高效液相色谱法测定咳喘舒片中盐酸麻黄碱的含量

孙景玲

(河北省唐山市丰南区稻地中心卫生院，河北 丰南 063300)

制剂与质量控制

高效液相色谱法测定咳喘舒片中盐酸麻黄碱的含量

孙景玲

(河北省唐山市丰南区稻地中心卫生院，河北 丰南 063300)

麻黄碱分析；色谱法，高压液相

咳喘舒片具有宣肺平喘、化痰止咳、养阴敛肺之功效。用于咳嗽气喘，阴虚痰阻证，表现为久病咳喘，干咳痰少，慢性支气管炎及哮喘见以上证候者。咳喘舒片由麻黄、蒲公英、紫苏子(去油)、浮海石、白前、麦门冬、紫菀、百合、甘草、白果(去壳)、罂粟壳、橘红12味中药组成。其中麻黄为君药，而盐酸麻黄碱又是麻黄的主要有效成分。现代药理研究表明，麻黄具有发汗散寒、宣肺平喘、利水消肿功效，多用于表证已解，气喘咳嗽[1]。因此，测定咳喘舒片中有效成分盐酸麻黄碱的含量对临床合理用药具有指导意义。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

1.1.1 仪器 高效液相色谱(Series Ⅲ液相色谱泵，Model 500检测器，Laballiance中文色谱工作站)；1/10万分析天平(德国METTLER T0LED0公司)。

1.1.2 试药 咳喘舒片[景忠山国药(唐山)有限公司，国药准字Z20025611，产品批号110601、110602、110603、110604、110605、111001、111002、111003、111004、111005]；盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号171241-201007，含量99.7%)；乙腈色谱纯(天津市四友精细化学品有限公司)、甲醇色谱纯(天津市四友精细化学品有限公司)、磷酸分析纯(北京化工厂)、中性氧化铝分析纯(上海纳辉干燥试剂厂，粒径为100～200目)，水为纯化水。

1.2 方法[1]

1.2.1 色谱条件 色谱柱：十八烷基键合硅胶Hypersil色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，测定波长 207nm，流动相：乙腈—0.1%磷酸溶液(5.2∶94.8)。

1.2.2 系统耐用性 分别采用不同高效液相色谱仪、不同色谱柱及流速的微小改变来考察系统的耐用性。

1.2.2.1 高效液相色谱仪变动 采用岛津LC-VP高效液相色谱仪、LC-10AVP泵、SPD-10AVP检测器。结果：盐酸麻黄碱峰与其他峰分离良好，保留时间适宜。

1.2.2.2 色谱柱变动 换用依利特色谱柱，类型为C18(ODS-BP)，粒径5μm，4.6mm×200mm。结果：盐酸麻黄碱峰与其他峰分离良好，保留时间适宜。

1.2.2.3 流速微小改变 将流速由1.0mL/min调至1.05mL/min。结果：盐酸麻黄碱峰与其他峰分离良好，保留时间适宜。

经上述试验，该系统在不同高效液相色谱仪、不同色谱柱及流速的微小改变下系统耐用性好。

1.2.3 溶液制备

1.2.3.1 对照品溶液制备 精密称取盐酸麻黄碱对照品10mg，置100mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取2mL，置25mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL含盐酸麻黄碱8μg)。

1.2.3.2 供试品溶液制备 麻黄碱易溶于甲醇、乙醚、氯仿，参照《中华人民共和国药典》2005年版一部[1]中麻黄含量的检测方法，使用甲醇进行超声提取，提取后溶液经过滤后较澄清，移取1mL经过中性氧化铝柱(100～200目，1.5g，内径1cm)，用50%甲醇洗脱，收集洗脱液约9mL，置10mL量瓶中，加磷酸1滴，用50%甲醇稀释至刻度，经测定分离度良好。供试品溶液制备方法：取咳喘舒片10片，除去包衣，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定质量，超声处理(功率16W，频率50kHz)45min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过。精密量取续滤液1mL，置中性氧化铝柱(100～200目，1.5g，内径1cm)上，用50%甲醇洗脱，收集洗脱液约9mL，置10mL量瓶中，加磷酸1滴，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

