结肠腺癌患者癌组织中TPX2、PTEN和Ki67 的关系及临床意义

才保加 祁玉娟 周 为 王晓龙

(青海大学附属医院胃肠外科，青海 西宁 810001)

肿瘤发生发展过程中基因和蛋白表达的失调对肿瘤的进展有重要作用。增殖活跃是肿瘤生长和侵袭性强的重要标志〔1〕。TPX2是一种微管相关蛋白，对于有丝分裂纺锤体的稳定有重要作用〔2〕。相关研究认为其高表达可能是肿瘤进展的重要因素〔3〕。PTEN是一种肿瘤抑制基因，定位于人染色体10q23。PTEN编码的磷酸酶可调节细胞周期和凋亡进程〔4〕。Ki67是与细胞周期密切相关的细胞增殖标志物，G1、S、G2和M期有表达，G0期无表达〔5〕。研究认为Ki67表达的增殖指数与许多肿瘤的浸润转移及预后密切相关〔6〕。本文关注结肠腺癌中TPX2、PTEN和Ki67蛋白的表达特征、相关性及临床意义。

1 材料和方法

1.1材料 选取2010年1月至2013年6月在我院行结肠腺癌根治术的患者122例作为观察组，纳入均符合世界卫生组织(WHO)中关于结肠腺癌的诊断标准。其中男62例，女60例，年龄50～70〔平均(65.7±7.6)〕岁。有淋巴结转移46例，无淋巴结转移76例。选择本组中部分病例切端经病理证实为正常的结肠黏膜组织73例作为对照组，其中男43例，女30例，年龄53～69〔平均(65.1±7.0)〕岁。两组一般临床资料无明显差别(P>0.05)，具有可比性。

1.2TPX2、PTEN和Ki67蛋白的检测 TPX2、PTEN和Ki67蛋白浓缩液的试剂盒均购自基因科技(上海)有限公司。按不同比例进行稀释后先行预实验，并由病理医师判断，选取最理想的配比浓度进行正式实验。TPX2、PTEN和Ki67蛋白的检测应用免疫组化SP法，均采用手工染色法，DAB染色，操作均由同一病理技师完成，严格按说明书进行，严格质量控制，减少人为误差。

1.3结果判定方法 TPX2的阳性部位为细胞核，PTEN的阳性部位为细胞质和(或)细胞核，Ki67的阳性部位为细胞核，均为出现棕黄色颗粒为阳性反应的细胞，选择肿瘤细胞集中区域的10个400倍视野进行计数后合并计算阳性率。以阳性细胞≥25%为阳性，以<25%为阴性。

1.4统计学处理 采用SAS6.12软件进行χ2或相关分析。

2 结 果

2.1TPX2、PTEN和Ki67在两组中表达阳性率的比较 观察组中TPX2和Ki67表达的阳性率明显高于对照组，PTEN表达的阳性率明显低于对照组(P<0.01)。见表1。

2.2观察组中TPX2、PTEN和Ki67的表达在不同临床病理特征中的比较 观察组中TPX2、PTEN和Ki67表达的阳性率与淋巴结转移、远处转移、浸润深度和临床分期密切相关。见表2。

表1 两组TPX2、PTEN和Ki67表达阳性率比较〔n(%)〕

表2 观察组中TPX2、PTEN和Ki67的阳性表达在不同临床病理特征中的关系〔n(%)〕

2.3观察组中TPX2、PTEN和Ki67表达的相关性 观察组中TPX2和Ki67(r=0.45，P=0.043 2)的表达呈正相关，而PTEN和Ki67(r=-0.48，P=0.030 4)的表达呈负相关。

3 讨 论

结肠腺癌病变发展是高增殖的过程，其中伴有异常增生、分化障碍等生物学行为过程。在此过程中，与增殖相关的蛋白常对病变发展有重要影响。TPX2是一个分子量是100 kD的核增殖相关蛋白，其基因定位于人染色体20q11.2，其表达受细胞周期的调控，有研究显示TPX2只在G1～S交界期中表达，而当细胞分裂完成后就消失〔7〕。也有观点认为在S期和G2期，人TPX2分布在细胞核，而在分裂期TPX2的表达与有丝分裂的纺锤体分布密切相关，此时TPX2的靶向作用附着于纺锤体的微管，有效地保证了正常的纺锤体的极性〔8，9〕。也有观点认为TPX2还可能对核因子、增殖细胞核抗原有重要的调控作用〔10，11〕。PTEN对肿瘤的发生具有明显的抑制作用，PTEN也具有磷酸酯酶活性〔12〕，其不仅能通过脱磷酸化的途径对细胞内信号进行影响，还可以对肿瘤细胞的增殖和黏附起到明显的作用〔13〕。也有观点认为PTEN可以诱导细胞凋亡，有效抑制细胞的失控性增生〔14〕。近来的多项研究发现，在人类多种肿瘤和遗传性肿瘤易感综合征疾病中存在PTEN的缺失和突变，在不同肿瘤中PTEN的表达与病人的预后有一定的相关性〔15，16〕。Ki67存在于细胞周期的G1、S、G2和M期，其蛋白表达在细胞核中，其功能与细胞的有丝分裂密切相关〔17〕。

本实验结果提示TPX2和Ki67高表达、PTEN低表达是促进肿瘤进展的重要因素。Ki67作为标记肿瘤增殖的重要蛋白，高表达时提示肿瘤处于进展期，并具有高增殖的特征。而TPX2作为微管相关蛋白，是微管组装、纺锤体形成的关键蛋白，TPX2高表达使肿瘤的恶性生物学行为和促使细胞周期失调的功能明显增强，加速肿瘤的进展。PTEN是肿瘤抑制蛋白，其表达丢失是肿瘤进展的重要因素。本实验结果提示3种蛋白异常表达可以加速肿瘤的进展。由于以上因素均为判断肿瘤生物学行为、恶性程度及预后的重要指标，因此联合检测TPX2、PTEN和KI67的表达可以在一定程度上反映肿瘤的预后。TPX2的作用是通过促进肿瘤细胞的增殖起作用的，PTEN抑癌作用是通过抑制肿瘤细胞增殖发挥其生物学功能的。

总之，结肠腺癌中TPX2和Ki67高表达、PTEN低表达时对病变的发生和进展均具有重要促进作用。对增殖的影响可能是TPX2和PTEN作用的主要方式。后续研究可以关注TPX2、PTEN和Ki67对结肠腺癌的预后判断的作用，不仅可以为临床提供有效依据，还可能成为治疗的靶点。

4 参考文献

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