三种血吸虫诊断试剂联合检测对血吸虫病的诊断价值

杨 慧，蔡爱玲，彭芝梅

[荆州市第三人民医院(湖北省血吸虫病临床诊疗中心)检验科，湖北 荆州 434001]

血吸虫病是一种严重危害人民健康的寄生虫病，在中国血吸虫病已列入继获得性免疫缺陷综合症、结核和肝炎之后重点防治的重大传染病之一。目前对血吸虫病的实验室检测主要以病原学检查和免疫学检测为主。病原学检查对中度和低度流行区粪样检测的敏感性较差，而免疫学检测试剂因其敏感性和特异性较高在临床实验室中应用广泛[1]。我们通过分析荆州市第三人民医院血吸虫病患者的检测结果，发现采用单一方法检测血吸虫病其结果不是十分理想，会导致部分患者漏检。目前有关合理利用免疫学检测试剂检测血吸虫病的研究资料较少。为此，我们将3种均获得国家食品药品监督管理局医疗器械注册证的血吸虫检测试剂进行联合检测，观察3种试剂对血吸虫病的诊断价值及单独和联合检测的意义。

材料和方法

一、研究对象

血吸虫病患者348例，男218例，女130例，年龄29～71岁，均为2011年11月至2012年10月来荆州市第三人民医院检查的疫区患者。其中慢性血吸虫病患者295例，男186例，女109例，年龄29～71岁;晚期血吸虫病患者53例，男32例，女21例，年龄36～52岁，均经病原学确诊。以100名健康对照者作为正常对照组，男61名，女39名，年龄20～65岁，均为非血吸虫疫区体检正常人群。

二、试剂与方法

血吸虫抗体(IgG)检测试剂盒[胶体染料法(dipstick dye immunoassay，DDIA)]由无锡赛德科技开发有限公司生产(国食药监械(准)字2010第3400930号)。血吸虫虫卵抗体检测试剂盒[胶体金免疫渗滤斑点法(dot-immuogold filtration assay，DIGFA)]由岳阳迅超生物技术有限公司生产(国食药监械(准)字2011第3400089号)。血吸虫循环抗原测定试剂盒[酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbet assay，ELISA)]由四川迈克生物科技股份有限公司生产(国食药监械(准)字2009第3400456号)。

三、统计学方法

采用SPSS 11.0统计软件进行统计分析，组间率的比较用χ2检验，诊断效能评价以敏感性和特异性表示，P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、各组血清ELISA、DDIA及DIGFA检测结果比较

慢性和晚期血吸虫病患者DDIA和DIGFA的检出率明显高于ELISA(P＜0.05)，而DDIA和DIGFA的检出率差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 各组ELISA、DDIA及DIGFA检测结果[例(%)]

二、2种血吸虫抗体检测试剂DDIA和DIGFA对不同季节慢性血吸虫病患者的检出率分析

在4个季节中对慢性血吸虫病患者的检出率差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表2 DDIA和DIGFA对不同季节慢性血吸虫病患者的检出率 [例(%)]

三、ELISA、DIGFA和DDIA单独及联合检测诊断血吸虫病效能的比较

DDIA+DIGFA联合检测和ELISA+DDIA+DIGFA联合检测均可提高诊断的敏感性，分别为93.9%、99.3%，与单项检测相比，差异有统计学意义(P ＜0.05)。见表3。

表3 ELISA、DIGFA和DDIA单独及联合检测血吸虫病的敏感性和特异性比较

讨 论

控制血吸虫病是我国公共卫生事业面临的一大挑战，因此防止血吸虫病漏诊而加重血吸虫感染所导致的病情显得尤为重要。随着以传染源控制为主的综合性防治措施的实施，我国血吸虫病流行区人群血吸虫病感染率明显下降，而且感染度也以轻度为主，如仅采用病原学检查的方法筛检疫区血吸虫病患者不仅费工、费时，而且也会因其较高的漏检率严重影响血吸虫病防治工作的质量。近3年来，我国自行研发的一些血吸虫病免疫学诊断试剂陆续获得国家注册文号，在血吸虫病诊治方面发挥了重要作用。然而每种方法在检测性能方面各有利弊，为此我们采用多种方法联合检测来提高疾病的诊断效能。

