SPE-GC-μECD测定蔬菜中6种三唑类农药的残留量

2014-08-15徐颖洁

安徽农业科学 2014年18期

徐颖洁

(南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室，江苏南京 210095)

三唑类农药具有高效、广谱、长效、内吸性强以及立体选择性等特点。自第1个商品化的三唑类农药——三唑酮问世后，该类农药引起广泛关注并发展迅速，已有近30个品种商品化［1－4］。随着三唑类农药在蔬菜、水果中的施用量逐渐加大，由其残留引发的食品安全问题也越来越受到人们的广泛关注。美国、日本、欧盟等发达国家均已制定严格的最大残留限量标准并实施残留监控。特别是日本“肯定列表”制度实施后，我国出口日本的蔬菜中多次被查出三唑类农药残留超标，其中涉及氟硅唑、苯醚甲环唑、三唑醇等。

国内外虽然已有基于高效液相色谱法［5－8］、液相色谱－串联质谱法［9－11］、气相色谱法［12－13］、气相色谱－质谱法［14－20］等检测手段的三唑类农药残留检测的文献报道，但个别方法的检测限不能完全满足最高残留限量(MRL)要求;同时有些方法的检测技术和样品前处理技术相对落后。鉴于此，笔者以目前在蔬菜上广泛使用的6种三唑类农药(腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑和三唑醇)为研究对象，采用SPE-GC-μECD方法测定了萝卜、黄瓜、青菜中上述6种三唑类农药残留，以期为蔬菜中上述6种三唑类农药残留的检测提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验材料。萝卜、黄瓜、青菜样品购于超市。

1.1.2 试剂。乙腈:色谱纯;氯化钠:优级纯;无水硫酸钠:分析纯，用前在650℃灼烧4 h，贮于干燥器中，冷却后备用;正己烷:色谱纯;丙酮:分析纯，重蒸;Innovation Florisil固相萃取柱:6 ml，0.5 g，使用前需用5 ml正己烷活化，无锡科奥美萃生物科技有限公司生产;微孔滤膜:0.45 μm，有机相;腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇标准物质:纯度大于或等于99%，购于德国Dr.Ehrenstorfer公司。淋洗液:丙酮+正己烷(10+90，体积比);洗脱液:丙酮+正己烷(20+80，体积比)。

1.1.3 仪器。气相色谱仪:配有微电子捕获检测器(μECD)，美国Agilent公司生产;分析天平:感量为0.000 1 g和0.010 0 g。

1.2 方法

1.2.1 试样的提取。称取25 g试样(精确至0.01 g)于100 ml锥形瓶中，向锥形瓶中加入50 ml乙腈，将锥形瓶置于超声波清洗器中超声提取20 min，过滤，将滤液转移到100 ml具塞量筒中，加入5 g氯化钠，剧烈振荡3 min，静置30 min。准确移取10 ml上层清液，使之通过装有2 cm厚的无水硫酸钠层的滤纸进入100 ml锥形瓶Ⅱ，并用5 ml乙腈洗涤无水硫酸钠层，收集、合并乙腈于锥形瓶Ⅱ，于65℃水浴中氮气吹干，用2 ml淋洗液溶解残渣，待净化。

1.2.2 试样的净化。将待净化液转移至固相萃取柱中，调节装置使淋洗液流速约为2 ml/min，用12 ml淋洗液分3次洗涤锥形瓶Ⅱ，待液面到达固相萃取柱填料上层时，将洗涤液加入柱中，弃流出液。待液面到达固相萃取柱填料上层时，加入10 ml洗脱液，收集洗脱液于100 ml锥形瓶Ⅲ，于40℃水浴中用氮气吹干。用1.0 ml洗脱液溶解残渣，有机微孔滤膜过滤，待测。

1.2.3 气相色谱条件。色谱柱:石英毛细管色谱柱DB-1ms，30 m ×0.25 mm ×0.25 μm;柱温:150 ℃，保持 2 min，以5℃/min升温至220℃，再以20℃/min升温至300℃，保持4 min;进样口温度:250℃;检测器温度:320℃;载气:N2，纯度99.999%，流速1.2 ml/min;进样方式:分流进样，分流比40∶1;进样量:1.0 μl。

1.2.4 标准溶液的配制。分别称取腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇各标准物质约0.025 g(精确至0.000 2 g)于25 ml容量瓶中，加淋洗液超声振荡溶解，定容，摇匀，配制成单一标准溶液。

2 结果与分析

2.1 气相色谱条件的选择腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇6种农药的结构中均含有电负性原子，而微电子捕获检测器对含电负性原子的物质具有很强的响应。为了能实现较低的检测限，在该研究中选择微电子捕获检测器对腈菌唑等6种杀菌剂进行同时测定。

参考相关文献［13］，选用DB-1ms石英毛细管色谱柱作为腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇的分析测试色谱柱。为了保证6种三唑类农药合适的保留时间和较好的分离度，进行不同柱温的分离试验。通过不同柱温的分离试验，确定柱温条件为:150℃保持2 min，以5℃/min升温至220℃，再以20℃/min升温至300℃，保持4 min。该条件下，6种三唑类农药均达到基线分离，出峰时间在12～21 min，从而可有效避免样品中其他杂质的干扰。

在“1.2.3”色谱条件下，腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇的色谱及保留时间见图1。

图1 6种三唑类农药的气相色谱

2.2 标准曲线分别配制不同浓度的系列标准混合工作溶液，在“1.2.3”气相色谱条件下对系列标准工作溶液进行测定。由表1可知，6种三唑类农药的线性关系均良好。三唑酮、戊菌唑、三唑醇、腈菌唑、丙环唑和苯醚甲环唑的检出限分别为 0.013、0.013、0.210、0.057、0.010 和0.025 mg/kg。