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SPE-GC-μECD测定蔬菜中6种三唑类农药的残留量

2014-08-15徐颖洁

安徽农业科学 2014年18期
关键词:三唑酮甲环唑苯醚

徐颖洁

(南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京 210095)

三唑类农药具有高效、广谱、长效、内吸性强以及立体选择性等特点。自第1个商品化的三唑类农药——三唑酮问世后,该类农药引起广泛关注并发展迅速,已有近30个品种商品化[1-4]。随着三唑类农药在蔬菜、水果中的施用量逐渐加大,由其残留引发的食品安全问题也越来越受到人们的广泛关注。美国、日本、欧盟等发达国家均已制定严格的最大残留限量标准并实施残留监控。特别是日本“肯定列表”制度实施后,我国出口日本的蔬菜中多次被查出三唑类农药残留超标,其中涉及氟硅唑、苯醚甲环唑、三唑醇等。

国内外虽然已有基于高效液相色谱法[5-8]、液相色谱-串联质谱法[9-11]、气相色谱法[12-13]、气相色谱-质谱法[14-20]等检测手段的三唑类农药残留检测的文献报道,但个别方法的检测限不能完全满足最高残留限量(MRL)要求;同时有些方法的检测技术和样品前处理技术相对落后。鉴于此,笔者以目前在蔬菜上广泛使用的6种三唑类农药(腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑和三唑醇)为研究对象,采用SPE-GC-μECD方法测定了萝卜、黄瓜、青菜中上述6种三唑类农药残留,以期为蔬菜中上述6种三唑类农药残留的检测提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验材料。萝卜、黄瓜、青菜样品购于超市。

1.1.2 试剂。乙腈:色谱纯;氯化钠:优级纯;无水硫酸钠:分析纯,用前在650℃灼烧4 h,贮于干燥器中,冷却后备用;正己烷:色谱纯;丙酮:分析纯,重蒸;Innovation Florisil固相萃取柱:6 ml,0.5 g,使用前需用5 ml正己烷活化,无锡科奥美萃生物科技有限公司生产;微孔滤膜:0.45 μm,有机相;腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇标准物质:纯度大于或等于99%,购于德国Dr.Ehrenstorfer公司。淋洗液:丙酮+正己烷(10+90,体积比);洗脱液:丙酮+正己烷(20+80,体积比)。

1.1.3 仪器。气相色谱仪:配有微电子捕获检测器(μECD),美国Agilent公司生产;分析天平:感量为0.000 1 g和0.010 0 g。

1.2 方法

1.2.1 试样的提取。称取25 g试样(精确至0.01 g)于100 ml锥形瓶中,向锥形瓶中加入50 ml乙腈,将锥形瓶置于超声波清洗器中超声提取20 min,过滤,将滤液转移到100 ml具塞量筒中,加入5 g氯化钠,剧烈振荡3 min,静置30 min。准确移取10 ml上层清液,使之通过装有2 cm厚的无水硫酸钠层的滤纸进入100 ml锥形瓶Ⅱ,并用5 ml乙腈洗涤无水硫酸钠层,收集、合并乙腈于锥形瓶Ⅱ,于65℃水浴中氮气吹干,用2 ml淋洗液溶解残渣,待净化。

1.2.2 试样的净化。将待净化液转移至固相萃取柱中,调节装置使淋洗液流速约为2 ml/min,用12 ml淋洗液分3次洗涤锥形瓶Ⅱ,待液面到达固相萃取柱填料上层时,将洗涤液加入柱中,弃流出液。待液面到达固相萃取柱填料上层时,加入10 ml洗脱液,收集洗脱液于100 ml锥形瓶Ⅲ,于40℃水浴中用氮气吹干。用1.0 ml洗脱液溶解残渣,有机微孔滤膜过滤,待测。

1.2.3 气相色谱条件。色谱柱:石英毛细管色谱柱DB-1ms,30 m ×0.25 mm ×0.25 μm;柱温:150 ℃,保持 2 min,以5℃/min升温至220℃,再以20℃/min升温至300℃,保持4 min;进样口温度:250℃;检测器温度:320℃;载气:N2,纯度99.999%,流速1.2 ml/min;进样方式:分流进样,分流比40∶1;进样量:1.0 μl。

1.2.4 标准溶液的配制。分别称取腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇各标准物质约0.025 g(精确至0.000 2 g)于25 ml容量瓶中,加淋洗液超声振荡溶解,定容,摇匀,配制成单一标准溶液。

2 结果与分析

2.1 气相色谱条件的选择 腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇6种农药的结构中均含有电负性原子,而微电子捕获检测器对含电负性原子的物质具有很强的响应。为了能实现较低的检测限,在该研究中选择微电子捕获检测器对腈菌唑等6种杀菌剂进行同时测定。

参考相关文献[13],选用DB-1ms石英毛细管色谱柱作为腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇的分析测试色谱柱。为了保证6种三唑类农药合适的保留时间和较好的分离度,进行不同柱温的分离试验。通过不同柱温的分离试验,确定柱温条件为:150℃保持2 min,以5℃/min升温至220℃,再以20℃/min升温至300℃,保持4 min。该条件下,6种三唑类农药均达到基线分离,出峰时间在12~21 min,从而可有效避免样品中其他杂质的干扰。

在“1.2.3”色谱条件下,腈菌唑、戊菌唑、三唑酮、苯醚甲环唑、丙环唑、三唑醇的色谱及保留时间见图1。

图1 6种三唑类农药的气相色谱

2.2 标准曲线 分别配制不同浓度的系列标准混合工作溶液,在“1.2.3”气相色谱条件下对系列标准工作溶液进行测定。由表1可知,6种三唑类农药的线性关系均良好。三唑酮、戊菌唑、三唑醇、腈菌唑、丙环唑和苯醚甲环唑的检出限分别为 0.013、0.013、0.210、0.057、0.010 和0.025 mg/kg。

表1 6种三唑类农药的线性方程和相关系数

表2 样品中的添加水平、回收率和相对标准偏差

2.3 回收率和精密度 在不含6种待测三唑类农药的萝卜、青菜、黄瓜3种样品中添加6种三唑类农药,进行添加回收试验,添加3个浓度水平,每个浓度水平重复6次。由表2可知,该方法的平均加标回收率在72.90% ~98.80%,相对标准偏差范围在1.18% ~9.88%,符合农药残留检测标准。

3 结论

采用气相色谱测定蔬菜(萝卜、黄瓜和青菜)中腈菌唑等6种三唑类杀菌剂的残留量,该方法简便、快速、可操作性很强,准确度、精密度和灵敏度等指标均符合农药残留检测标准。该研究中建立的检测方法为蔬菜中腈菌唑等6种三唑类杀菌剂残留的检测提供了技术参考。

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