特异性反应，出现外周血T淋巴细胞各亚群的平衡失调，影响机体免疫系统，导致乙肝病毒抗原不能有效清除，因此治疗慢性乙型肝炎时恢复外周血T淋巴细胞各亚群的平衡是至关重要的［4-5］。本文研究阿德福韦酯抗病毒对慢性乙型肝炎的临床疗效及对外周血T淋巴细胞亚群的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 从2009年10月～2012年6月期间青海省第四人民医院收治的慢性乙型肝炎患者中选取40例作为研究对象，所有患者的诊断均符合2005年制定的《慢性乙型肝炎防治指南》，在告知患者及其家属并签署知情同意书后纳入研究，纳入标准：所有患者血清慢性乙型肝炎病毒表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）持续阳性1年以上，血清乙型肝炎病毒 DNA（hepatitis B virus-DNA，HBV-DNA）定量 ＞1×105拷贝／mL，血清谷丙氨酸转氨酶（alanine transaminase，ALT）超过参考值上限2～10倍。其中男28例，女12例，患者年龄25～61岁，平均（38.6±2.4）岁，病程6个月 ～3年，平均（2.1±0.4）年。所有患者均无其它严重的心、脑、肾等重要脏器疾病，无手术史及药物过敏史，所有患者1年内未使用过任何抗病毒药物及免疫调节剂。

1.2 方法 所有患者均给予一般的保肝药物包括异甘草酸镁注射液（江苏正大天晴药业股份有限公司，国药准字H20051942）、注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸（Abbott S.r.l，国药准字H20090408）等治疗，并给予阿德福韦酯（四川美大康华药业有限公司，国药准字H20100092）口服，每次10mg，1次／d。

1.3 观察指标 分别记录患者在治疗前、治疗后3个月、6个月及12个月采集新鲜血液3mL，检测ALT、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase，AST）和总胆红素（total bilirubin，TBiL）及乙型肝炎病毒 DNA（hepatitis B virus-DNA，HBVDNA）的变化情况；观察患者的临床有效率采用流式细胞仪检测分析患者外周血T淋巴细胞亚群的变化情况。肝功能检测采用日产Olympus自动生化分析仪，HBV-DNA检测采用美国BLD-RADiQ5全自动荧光定量PCR检测系统及制剂，T淋巴细胞亚群采用美国贝克曼全自动XL-4色数字化流式细胞仪进行检测。

1.4 疗效评价［6］疗效评价如下：①显效：治疗后，患者的临床症状消失，肝功能恢复正常，HBV-DNA转阴；②有效：患者的临床症状有所改善，肝功能基本恢复正常，HBV-DNA未转阴，但是其滴度下降≥2×105IU／mL；③无效：患者的临床症状无改善或加重，肝功能、HBV-DNA等指标无改善。总有效率＝（显效＋有效）／总例数×100%。

1.5 统计学方法 采用SPSS17.0软件分析，正态计量资料用“±s”表示，进行t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者肝功能各项指标和HBV-DNA变化情况 治疗过程中患者的ALT、AST和THiL均有较好的改善，12个月后所有患者ALT、AST和TBiL均较治疗前显著下降，差异具有统计学意义（P＜0.05），治疗后患者HBV-DNA定量检测均转为阴性（见表1）。

表1 2组患者肝功能各项指标和HBV-DNA变化情况Tab.1 Changes of liver function and HBV-DNA in two groups

2.2 治疗前后患者外周血T淋巴细胞亚群变化 抗病毒治疗3个月时患者外周血淋巴细胞亚群无显著改善，治疗6个月和12个月后患者CD4＋T及CD4＋／CD8＋T均较治疗前显著升高，差异具有统计学意义（P＜0.05），CD3＋T和 CD8＋T治疗前后未见显著变化（见表2）。

表2 治疗前后患者外周血T淋巴细胞亚群变化Tab.2 Changes of peripheral blood thymus-dependent lymphocytes subsets before and after treatment

3 讨论

慢性乙型肝炎是由于感染乙型肝炎病毒后，体内乙肝病毒没有得到彻底清除，致使人体内乙肝病毒潜伏或者引起肝炎而发病［7］。现认为慢性乙型肝炎的发病与免疫系统密切相关，人体感染乙肝病毒后，首先发生的是一系列非特异性反应，主要有干扰素、自然杀伤细胞和肝巨噬细胞的活化，若病毒未能清除将会发生特异性细胞免疫反应［8］。在特异性细胞免疫反应中首先发挥作用的是树突状细胞，树突状细胞是人体内最强的抗原呈递细胞，能够高效摄取、加工处理和呈递抗原，是连接抗原和T淋巴细胞的桥梁，对特异性免疫应答的启动有关键作用，树突状细胞能够激发CD4＋T淋巴细胞和CD8＋T淋巴细胞的活性，乙肝病毒经树突状细胞处理后呈递给T淋巴细胞，T淋巴细胞一方面诱导病毒感染的靶细胞的凋亡，将病毒清除，另一方面，可以分泌大量的细胞因子，介导非细胞溶解的抗病毒效应，增强邻近细胞对病毒的抵抗作用［9-10］。外周血T淋巴细胞各亚群的变化直接反应机体免疫状态的变化。乙肝病毒的增殖不会导致肝细胞的破裂，肝细胞的损伤主要是由于病毒的复制和抗原表达所激发的机体免疫病理所致。

