西洋参废渣中总多糖的再提取

范正达 邢瑶

·实验研究·

西洋参废渣中总多糖的再提取

范正达 邢瑶

目的 西洋参废渣中总多糖的提取及含量测定。方法 用70℃、80℃、90℃热水分别浸泡提取西洋参废渣, 并利用苯酚-浓硫酸法比色测定不同提取条件下西洋参总多糖得率。结果 西洋参废渣经90℃、3 h提取后总多糖含量最高, 占西洋参总多糖的80%。结论 西洋参废渣中总多糖的再提取技术对改进西洋参制剂提取工艺具有指导作用。

西洋参废渣；总多糖；再提取

西洋参(Panax quinquefolium L)又名西洋人参、洋参、花旗参, 为五加科植物。西洋参主产于美国、加拿大。西洋参味苦, 性凉, 入心、肺、肾经, 功能以补益为主, 可滋阴降火、益气生津；西洋参中的主要药理成分是西洋参皂苷、西洋参多糖等, 现代研究表明, 西洋参多糖的免疫增强功能强于西洋参皂苷［1］, 还具有抗辐射、抗衰老、增强特异性和非特异性免疫调节功能、升高白细胞数, 其对肝炎、肿瘤患者的免疫功能低下［2］有很好的治疗保健作用。护肝宝口服液为常州三院医院制剂(苏药制字Z04001020), 具有增强机体免疫功能, 提高肝脏解毒能力等作用, 临床使用多年, 疗效确切。该制剂组方主药为西洋参, 在生产中西洋参采用70%乙醇渗漉的提取方法。作者发现西洋参废渣中仍残存了不少的西洋参多糖, 渗漉后的西洋参残渣不再使用。无形中浪费了大量的资源, 因此可采取措施充分利用这一资源。本课题利用西洋参多糖易溶于热水这一特性,采用热水浸泡提取多糖溶液并直接用于投料, 综合利用资源, 该方法简单、经济实用, 对制订人参、西洋参等名贵药材工业化提取工艺具有指导意义。现报告如下。

1 材料

1.1 材料 西洋参废渣(西洋参饮片经70%乙醇渗漉) (西洋参饮片由常州市泰和中药饮片有限公司提供, 批号：120301)。

1.2 试剂 葡萄糖(常州医药公司提供, 批号：110911),浓硫酸、苯酚、盐酸均为分析纯。

1.3 仪器 UV1600紫外分光光度仪(北京普析通用仪器有限公司), 分析天平, 电子恒温不锈钢水浴锅。

2 方法与结果

西洋参废渣用热水提取, 经多级处理除去脂类、单糖、双糖、低聚糖、氨基酸、蛋白质等杂质, 制得西洋参总多糖,总多糖溶解与苯酚-硫酸试剂显色, 在490 nm吸收波长下用精制葡萄糖测得西洋参废渣中总多糖的含量［3］。

2.1 西洋参总多糖的提取

2.1.1 西洋参废渣中总多糖的提取 基于于容敏等［4］对于西洋参多糖组分提取条件的优化考察, 设计提取方法如下：取9份西洋参残渣(过10目, 不过20目), 2 g/份, 分别用50 ml纯化水浸泡1 h；9份样品分成3批, 每批3份,分别加入70℃、80℃、90℃的水浴锅中；每种温度条件下又分别恒温加热提取1、2、3 h, 期间分别于40、80、120 min时倒出提取液, 并重新在药渣中加入50 ml纯化水1次；每份样品合并2次提取液, 冷却, 定容至100 ml；抽滤,除去杂质, 得上清液。对于每份样品, 取20 ml上清液,加入95%乙醇14.5 ml调醇度至40%, 静置1 h, 抽滤得上清液, 取20 ml 上清液加95%乙醇53 ml调醇度至80%,静置12 h, 抽滤得黏稠的浆液, 用乙醇冲洗, 50℃干燥,得到淡棕色的薄膜状组分1。

