龙胆苦苷药理学活性及药动学研究进展*

★ 曾文雪 宋小玲 张尧 肖书猛 王跃生

(1.江西中医药大学 江西 南昌 330006；2.南昌大学第一附属医院 江西 南昌330006；3.江西本草天工科技有限责任公司 江西 南昌330006； 4.中国中医科学院中药研究所 北京 100700)

龙胆属植物在中医临床中具有广泛的应用，龙胆苦苷作为龙胆属植物的主要药效成分之一，广泛存在于东北龙胆、秦艽、红花龙胆、坚龙胆等植物中。龙胆苦苷在结构上属裂环环烯醚萜苷类化合物，龙胆苦苷英文名gentiopicroside，化学名5-Ethenyl-6-(β-D-glucopyranosyloxy)-5,6-dihydro-1H,3H-pyrano[3,4-C]pyran-l-one[1]，分子式为C16H20O9，易溶解于水、甲醇及乙醇等溶剂[2]，在23℃下的表观油水分配系数lgP为-1.21，说明龙胆苦苷亲水性较强，亲脂溶性较差[3]，这将影响龙胆苦苷的透皮吸收和口服吸收。本文对龙胆苦苷药理学特性及其在体内外的药物动力学进行综述，为后续的研究奠定一定的基础。

1 龙胆苦苷药效学研究概况

1.1 抗炎镇痛作用 龙胆苦苷可以减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀和角叉菜胶及酵母多糖A所致大鼠足跖肿胀，抑制冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增加[3]；对于蛋清致大鼠足趾肿胀急性炎症模型及大鼠肉芽肿慢性炎症模型均有一定的抑制作用[4]。龙胆苦苷能提高痛阈值，对热和化学刺激引起的疼痛，表现出明显的镇痛作用[4]。

1.2 保肝利胆作用 龙胆苦苷对四氯化碳、TAA等化学物质所致的肝损伤及免疫性肝损伤具有保护作用。龙胆苦苷可以保护肝细胞膜，可明显降低多种急慢性肝损伤动物血清氨酶，减轻肝组织片状坏死、肿胀及脂肪变性的程度，可以增加尿嘧啶核苷酸合成作用，促进肝脏的蛋白质合成[5]。肝损伤模型小鼠尾静脉注射龙胆粉针剂10天后，其血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性显著降低；α-萘异硫氰酸酯(ANIT)黄疸模型大鼠尾静脉注射大剂量龙胆粉针剂，其血清TB及ALT水平被抑制，中小剂量能显著降低模型大鼠的血浆ALT，但对TB作用不明显[6]。小鼠灌服龙胆苦苷后，四氯化碳急性肝损伤模型小鼠的血清ALT、AST水平降低，其肝组织中的谷胱甘肽过氧化物酶活力增加，胆流量增加，胆红素浓度提高[7]。龙胆苦苷可增加大鼠胆汁分泌，促进胆囊收缩，增加胆汁流量[8]。

1.3 健胃作用 龙胆苦苷能通过直接刺激胃液和胃酸分泌，使胃液中游离酸含量提高，降低胃液pH值[9]。灌胃龙胆总苷，可以对抗阿托品引起的小鼠胃排空延迟和促进大鼠胃内固体及液体排空，并抑制大鼠胃液的总酸排出量及胃蛋白酶活性[10]。对大叶秦艽的抗胃溃疡作用研究发现，其乙醇提取物(石油醚脱脂)组分对阿司匹林及乙醇诱导大鼠模型的胃黏膜损伤有明显的抑制作用，并缩小溃疡面积。大剂量提取物可减少胃液和胃蛋白总量分泌[11]。

1.4 其他 对人肺腺癌细胞株A549，龙胆苦苷在体外具有一定的抑制作用[2]。研究龙胆苦苷等对SMMC-7721人肝癌细胞增殖的影响，结果显示龙胆苦苷对人肝癌细胞具有杀伤作用，可抑制人肝癌细胞的增殖[12]。龙胆苦苷能够清除自由基。龙胆苦苷在0.25～10.00g/L浓度范围内，随浓度的增加，清除氢氧自由基能力增强，清除率达40.74%～87.03%。有文献报道，龙胆苦苷的抗氧化活性RC50为0.075 g/L。龙胆总苷可能通过阻滞钙离子内流或抑制钙调素等钙离子结合蛋白，降低离体豚鼠回肠的自主收缩功能[13]。大鼠灌服龙胆煎剂，其体内糖酵解和脂肪利用受阻，机体能量代谢降低[14]。家兔静脉注射秦艽水煎醇沉液，血压下降，而心率未见明显变化[15]。小鼠腹腔注射苯巴比妥钠后，龙胆苦苷延长正常小鼠的睡眠时间，缩短翻正反射消失时间[16]。龙胆有利尿作用，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和变形杆菌均有不同程度的抑制作用[17]。

