HPLC法测定理气解郁丸中橙皮苷的含量

南京同仁堂药业有限责任公司，江苏 南京 210012

HPLC法测定理气解郁丸中橙皮苷的含量

施明王业盈

南京同仁堂药业有限责任公司，江苏 南京 210012

目的研究测定理气解郁丸中橙皮苷的含量的方法。方法采用高效液相色谱法，以甲醇-0.1%磷酸溶液(45∶55)为流动相；流速为1.0ml/min；检测波长为283nm。结果橙皮苷线性范围为0～1.140μg，平均回收率为100.3%，RSD=2.6%。结论采用高效液相色谱法测定理气解郁丸中的橙皮苷含量，具有快速、结果准确、操作简便的优点，可以用于理气解郁丸的质量控制。

理气解郁丸；HPLC；橙皮苷

理气解郁丸是南京同仁堂药业有限责任公司研制的中药新药，由陈皮、木香、半夏、延胡索等十余味中药组成，具有舒肝理气，解郁的功能，用于胸肋胀闷，气郁不舒。陈皮为其君药，为有效控制药品质量，采用高效液相色谱法测定该药品中橙皮苷的含量。

1 仪器与试药

日本岛津高效液相色谱仪，LC-10AD泵，SPD-10A型检测器，电子分析天平(北京赛多利斯天平有限公司)。橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号0709-9803)。理气解郁丸(南京同仁堂药业有限责任公司)。缺味阴性对照样品：按照制剂工艺制备相应的缺味处方药。色谱级甲醇(Fiser)、双蒸水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱 SinoChrom ODS-BP柱(5μm，4.6×250mm)；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(45:55)；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：283nm。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备取适量橙皮苷对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg橙皮苷的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备取本品1g，研细，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，水浴加热提取4小时。提取液水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得[1]。

2.2.3 阴性对照品溶液的制备取缺陈皮的样品，同供试品溶液的制备项下操作。

2.3 干扰试验分别吸取对照品、供试品溶液、阴性对照溶液各5μl，按2.1项下的色谱条件分别进样测定，结果阴性无干扰[2]。

2.4 线性考察精密吸取0、1、2、3、4、5ml橙皮苷对照品溶液，将其转移至10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度[3]。分别吸取六个浓度的橙皮苷对照品溶液5μl，注入高效液相色谱仪测定其峰面积。以峰面积Y对进样量X(μg)进行线性回归，得Y=10.4381+2057.1554X，r=0.9997(n=6)，其线性范围为0～1.140μg。

2.5 精密度试验取同一批次的样品1.0g，精密称定，按2.2.2项下的方法制备成供试品溶液，连续进样6次，体积5μml，测定其峰面积[4]。计算RSD为1.35%，符合要求，表明该方法的精密度较好。

2.6 重现性试验精密称取6份同一批号的样品，按照2.2.2项下的方法制成供试品溶液，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为1.28%，符合要求。表明该方法的重现性较好。

2.7 稳定性试验取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8h进样，进样体积5μl，注入高效液相中测定其峰面积，计算得RSD为2.25%，符合要求。表明供试品溶液在8h内比较稳定。

2.8 加样回收率试验取已知含量的样品约0.5g，精密称定，加入一定量的橙皮苷对照品，按2.2.2项下的方法制成供试品溶液，测定其峰面积。计算得平均回收率为100.3%，RSD为2.6%，均符合要求，说明该方法可以用于橙皮苷的含量测定。具体结果见表1所示。

表1 加样回收率试验结果(n=2)

2.9 样品含量测定取三批理气解郁丸样品各1g，精密称定，按2.2.2项下的方法制备成供试品溶液，测定橙皮苷的含量，结果见表2所示。

表2 样品含量测定结果(n=2)

3 讨论

本试验考察了索氏提取、回流提取、超声提取方法，结果表明索氏提取时间过长；回流提取杂质多、干扰大；超声提取检测周期短、无杂质干扰。提取溶剂的选择，考察了甲醇、乙醇，结果甲醇提取完全，峰形好。

[1] 赵晓红，杨莹，申睿，等．HPLC测定复方豆蔻合剂中橙皮苷含量[J]．中国实验方剂学杂志，2013，19(11)：61-63.

[2]奚永兰，徐富柱．高效液相色谱法测定乳宁颗粒中芍药苷的含量[J]．中国民族民间医药，2012，21(6)：42-43.

[3]雷虹，冯伟红．HPLC法测定枳术胶囊中橙皮苷的含量[J]．中国实验方剂学杂志，2005，11(4)：5-6.

[4] 王亚莉，程龙．杜仲颗粒质量标准研究[J]．中国民族民间医药，2011，20(5)：34-35.

ContentdeterminationofhesperidininLiqijieyupillssolutionbyHPLC

Shi Ming Wang Ye-ying

Nanjing Tongrentang Pharmaceutical CO. LTD. Nanjing 210012,China

ObjectiveTo determine the content of Hesperidin in Liqijieyu pills.MethodsA HPLC method was used. The mobile phase consisted of methanol-0.1% phosphate(45∶55).The flow rate was 1 mL/min. The detection wavelength was at 283 nm.ResultsThe linear range of Hesperidin was 0～1.140μg. The average recovery rate was 100.3%(RSD=2.6%).ConclusionThe HPLC method is accurate,simple and suitable for quality studies of the Liqijieyu pills.

Liqijieyu pills；HPLC；Hesperidin

R284.1

A

1007-8517(2014)06-0025-02

2014.01.15)