慢性阻塞性肺疾病患者血清表面活性物相关蛋白D水平与肺功能及生活质量的相关性

符 琴 王 成

(昆明医科大学第一附属医院干部医疗科，云南 昆明 650032)

有研究发现血清表面活性物质相关蛋白(SP-D)可能与吸烟的肺损伤有关〔1，2〕。由于吸烟与慢性阻塞性肺疾病(COPD)的密切关系，SP-D可能参与COPD的发病过程。本研究旨在通过检测COPD患者血清中SP-D含量及与肺功能、SGRQ的关系，探讨血清中SP-D含量变化与COPD发病的关系，及其能否作为COPD患者检测的一个生物学标志。

1 对象与方法

1.1对象及分组 选择2011年1～10月就诊于我院的老年急性加重期COPD(AECOPD)患者30例为AECOPD组，男17例，女13例；年龄60～79〔平均(68.21±4.58)〕岁，吸烟指数>400支/年。选择同期于我院门诊定期随访的稳定期老年COPD患者35例为COPD组，男20例，女15例；年龄61～87〔平均(67.45±6.91)〕岁，吸烟指数>400支/年。选择同期我科在昆明某社区进行流行病学调查筛查出的健康人25例为对照组，男15例，女10例；年龄60～82〔平均(65.92±5.98)〕岁，吸烟指数>400支/年。

1.2纳入标准 符合2007年《中华结核和呼吸杂志》LOPD诊治指南〔3〕，即吸入支气管舒张剂后第1秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)均<70%。本次调查通过研究中心伦理委员会批准，入选对象均签署知情同意书。

1.3排除标准 ①有心血管疾病如扩张型心肌病、脉管炎、急性心肌梗死或既往发生心肌梗死等疾病；②支气管哮喘、变应性鼻炎、结节病、弥漫性肺间质纤维化、原发性支气管扩张、肺结核、胸腔积液等肺部疾病；③消化系统疾病如病毒性肝炎、溃疡性结肠炎、恶性贫血、胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎等；④肾脏系统基础病，如肾小球肾炎、局灶性肾小球硬化等；⑤内分泌疾病如甲状腺炎、糖尿病、甲亢等；⑥神经系统疾病，如急性脑脊髓膜炎、早老性痴呆、重症肌无力、格林-巴利综合征等；⑦ 免疫血液病如再生障碍性贫血、溶血性贫血、血小板减少性紫癜、骨髓增生异常综合征、纯红细胞再生障碍等；⑧患有精神疾患、皮肤病、肿瘤、未曾生育、近半年外伤史等。⑨对照组近1个月内无呼吸道感染史；⑩不愿意参加者。

1.4血清SP-D检测 采集清晨空腹肘静脉血液标本5 ml，室温放置30 min，3 000 r/min离心10 min，分离收集血清，于-70℃保存。测定前将样本置于室温复融，混匀，再次离心，取上清测定。采用双抗体夹心酶标免疫分析法测定血清标本中SP-D浓度(BioVendor)，检测范围1.56～400 ng/ml，标本常规5倍稀释，操作严格按说明书进行。用酶标仪(ELX800型，美国)在450 nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

1.5肺功能测定 采用肺功能仪(Max Autobox 6200)对COPD患者进行测定。主要检测指标为第1秒用力呼气容积(FEV1)、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%)、用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)，由同一熟练技师操作。

1.6生活质量问卷调查 应用圣乔治呼吸问卷(SGRQ)对所有知情同意的受试者进行自我评定。

1.7统计学方法 应用SPSS13.0软件进行One-Way ANOVA检验、Pearson等级相关分析。

2 结 果

2.1各组血清SP-D比较 AECOPD组患者血清SP-D水平〔(205.4±33.9)ng/ml〕显著高于COPD组〔(159.6±25.8)ng/ml〕和对照组〔(120.2±16.3)ng/ml,均P<0.01〕，COPD患者血清SP-D水平较对照组高(P<0.05)。

2.2各组血清SP-D与肺功能的相关性 AECOPD组、COPD组血清SP-D与肺功能中的FEV1%(r=-0.592，-0.364，P<0.05)，FEV1/FVC均呈负相关(r=-0.581，-0.352，P<0.05)。

2.3SGRQ的呼吸症状、活动受限、疾病影响的分值及总分的比较 SGRQ的呼吸症状、活动受限、疾病影响的分值及总分比较，AECOPD组>COPD组>对照组(P<0.05)。见表1。

表1 AECOPD组、COPD组与对照组SGRQ评分比较±s)

2.4AECOPD组和COPD组血清SP-D与SGRQ的相关性 AECOPD组和COPD组血清SP-D与SGRQ的呼吸症状、活动受限、疾病影响的分值及总分均呈正相关(P<0.05)。见表2。

表2 AECOPD组和COPD组血清SP-D与SGRQ的相关性(r值)