本研究结果显示，使用循环抗原检测血吸虫病，无论是慢性血吸虫病还是晚期血吸虫病，其敏感性均较低，分别为19.3%、13.2%。这可能与血吸虫的免疫逃避机制有关。血吸虫在生活史各发育阶段不断地更换抗原，虫体各阶段抗原的特异或差异表达使试剂检测效果难以达到理想状态[1-2]。循环抗原检测方法是一种检测急性感染和调查流行率的理想工具[3-4]，但由于各地加强了对血吸虫的防治工作，急性血吸虫病的发病率急剧下降。血吸虫病患者体内循环抗原的含量非常少，单独使用这种方法检测血吸虫病，尤其是对于轻度感染地区的评估不是很理想。

DIGFA和DDIA均为血吸虫病抗体检测方法，前者以虫卵组分抗原作为诊断抗原，后者以成虫组分抗原作为诊断抗原，均具有较高的敏感性和特异性[5-7]。本研究结果显示 DDIA和DIGFA的阳性率无明显差异，但单一的使用某一种方法会造成27.8% ～34.2%的慢性血吸虫病患者出现假阴性结果，然而两者联合检测，可以提高诊断的敏感性，同时2种方法均简便、快速，不需任何专门设备和特殊操作技术，适用于各级医疗单位。

本研究结果显示，在慢性血吸虫病的免疫学检测方面，单项检测敏感性DDIA＞DIGFA＞ELISA;而在晚期血吸虫病的免疫学检测方面，单项检测敏感性DIGFA ＞DDIA＞ELISA。出现这种结果可能与检测的晚期血吸虫病例数过少有一定的关系，需要进一步收集数据。联合检测中ELISA+DDIA联合检测可使敏感性提高到80.3%，DDIA+DIGFA联合检测可使敏感性提高到93.9%，ELISA+DDIA+DIGFA联合检测可使敏感性提高到99.3%，明显优于单项检测。据文献报道，对血吸虫感染宿主进行抗体、抗原和免疫复合物检测的最适时期很不一致，各具其规律性，单一地使用某一种方法检测可能会漏检感染前期或感染后期的患者[8]。因此联合检测在临床应用中可以提高血吸虫病的检出率，具有重要的价值。

[1]鞠 川，冯 正，胡 薇.日本血吸虫病免疫诊断方法的研究进展[J].国际医学寄生虫病杂志，2006，33(5):250-255.

[2]张文华，陈朝礼，刘永才，等.血吸虫病控制后检测循环抗原和抗体比较研究[J].寄生虫病与感染性疾病，2006，4(4):165-168.

[3]黄 进，何其林，李 萍，等.两种血吸虫病免疫诊断试剂的比较研究[J].国际医学寄生虫病杂志，2010，37(3):152-155.

[4]朱明东，邵丰尧，钟春梅.快速诊断日本血吸虫病胶体金免疫层析法的建立[J].国际流行病学传染病学杂志，2010，37(6):383-385.

[5]曹国群，何 伟，余传信，等.血吸虫抗体(IgG)检测试剂盒(胶体染料法)临床诊断效能[J].中国血吸虫病防治杂志，2010，22(6):583-586.

[6]阮水良，刘德许，王 波，等.血吸虫性肝纤维化患者胰岛素样生长因子-1与肝功能间的关系[J].检验医学，2010，25(1):17-20.

[7]Demerdash ZA，Diab TM，Aly IR，et al.Diagnostic efficacy of monoclonal antibody based sandwich enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)for detection of Fasciola gigantica excretory/secretory antigens in both serum and stool[J].Parasit Vectors，2011，4:176.

[8]McWilliam HE，Driguez P，Piedrafita D，et al.Novel immunomic technologies for schistosome vaccine development[J].Parasite Immunol，2012，34(5):276-284.