中老年颊黏膜癌组织中Ki-67蛋白的表达及临床意义

徐亚娟 张艳秋 金志巍 刘素梅 刘文书

(吉林省肿瘤医院口腔颌面肿瘤外科,吉林 长春 130012)

颊黏膜癌是一种常见的恶性肿瘤，其中90%以上是鳞癌。正常颊黏膜细胞转化为癌细胞的重要环节是细胞过度分裂与增殖，可通过对细胞增殖活性的研究，探索口腔癌发生、发展过程的机制。Ki-67 是反映细胞增殖的标志性抗原，其表达高低可反映细胞增殖活性。本研究初步探讨Ki-67在颊黏膜鳞癌组织中的表达及临床意义，为临床诊治提供一种新思路。

1 资料与方法

1.1一般资料 我科2009年1月至2012年1月收治的住院患者中35 例颊黏膜癌、15 例正常颊黏膜组织手术标本。术前均未接受放、化疗。所有病例均由明确的病理诊断确诊。35例颊黏膜癌患者中男20例，女15例，年龄40～80岁，平均60岁；有淋巴结转移18例，无淋巴结转移17例;临床分期中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分别有7、12、11、5例;病理分级中高、中、低分化分别有13、14、8例。同期切取15例癌旁组织(距癌边缘≥5 cm)作为对照组，年龄40～60岁，平均50岁。所有标本均经10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片。

1.2检测方法 免疫组化染色，所有病理标本均为石蜡标本，作石蜡连续切片2张。鼠抗人Ki-67单克隆抗体兔抗人多克隆抗体购自北京中山公司。抗原修复液为pH6.0 柠檬酸。DAB 显色。用PBS缓冲液(购自北京中山金桥) 代替一抗作阴性对照，细胞质或细胞核中呈现棕黄色染色颗粒为阳性细胞。

1.3结果判定 Ki-67定位于胞核，阳性染色细胞呈浅棕色或棕黄色。在400倍镜下按阳性细胞数占总细胞数分为4级。(-)：无阳性细胞，为阴性;(+)：阳性细胞10%～30%;()：阳性细胞30%～60%;()：阳性细胞>60%。

1.4统计学方法 应用SPSS18.0 软件行χ2检验。

2 结 果

2.1两组Ki-67表达情况 Ki-67阳性表达主要定位于细胞核，两组阳性率比较(颊黏膜鳞癌组80.0% vs 癌旁组织组26.7%)差异有统计学意义(P<0.05)。其中(+) 28 vs 4例，(-)7 vs 11例。

2.2Ki-67 蛋白的表达与口腔鳞癌临床病因素的关系 Ki-67的异常表达与淋巴结转移、分化程度和TNM分期有关(P<0.05);在阳性淋巴转移组呈高表达，在淋巴转移阴性组呈低表达，差异有统计学意义(P<0.05)；在高、中、低分化组随分化程度降低而升高，差异有统计学意义(P<0.05)；与年龄、性别及肿瘤大小无关(P>0.05)。见表1。

表1 Ki-67蛋白表达与颊黏膜鳞癌临床病理因素的关系(n)

2.3Ki-67在颊黏膜癌中表达与预后关系 本组患者术后62例获得随访，随访率为94%，随访时间2～100个月。Ki-67低表达组中位生存时间49个月。

3 讨 论

Ki-67为细胞增殖的一种标记，参与细胞周期的调控，可作为诊断和预测肿瘤对治疗的敏感度及其结局等方面的标志物，在肿瘤的分级、增生程度、预后的预测中均具有一定的意义。Ki-67单克隆抗体可标记G1中后期、S期、G2期和M期细胞核抗原。研究表明其过度表达提示细胞增殖过度，是较理想地反映肿瘤细胞增殖活性的指标，已经证实其与细胞增殖、病变恶性程度密切相关〔1，2〕。本研究结果与相关文献〔3，4〕报道一致。

Ki-67蛋白的异常表达与淋巴结转移、分化程度和TNM 分期有关，可能与颊黏膜鳞癌发生、发展、侵袭和转移关系密切。本研究表明Ki-67能可靠反映细胞的增殖活性，可作为颊黏膜癌发生、发展的重要指标之一。另外，颊黏膜癌的发生通过其表达产物作用于细胞生长、分化及代谢过程，最终导致癌变。Ki-67有望成为颊黏膜癌生物学行为的参考指标。检测Ki-67在颊黏膜癌中表达可以有助于判断颊黏膜癌的恶性程度、分期及预后，对指导临床诊断和治疗有重要意义。

4 参考文献

1Bologna-Molina R，Mosqueda-Taylor A，Lopez-Corella E，etal.Comparative expression of syndecan-1 and ki-67 in peripheral and desmoplastic ameloblastomas and ameloblastic carcinoma〔J〕.Pathol Int， 2009；59(4)：229-33.

2Pei DS，Qian GW，Tian H，etal.Analysis of human Ki-67 gene promoter and identification of the sp1 binding sites for Ki-67 transcription〔J〕. Tumour Biol，2012；33(1)：257-66.

3Yoshida T，Sano T，Kanuma T，etal.Usefulness of cintec(r) plusp16 /Ki-67 double-staining in cytological screening of cervical cancer〔J〕. Acta Cytol，2011；55(5)：413-20.

4Wiwanitkit V. Ki-67 as proliferative marker of thyroid〔J〕.Indian J Cancer，2011；48(3):378.