2.1.2 西洋参饮片中总多糖的提取 取2份西洋参饮片, 2 g/份, 分别用50 ml纯化水浸泡1 h；在80℃水浴锅中分别浸泡2 h、3 h, 方法如2.1.1项, 得薄膜状组分2。

2.1.3 西洋参渗漉液中总多糖的提取 取医院制剂室70%乙醇渗漉所得滤液20 ml, 加20 ml 95%乙醇调至80%醇度,静置12 h, 抽滤得黏稠的浆液, 用乙醇冲洗, 50℃干燥,得到黄棕色的薄膜状组分3。

2.2 样品与标准品溶液的配制

2.2.1 西洋参废渣的总多糖溶液制备 取废渣提取组分1溶于热水中, 25 ml 定容；取15 ml加6 mol/L盐酸10 ml, 于100℃热水中加热水解30 min, 冷却, 再取15 ml水解液25 ml定容稀释, 得待测液1。

2.2.2 西洋参饮片浸提液和西洋参渗漉液的总多糖溶液制备 取组分2, 3, 分别溶于100℃热水中, 100 ml 定容；取15 ml加6 mol/L盐酸10 ml, 于100℃热水中加热水解30 min, 冷却, 得待测液2, 3。

2.2.3 标准品的配制 精密称定0.050 g干燥恒重的葡萄糖, 用纯化水溶解后500 ml定容, 作为标准溶液。

2.3 各制备液中总多糖含量测定

2.3.1 标准曲线的绘制 分别取葡萄糖标准液0、1、2、4、8、16、20 ml, 定容至25 ml；每份样品各取2 ml, 依次加入6%的苯酚2 ml、浓硫酸5 ml, 立即摇匀, 静置30 min,后在490 nm波长下测吸光度, 绘制得标准曲线, 得回归方程：Y=0.0217X-0.0183。

2.3.2 渗漉液中西洋参总多糖的含量测定 取渗漉液和西洋参饮片浸提液各2 ml, 依次加入6%的苯酚2 ml、浓硫酸5 ml, 摇匀, 静置30 min后, 分别在490 nm波长下测吸光度, 算出供试品中多糖浓度, 求得率。见表1。

表1 西洋参渗漉液提取总多糖的得率(g/g)

2.3.3 废渣中西洋参总多糖的含量测定 测定方法如上,测定结果见表2。

表2 不同提取条件下所得西洋参废渣中总多糖的得率对比(g/g)

2.3.4 80℃水提西洋参饮片中总多糖的含量测定。测定方法同上, 结果见表3。

表3 西洋参饮片的水提液中多糖得率与废渣得率的对比(g/g)

3 讨论

3.1 实验结果表明, 经70%的乙醇提取后的西洋参废渣中残留着约80%～90%的总多糖, 这表明此工艺未能充分、合理利用西洋参中的有效成分, 这无疑是极大的浪费。本次实验采用热水浸提的方法能继续回收残渣中约90%的总多糖。

3.2 根据理化性质, 西洋参多糖具有在热水中长时间煎煮容易水解的特性, 故采用热水浸泡法提取洋参多糖, 方法简单、实用。

3.3 由实验数据分析, 西洋参废渣在90℃、浸提3 h时,废渣中的总多糖得率最高, 且高于(80℃、3 h)和(90℃、2 h)条件下的得率。制剂生产可根据实验结果进行工艺改进, 即西洋参经醇提后用恒温热水浸泡, 过滤后的滤液加入生产配料中。

［1］ 钱农, 杨吉成, 盛伟华, 等.人参多糖及皂苷等5种中药提取物促诱生人干扰素的研究.苏州医学院学报, 1997, 17(1):31-32.

［2］ 杜维霞, 刘秀敏, 赵乃坤.复方洋参多糖免疫增强剂对荷瘤和辐射小鼠T淋巴细胞亚群的影响.中国实验临床免疫学杂志, 1997, 9(4):58-61.

［3］ 陈军辉, 谢明勇, 聂少平, 等.西洋参多糖的含量测定.食品与生物技术学报, 2005, 24(5):72-76.

213000 常州第三人民医院药事科(范正达)；南京中医药大学2012届实习生(邢瑶)