1.2.4 阴性干扰情况 取缺麻黄的阴性样品，按1.2.3.2项下色谱条件制成缺麻黄的阴性对照溶液。精密量取阴性对照溶液10μL进样，观察阴性对照溶液在盐酸麻黄碱峰的保留时间处是否有杂质峰。

1.2.5 线性关系考察 取浓度为2.02、4.04、8.08、12.12、16.16μg/mL盐酸麻黄碱对照品溶液，分别进样10μL，按1.2.1项下色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标绘制标准曲线。

1.2.6 精密度试验 取咳喘舒片10片，除去包衣，研细，取0.5g，按1.2.3.2项下方法制成供试品溶液。取同一供试品溶液，连续进样6次，每次10μL，测定盐酸麻黄碱峰面积，计算相对标准偏差(RSD)。

1.2.7 稳定性试验 将同一份供试品溶液于室温下放置，间隔一定时间测定一次峰面积，测定48h，记录盐酸麻黄碱峰面积，考察样品溶液的稳定性，计算RSD。

1.2.8 重复性试验 取同一批号咳喘舒片适量，研细，称取6份，精密称定0.5g，按1.2.3.2项下方法制成供试品溶液，按1.2.1项下色谱条件测定峰面积，计算RSD。

1.2.9 加样回收率试验 采用加样回收法，取已知含量的咳喘舒片(批号：110601，盐酸麻黄碱含量0.524%)，称取0.5g，精密称定，置50mL容量瓶中加入50%甲醇25mL，再分别精密加入1、2、3mL对照品溶液1.01mg/mL，超声提取45min，放冷，用50%甲醇定容，滤过。按1.2.3.2项下精密量取续滤液1mL开始进行处理，每个浓度制成3个样品，分别量取10μL进行测定，计算回收率。回收率=(测出盐酸麻黄碱总量-样品中盐酸麻黄碱的量)/添加盐酸麻黄碱的量×100%。

1.2.10 样品含量测定 取咳喘舒片10批，分别按1.2.3.2项下方法制成供试品溶液。按1.2.3.1项下方法制成盐酸麻黄碱对照品溶液。分别精密量取盐酸麻黄碱对照品溶液和供试品溶液各10μL，按1.2.1项下色谱条件测定，计算含量。

2 结 果

2.1 阴性干扰情况 阴性对照色谱图中，在盐酸麻黄碱峰保留时间处无其他干扰峰。见图1、2、3。

图1 缺盐酸麻黄碱的阴性对照品

图2 盐酸麻黄碱对照品

图3 供试品咳喘舒片

2.2 线性关系考察 将峰面积Y与相应的浓度进行回归处理，计算回归方程，Y=4507.314X-14774.7，r=0.998。测得盐酸麻黄碱浓度在2.02～16.16μg/mL范围呈良好的线性关系。见表1。

表1 线性关系考察

2.3 精密度试验 盐酸麻黄碱RSD=1.24%。表明仪器精密性良好。 见表2。

表2 精密度试验

2.4 稳定性试验 盐酸麻黄碱RSD=0.6%。表明样品室温48h内基本稳定。见表3。

表3 稳定性试验

2.5 加样回收率试验 盐酸麻黄碱平均回收率为98.95%，RSD=1.6%。说明回收率良好。见表4。

表4 加样回收率试验

2.6 重复性试验 盐酸麻黄碱平均含量为1.317mg/片，RSD=0.92%。重复性良好。见表5。

表5 重复性试验

2.7 样品含量测定 咳喘舒片10批的含量均在1.2～1.3mg/片之间。 见表6。

表6 样品测定

3 讨 论

咳喘舒片是景忠山国药(唐山)有限公司的产品，本研究为质量研究的一部分，通过对色谱条件、系统耐用性、阴性干扰情况、线性关系考察、精密度试验、溶液稳定性试验、重复性试验、加样回收试验及咳喘舒片样品实际含量测定表明，用高效液相色谱法测定咳喘舒片中盐酸麻黄碱的含量方法简便可行，从而为咳喘舒片中盐酸麻黄碱的含量控制提供了理论依据和方法基础。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典2005年版：一部[S].北京：化学工业出版社，2005：223-224.

(本文编辑：习 沙)

孙景玲(1970—)，女，主治医师。研究方向：内科。

R286.0；R972.5；R974.3

A

1002-2619(2014)10-1540-03

2014-02-08)