阿德福韦酯是一种新的抗乙肝病毒药物，是一种单磷酸腺苷的无环核苷类似物，在细胞激酶的作用下磷酸化为有活性的阿德福韦二磷酸盐，能够竞争性抑制乙肝病毒多聚酶的作用，终止HBV-DNA链的延长，从而抑制病毒的复制，减少乙肝病毒数量，达到治疗慢性乙型肝炎的目的［11-12］。本研究结果提示，阿德福韦酯作为抗病毒药物，可有效抑制HBV病毒增殖，对慢性乙型肝炎治疗效果满意。另外，研究表明外周血CD4＋T淋巴细胞的减少或CD4＋T／CD8＋T淋巴细胞比值降低均可影响机体免疫系统，导致乙肝病毒抗原不能有效清除，因此治疗慢性乙型肝炎时恢复外周血T淋巴细胞亚群的平衡是至关重要的。淋巴细胞亚群反映机体基本的免疫状态，淋巴细胞的平衡影响慢性乙型肝炎病毒的转归，是免疫调节的主要介导者。本研究中患者外周血T淋巴细胞亚群的平衡得到较好的恢复，CD4＋T淋巴细胞及CD4＋／CD8＋T淋巴细胞比值均较治疗前显著升高，差异具有统计学意义（P＜0.05），但CD3＋T淋巴细胞和CD8＋T淋巴细胞治疗前后未见显著变化，分析原因，CD4＋T淋巴细胞在慢性乙型肝炎患者中起辅助、诱导作用，患者受HBV病毒感染后，细胞免疫作用受损，CD4＋T淋巴细胞数量下降，应用阿德福韦酯后观察组患者的HBV病毒受到抑制，CD4＋T淋巴细胞数量明显升高，CD8＋T淋巴细胞在CD4＋T淋巴细胞的辅助作用下，通过非细胞损伤途径将乙肝病毒清除，T淋巴细胞通过穿孔素和颗粒酶B的途径使感染病毒的肝细胞凋亡或坏死，凋亡的肝细胞被单核巨噬细胞或肝巨噬细胞消化清除［13］。本研究与熊英［14］等人发表的相关研究结果一致。但阿德福韦酯在临床治疗慢性乙型肝炎过程中起效较慢，需长期服用药物，本研究未能体现患者长期服用药物后出现的不良反应，因此，该药物的用药安全性需进一步探讨。

综上，阿德福韦酯抗病毒治疗慢性乙型肝炎临床疗效好，能够显著改善患者的肝功能，改善外周血淋巴细胞各亚群间的失衡，提高患者的免疫功能。但是本研究所选取的样本较少，药物应用后随访时间较短，存在局限，还有待进一步研究。

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［5］ 张长江，熊瑜琳，谭朝霞，等.阿德福韦联合恩替卡韦治疗多药物作用后慢性乙型肝炎肝硬化42例疗效观察［J］.第三军医大学学报，2010，32（22）：2413-2416.

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［14］ 熊英.阿德福韦酯联合拉米夫定抗病毒治疗慢性乙型肝炎32例［J］.世界华人消化杂志，2010，18（18）：1932-1935.

（编校：李璐璐）

The investigation of adefovir dipivoxil antiviral clinical efficacy on chronic hepatitis B and its effect on peripheral blood T lymphocyte subsets

MA Yu-xiu1，XIN Xiao-en1，YU Guo-ying1，SUN Jian-lin2，HAN Ya-ping3

（1.Department of Liver，The Fourth People's Hospital of Qinghai，Xining 810001，China；2.Department of Laboratory，The Fourth People's Hospital of Qinghai，Xining 810001，China；3.Department of Infectious diseases，Jiangsu Province Hospital，Nanjing 210029，China）

ObjectiveTo investigate the clinical efficacy of adefovir dipivoxil in antiviral treatment of chronic hepatitis B and its effect on peripheral blood T lymphocyte subsets.Methods40 cases of patientswith chronic hepatitis Bwere selected from The Fourth People's Hospital of Qinghai in October 2009 to June 2012，the patientswere given the antiviral treatmentof adefovir dipivoxil.Before treatment，3months，6months and 12months after treatment，the changes of liver function indicators of alanine transaminase（ALT），aspartate transaminase（AST）and total bilirubin（TBiL），and hepatitis B virus-DNA（HBV-DNA）were recorded；the totaleffective ratewasobserved；the peripheralblood T lymphocyte subsets changeswas tested and analyzed by flow cytometry.ResultsThe ALT，AST and TBiL of the patients all improved good，and the indicators of ALT，AST and TBiL after 12 months decreased significantly than before treatment，the HBV-DNA testing of the patients recovered negative，the difference was statistically significant（P＜0.05）；the total effective rate of hepatitis B patients is 92.5%；the peripheral blood T lymphocyte subsets has no significant improvement in patients after antiviral treatment for 3 months.After the treatment for 6 months and 12 months，the CD4＋T and CD4＋／CD8＋T were significantly higher than those before treatment，there was no significant changes in CD3＋T and CD8＋T before and after treatment.ConclusionAdefovir dipivoxil has a good clinical efficacy in antiviral treatment of chronic hepatitis B，and can significantly improve the patients’liver function，improve peripheral blood T lymphocyte subsets imbalance.

adefovir dipivoxil；chronic hepatitis B；peripheral blood T lymphocyte subsets

R512.62

A

1005－1678（2014）04－0088－03

江苏省卫生厅基金资助项目（Z201001）

马玉秀，女，本科，主治医师，研究方向：慢性乙型肝炎发病机制与防治，E-mail：841287372g＠qq.com。