2 龙胆苦苷药动学研究概况

2.1 龙胆苦苷体外代谢研究 大鼠灌服龙胆苦苷后，第2天在血清中检测到龙胆碱和龙胆醛，而第3天龙胆苦苷的含量呈下降趋势；肠内菌体外培养液孵育龙胆苦苷，HPLC法测得龙胆苦苷含量的下降时，龙胆碱与龙胆醛含量的上升。研究结果表明，龙胆碱和龙胆醛是龙胆苦苷体内代谢的重要产物[18]。另外，研究龙胆苦苷的人肠内菌代谢产物，研究结果提出了龙胆苦苷肠内代谢的可能途径[19]，见图1。

2.2 龙胆苦苷在动物体内药动学研究

2.2.1 龙胆苦苷在家兔体内的药代动力学研究 健康家兔灌服秦艽提取液，龙胆苦苷在家兔的主要药代动力学参数Tmax，Cmax，t1/2，AUC分别为1.35h, 31.29μg·mL-1, 1.19h和99.5μg·h/mL。实验结果表明，龙胆苦苷口服给药半衰期短，平均滞留时间短[20]。健康家兔耳缘静脉注射秦艽水煎醇沉液，主要药动学参数：Tmax=0.083h，Cmax=45.1mg/L，V=1.312L/kg，CL=0.761L/(h·kg)，t1/2=1.195h，AUC(0→∞)=30.78mg/(L·h)。结果显示，龙胆苦苷的分布代谢为三房室模型，龙胆苦苷在体内分布容积大，分布消除迅速，再分布缓慢，能维持较长时间的治疗浓度[21]。

图1 龙胆苦苷人肠道菌代谢的可能途径

2.2.2 龙胆苦苷在大鼠体内的药代动力学研究 大鼠灌胃给予龙胆苦苷对照品、龙胆药材提取物、脂肝宁胶囊，药-时曲线均符合二房室模型。研究表明龙胆药材中的其他成分影响龙胆苦苷的药动学，而脂肝宁胶囊中其他药材不对龙胆苦苷的药动学产生影响[22]。大鼠肌肉注射龙胆苦苷后，龙胆苦苷在体内呈原形状态，在体内分布快，多数组织在3.5min达到较高浓度。肾脏中浓度较高，而脑组织中未检测到药物，在所研究的组织中(心、肝、脾、肾、肺、脑、胃、肠、骨骼肌、体脂、睾丸、子宫+卵巢)，未见明显的特殊蓄积现象[23]。大鼠静脉注射龙胆苦苷，其代谢模型符合二室模型，而口服给药龙胆苦苷、秦艽水煎剂和龙胆水煎剂后代谢模型均符合一室模型。与仅灌服龙胆苦苷相比，灌服秦艽水煎剂和龙胆水煎剂生物利用度提高，研究结果药材中其他成分促进了龙胆苦苷的吸收利用[24]。

2.2.3 龙胆苦苷在小鼠体内的药代动力学研究 小鼠灌服和静脉注射龙胆苦苷后，其分布代谢符合二室模型，半衰期分别为2.8h和6.1h。灌服龙胆苦苷，血浆中龙胆苦苷Tmax为0.5h，生物利用度为39.6%。研究表明，龙胆苦苷吸收快速，但生物利用度低；能分布于大部分组织，但是清除快速，平均滞留时间短。龙胆苦苷需要多次给药或者开发成缓控释制剂[25]。

2.2.4 龙胆苦苷在犬体内的药代动力学研究 Beagle犬静脉注射龙胆苦苷，其分布代谢符合一房室模型，半衰期t1/2为1.1324h，消除速率常数Ke为0.5811h-1，表观分布容积V为0.5316L/kg，消除率CL为0.3274L·kg-1·h-1。研究表明龙胆苦苷在体内迅速分布、消除，不易蓄积[26]。

2.3 龙胆苦苷在人体内药动学研究 12名健康受试者分别静脉滴注龙胆苦苷80、240、400mg，其半衰期t1/2分别为2.96、2.90、2.90h，消除速率常数k分别为0.25、0.26、0.25h-1; 3个剂量的平均25.5h累积尿排率为76.1%，其中0～7.5h占总排泄量的96.2%。结果表明龙胆苦苷静脉给药主要以原形经肾脏快速排泄，在80～400mg内呈线性药代动力学特征[27]。

3 结语

龙胆苦苷具有较好的抗炎镇痛、利胆保肝、健胃养胃等药理活性，在临床上龙胆类药材应用也较为广泛，因此龙胆苦苷具有良好的开发应用前景。但由于其水溶性较好，脂溶性差，影响透皮吸收和口服吸收。龙胆苦苷药代动力学研究表明其在体内半衰期短，生物利用度低，难以发挥长久的治疗作用。药物只有具有一定的脂溶性和水溶性才能透过生物膜进入体循环，才能更好的发挥药效作用。为了提高龙胆苦苷生物利用度，从制剂开发角度，应选择缓控释制剂，延长龙胆苦苷在体内滞留的时间；从前药设计或结构改造角度上来看，应增加龙胆苦苷脂溶性、提高渗透性，以改善油水分配系数而提高药物透过生物膜[28,29]，从而改善龙胆苦苷的吸收，增强其疗效。

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