辛伐他汀对高同型半胱氨酸血症模型大鼠急性心肌梗死再灌注后血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO水平的影响

刘新芳 姜雅秋

(吉林大学第一医院心血管内科，吉林 长春 130021)

有研究〔1～3〕证实内皮素(ET)-1、血管紧张素(Ang)Ⅰ、AngⅡ、髓过氧化物酶(MPO)等血管活性因子在心肌缺血再灌注过程中参与了心肌细胞再灌注损伤(MIRI)。高同型半胱氨酸血症(Hhcy)是冠心病的独立危险因素。已有研究证实〔4,5〕，Hhcy可导致急性心肌梗死(AMI)的发生，但其对心肌梗死后MIRI的影响目前少有报道。本实验探讨Hhcy是否可影响MIRI后上述因子的产生与释放，并评价辛伐他汀对Hhcy大鼠MIRI后心肌的保护作用并探讨其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1材料 8周龄(150～200 g体重)SD大鼠〔沈阳医学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK(辽)2010-0001，辽宁省科学技术厅签发〕，L-半胱氨酸(Sigma公司产品)，辛伐他汀(片剂、天津施维雅制药有限公司)，同型半胱氨酸(Hcy)、ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2方法 SD大鼠随机分为空白对照组、正常对照组、Hhcy模型组和辛伐他汀干预组，每组12只。空白对照组、正常对照组分别给予腹腔注射、灌胃生理盐水5 ml·kg-1·d-1；模型组给予腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml·kg-1·d-1，灌胃生理盐水5 ml·kg-1·d-1；干预组给予腹腔注射2% L-半胱氨酸5 ml·kg-1·d-1，灌胃辛伐他汀3.5 ml·kg-1·d-1，所有大鼠均饲以常规动物饲料(繁育鼠全价固体颗粒饲料，沈阳市于洪区前民动物饲料厂提供)和水。连续给药12 w后3%戊巴比妥钠腹腔注射40 mg/kg麻醉，结扎冠状动脉左室降支90 min,再灌注90 min，全程采用RM6240多导生理信号采集系统Ⅱ导联持续心电监测，观察结扎前、缺血及缺血再灌注的心电图改变，并采集各组大鼠静脉血检测血浆Hcy、ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO的水平，空白对照组只穿线不结扎。

2 结 果

2.1各组大鼠Hcy水平比较 12 w后,模型组〔(27.33±5.66)μmol/L〕、干预组〔(27.28±4.37)μmol/L〕大鼠血清Hcy水平高于空白对照组〔(3.56±1.12)μmol/L〕及正常对照组〔(3.40±1.28)μmol/L〕(P<0.01)。模型组、干预组大鼠血清Hcy水平无统计学差异，但均明显高于15.0 μmol/L(国际上规定的Hhcy水平)，说明Hhcy模型大鼠造模成功。

2.2心肌缺血再灌注心电图的变化 各组大鼠结扎冠状动脉左室降支90 min后及松开结扎线再灌注90 min后均表现为R波下降，ST段抬高并与T波融合为单项曲线，其中模型组PP间期延长；正常对照组、干预组PP间期无明显变化。模型组与正常对照、干预组两组间R波下降、PP间期延长存在明显差异。模型组出现4例心律失常(PQ、QRS、QT间期延长的广泛传导阻滞，室性期前收缩，室性心动过速和心室颤动)。结果表明Hcy对大鼠心肌具有明显的损伤作用，缺血再灌注后进一步加重。结扎前干预组大鼠心电图R波低下，缺血再灌注后进一步降低。而辛伐他汀对Hhcy大鼠缺血再灌注后有明显的保护作用，空白对照组心电图无异常。

2.3心肌缺血再灌注后ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO水平变化 正常对照组血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO均明显高于空白对照组(P<0.01)，模型组血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO均明显高于正常对照组(P<0.01)，模型组血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ、CRP、MPO水平亦均明显高于干预组(P<0.01)。见表1、表2。

表1 各组血清ET-1、AngⅠ、AngⅡ水平比较

表2 各组血清CRP、MPO水平比较

3 讨 论

心肌细胞缺血再灌注中常会有MIRI，MIRI导致心肌细胞超微结构、功能、代谢及电生理进一步损伤，临床上可出现血压骤降、心功能不全、心律失常甚至猝死，严重影响患者预后，ET-1、AngⅠ、AngⅡ、MPO等血管活性因子产生和释放增加是其机制之一〔1～3〕。本研究证实SD大鼠缺血再灌注后上述因子明显增加，Hhcy大鼠增加更明显，辛伐他汀则能显著降低Hhcy大鼠缺血再灌注后上述因子的水平，明显降低MIRI。

AMI再灌注治疗成功后，抬高ST段应该逐渐回落到等电位线，然而如果存在微循环损伤，抬高的ST段则仍持续存在。本实验表明Hhcy+缺血再灌注组再灌注后微血管损伤较缺血再灌注组明显，而辛伐他汀可显著降低Hhcy介导的MIRI。

ET-1、AngⅠ、AngⅡ均为已知的强内源性缩血管因子，在AMI缺血再灌注过程中，血管内皮细胞受损、心肌局部RAAS的激活等引起上述因子短时间大量生成及释放，促使冠脉痉挛、白细胞激活、局部儿茶酚胺过量、微血栓形成等，促进心肌细胞MIRI。

CRP为炎性反应、感染和组织损伤急性反应的主要敏感标志物之一，MPO为中性粒细胞活化标志物。AMI时，心肌坏死诱发急性炎症反应，中性粒细胞浸润并释放MPO到胞外〔6〕，产生氧化应激反应，导致内皮细胞功能受损，造成内皮细胞源性NO产生障碍，影响血管平滑肌舒张功能，从而减少心肌局部组织血流供应，导致心肌细胞坏死和凋亡增加，血清CRP、MPO水平明显增高。

Hcy是心血管独立的危险因素，本实验进一步证实Hhcy可促进ET-1、AngⅠ、AngⅡ、MPO等因子产生和释放增加，促进冠脉收缩和痉挛；同时，Hcy本身损伤血管内皮，加重MIRI,炎性因子CRP早期即参与其中。

辛伐他汀为经典的降血脂药物，对稳定斑块、抗氧自由基、抑制炎症反应、抑制缺氧复氧心肌细胞凋亡方面发挥作用。两项回顾性研究〔7,8〕表明，AMI患者在PCI术前长期应用他汀类药物可有效减少无复流现象的发生，极大改善AMI患者的预后。本研究证实辛伐他汀干预组虽不能降低Hcy水平，但可有效降低缺血再灌注后ET-1、AngⅠ、AngⅡ、MPO等因子产生和释放，进而减少缺血再灌注过程中微血管痉挛及白细胞浸润，减轻MIRI。

4 参考文献

1苏炎伦.CHD患者血浆ET-1、GMP-1 40和血清cTnI检测的临床意义〔J〕.放射免疫学杂志，2009；22(3):216-8.

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5Mendis S ,Ranatunga P,Jayatilake M，etal. Heperhomocysteinaemia in Srilandkan patients with coronary artery disease〔J〕.Ceylon Med J,2002;47(3):89-92.

6Cavusogh E,Ruwende C,Eng C,etal.Usefulness of baseline plasma myeloperoxidase levels as an independent predictor of myocardial infarction at two years in patients presenting with acute coronary syndrome〔J〕.Am J Cardiol，2007;99(10):1364-8.

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