p53和nm23在结直肠癌中的表达及临床意义

崔娟娟 陆庆革 王爱磊

（河北联合大学附属唐山市中医医院 河北唐山 064200）

结直肠癌（Colorectal carcinoma CRC）是常见的消化道恶性肿瘤之一，对CRC病情进行正确评估进而指导临床治疗从而提高患者的预后有重要的临床意义。结直肠癌的发生、发展经过研究被认为是多基因、多因素共同作用的结果，其过程复杂。目前认为结直肠癌生存和预后的主要调控因素是肿瘤的生长分化及侵袭转移。p53作为一种重要的抑癌基因，其缺失与突变是导致多种肿瘤发生的原因；nm23是肿瘤转移抑制基因，表达水平与肿瘤的转移相关。本研究中研究CRC p53、nm23蛋白在不同临床病理学参数中的表达特点及相互关系，来判断肿瘤恶性程度，进行预后评估并用于指导进一步治疗。

1 资料和方法

1.1 一般资料 选取2007年12月至2013年11月于我院肛肠科行手术并且临床资料完整的196例结直肠癌病例，所有患者术前均未进行过任何形式抗肿瘤治疗。年龄最大81岁，最小34岁，平均（60.62±8.14）岁，中位年龄61岁；女124例，男72例；低分化62例，中分化78例，高分化56例；腺癌182例，黏液腺癌14例；有淋巴结转移81例，无淋巴转移115例。

1.2 方法 标本以10%甲醛固定、取材、石蜡包埋，连续4um厚度切片，采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白－过氧化物酶连结（Streptavidin－peroxi－dase SP）法，试剂购买于福州迈新生物技术开发有限公司，Ⅰ抗为鼠抗人单克隆抗体，采用SP超敏免疫组化试剂盒，严格按照说明书操作。石蜡切片，常规脱蜡水化，微波高压酶行抗原修复，DBA显色，复染、脱水、透明、封片。在显微镜下观察，已知阳性片做阳性对照，磷酸盐缓冲液代替行阴性对照。

1.3 结果判定 遵循双盲原则，两名病理科副主任医师阅片，每例选取2张切片进行观察。p53阳性定位于肿瘤细胞核，呈棕黄色颗粒状。nm23阳性定位于肿瘤细胞膜或细胞质，呈棕色。随机选取10个高倍视野，每个高倍视野计数100个肿瘤细胞，取表达的细胞数的平均值为阳性数。阳性细胞数所占比例＜5%为（－）；6%～10%为（＋－）；11%～25%为（＋）；26%～50%为（＋＋）；51%～75%为（＋＋＋）；＞76%为（＋＋＋＋）。

1.4 统计学处理 采用SPSS13.0软件包对计数资料采用χ2检验分析，P＜0.05为差异有统计学意义；分类变量关联性分析采用Spearman等级相关检验。

2 结 果

2.1 p53及nm23的表达情况 见表1、表2。

2.2 p53和nm23表达的相关性其spearman相关系数r＝－0.314，P＝0.000，二者表达指数呈现负相关。

表1 结直肠癌中p53蛋白表达与临床病理参数的关系

表2 结直肠癌nm23蛋白表达与临床病理参数的关系

3 讨 论

结直肠癌发病率呈现逐年上升的趋势，研究出具有较高准确性的检测方法及指标来早期发现、科学评估肿瘤状况、合理有效干预治疗，达到减少肿瘤发生率、降低死亡率、延长生存时间、提高生活质量，是医学科学工作者们的努力目标。

p53基因是人体的抑癌基因之一，p53蛋白主要集中于核仁区。通过免疫组化方法检测的是突变型p53蛋白的表达情况，即表明p53基因发生突变［1］。本研究中，p53的阳性表达者为152例，阳性率为76.0%，表达情况与性别、年龄、肿瘤部位无关；与肿瘤分化程度之间的差异性有统计学意义，分化程度越高p53蛋白表达的强度越低；与淋巴结转移情况的差异性有统计学意义，发生淋巴结转移组的p53的表达强度要高于未发生淋巴结转移组。有文献报道称p53在直肠癌中的过表达率明显高于结肠癌，这可能与致癌物质在远端肠管浓度增大、接触时间长有关，使肠黏膜中p53发生突变的概率增大［2、3］。但p53过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴转移密切相关已得到证实，可认为肿瘤组织中p53蛋白过度表达证明肿瘤有较强的侵袭力和转移力，提示预后不佳。另外p53表达与放疗敏感性显著相关，被称为辐射敏感相关基因，它在调节肿瘤细胞对细胞毒物质（如放化疗等）反应中发挥着重要作用［4～6］。因此，检测p53蛋白，可作为判断结直肠癌严重度、预后及指导治疗的一个重要指标。

nm23，肿瘤转移抑制基因之一，主要作用是抑制肿瘤转移，其机制尚未完全清楚。有研究发现［7、8］nm23蛋白有与二磷酸核苷激酶（NDPK）相同的氨基酸序列和NDPK活性，因此认为nm23抑制转移能力可能与发挥NDPK样功能有关。它能使GDP还原为GTP，而GTP有调节细胞膜蛋白的功能，参与跨膜信息的传递。另外，nm23还参与微管的聚合和分解，影响细胞骨架状态，通过调节细胞内微管系统的状态和阻断肿瘤信息的传递而抑制肿瘤的转移［9］。本研究中nm23的阳性表达者为158例，阳性率为80.61%，其表达与性别、年龄、肿瘤位置差异性无统计学意义；与肿瘤分化程度之间的差异性有统计学意义，分化程度越高nm23蛋白表达的强度越高；与淋巴结转移情况的差异性有统计学意义，发生淋巴结转移组的nm23的表达强度低于未发生淋巴结转移组。有文献报道称，nm23基因的表达与肿瘤分化程度无关，但与肿瘤浸润深度和淋巴转移密切相关［10］。本研究与文献报道相符。nm23可以作为判断肿瘤有无转移的一个重要指标。

综上所述，结直肠癌中p53和nm23表达上调，与结直肠癌的发生、发展密切相关。两者在结直肠癌中的阳性表达呈负相关，p53高表达而nm23低表达的患者淋巴转移率高，肿瘤分化程度低，提示预后不良。联合检测结直肠癌组织p53、nm23蛋白情况可帮助判断肿瘤的严重程度、有效评价预后并辅助术后的基因靶向治疗。

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