1)P<0.05

3 讨 论

COPD是一种以不完全可逆的气流受限为特征的常见慢性疾病，发病机制复杂，肺泡表面活性物质(PS)由脂质和蛋白质组成，其主要生理功能包括降低肺泡表面张力，维持肺泡结构相对稳定，防止肺萎陷和肺水肿，参与宿主呼吸系统防御机制等。特异性的肺SP包括亲水性的SP-A、SP-D和疏水性的SP-B、SP-C，它们在PS系统的结构、代谢及功能活性等方面都起着非常重要的作用。 SP-D属于钙依赖性C型凝集素大家族成员，基因定位于10号染色体的长臂，与甘聚糖结合蛋白和SP-A基因毗连。SP-D主要来源于肺泡Ⅱ型上皮细胞和呼吸性细支气管上Clara细胞，是一种由3个单体构成的亲水性钙结合胶原糖蛋白，分子量为43 kD〔4〕。单体由4个区域构成：一个氨基末端富含半胱氯酸区域、一个胶原区域、一个α-螺旋结构和一个C型凝集素区域，C型凝集素区域被认为是糖识别区。SP-D通过识别大多数细菌、病毒和真菌表面的糖类结构增强宿主防御吸入的微生物和对粉尘清除,作为肺部感染的第一道防御屏障，对先天性免疫反应起调节作用，调节肺的炎性反应及抗炎作用和减少氧化应激反应〔5〕。

目前认为测定血清中SP-D的含量对于多种肺部疾病的鉴别诊断可能具有重要的临床意义，其中包括COPD。Shakoori等〔6〕研究发现AECOPD患者血清SP-D含量比稳定期有明显增加。Lomas等〔7〕对COPD患者与吸烟者但没有气流受限血清SP-D检测结果显示COPD患者血清SP-D含量有增高。本研究也发现血清中SP-D比较，AECOPD组>COPD组>对照组，且与肺功能指标中的FEV1%，FEV1/FVC呈负相关。这与国外的结果一致。

那么COPD患者血清SP-D为何升高呢？COPD本身对BAL与血清中的SP-D浓度的影响相反，BAL和血清SP-D浓度受到肺泡Ⅱ型细胞分泌量和肺支气管黏膜对SP-D通透能力的综合作用影响，被认为是由肺内炎症介质溢出后进入外周循环所致。动物模型实验研究也显示肺损伤合并炎症增加了SP-D溢出到全身循环。但其具体机制尚不明确。

临床常用指标如肺功能测定很难对患者的躯体、情感、社会活动有一个全面的评价，而生活质量是反映患者疾病以及治疗对其生理功能、心理健康和生活等方面的综合评定指标，更能灵敏反映COPD真实的健康状况及需求。因为SGRQ是目前呼吸系统疾病中应用最广泛的问卷，已被许多不同语言的国家广泛应用于患者生活质量评估、治疗疗效监测、康复治疗效果和再住院、病死率的预计等研究〔8〕。 本研究结果提示COPD导致患者生活质量较正常人明显降低。另外，本研究结果显示AECOPD组及COPD组患者SGRQ呼吸症状、活动能力和疾病影响与血清中SP-D浓度成正相关，故检测血清SP-D水平有助于评价COPD患者尤其对于那些病情严重不能配合完成肺功能检查及SGRQ问卷患者的生活质量。

综上所述，测定血清中SP-D的含量对于COPD的鉴别诊断具有重要的临床意义，是评价COPD患者生活质量有效、敏感、可行的方法，值得推广。

4 参考文献

1Betsuyaku T，Kuroki Y，Nagai K，etal.Effects of ageing and smoking on SP-A and SP-D levels in bronchoalveolar lavage fluid〔J〕.Eur Respir J，2004；24(6)：964-70.

2Honda Y，Takahashi H，Kuroki Y，etal.Decreased contents of surfactant proteins A and D in BAI fluids of healthy smokers〔J〕.Chest，1996；109(4)：1006-9.

3中华医学会呼吸病学会慢性阻塞性肺疾病学组.慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2007年修订版)〔J〕.中华结核和呼吸杂志，2007；30(1)：8-17.

4Atochina EN，Beers MF，Hawgood S，etal.Surfactant protein-D， a mediator of innate lung immunity，alters the products of nitric oxide metabolism〔J〕.Am J Respir Cell Mol Biol，2004；30(3)：271-9.

5Wu H，Kuzmenko A，Wan S，etal.Surfactant proteins A and D inhibit the growth of Gram-negative bacteria by increasing membrane permeability〔J〕.J Clin Invest 2003；111(10)：1589-602.

6Shakoori TA，Sin DD，Ghafoor F，etal.Serum surfactant protein D during acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease〔J〕.Dis Markers，2009；27(6)：287-94.

7Lomas DA，Silverman EK，Edwards LD，etal.Serum Surfactant protein D is steroid sensitive and associated with exacerbations of COPD〔J〕.Eur Respir J，2009；34(1)：95-102.

8Engstrom CP，Persson LO，Larsson S，etal.Health-related quality of life and mortality in male patients with chronic obstructive pulmonary disease〔J〕.Am J Respir Crit Care Med，2002；166(5)：680.