鸡减蛋综合症及其防控措施

2014-08-15潘礼斌

中国畜牧兽医文摘 2014年5期

关键词：尿囊产蛋量血凝

潘礼斌戈力

（安徽省芜湖市三山区动物卫生监督所，安徽芜湖 241080）

减蛋综合症又称产蛋下降综合症，是由腺病毒引起，以产蛋高峰期产蛋量下降，产畸形蛋、软壳蛋和无壳蛋为特征，临诊症状明显。1992年证实我国有该病的存在，给广大养殖户及养殖企业带来了巨大的经济损失，我国将其列为B类动物疫病，危害性非常严重。

1 病原体

引起本病的病原体是鸡减蛋综合症（EDS-76）病毒，为一种腺病毒，对鸡、火鸡及鸭的红细胞有凝集性。病毒存在于鸭体内及病鸡的输卵管、咽喉、粪便和蛋内，它不能使鸭、鹅发病，病毒对外界抵抗力较强。

EDS-76病毒粒子大小为76～80 nm，呈20面体对称，是无囊膜的双股DNA病毒，衣壳的结构，壳粒的数目等均具有典型腺病毒的特征，对乙醚不敏感，pH耐受范围广，如pH3～10的处理很稳定，60℃30 min丧失致病性，70℃20 min完全灭活，室温条件下，至少可存活6个月以上；0.1%甲醛48 h，0.3%甲醛24 h可使病毒灭活。

2 流行病学

2.1 易感动物

各种年龄的鸡对EDS-76病毒都易感。鸭、鹅是自然宿主。有报道珍珠鸡可被自然感染，并可产生软壳蛋，未见乌骨鸡、火鸡、雉鸡在自然条件下被感染。从某些野禽（白鹭、鲱鱼鸥、猫头鹰等）的血清血检出了EDS-76病毒抗体。产褐色壳蛋的肉用鸡的种母鸡最易感，产白色壳蛋的母鸡患病率低。在产蛋高峰期和接近产蛋高峰期发病高潮，其自然宿主是鸭或野鸭。

2.2 传播途径

（1）垂直传播：病毒可经种蛋垂直传染给下一代雏鸡，可在体内长期潜伏，一直到产蛋高峰期才发病。（2）水平传播：污染的饲料、饮水，经消化道感染健康鸡，传播缓慢。（3）疫苗传播：有些弱毒疫苗是由非特异性病原的鸡胚制作的，其中含有EDS-76，注射或饮水且易于传播本病，鸡鸭混养。（4）器具传播：注射针头也可以传播此病。

3 实验室检查

3.1 病料采集

采取病鸡的输卵管、泄殖腔、鼻黏膜、变性卵泡、无壳软蛋等作为被检材料，把组织磨碎制成乳剂，冻融3次，离心，取上清液，加入青霉素、链霉素各1 000 IU（μg）／ml，于4℃作用2 h，对其他病料作无菌处理后，供病毒分离和攻毒用。

3.2 病原的分离培养

（1）鸡胚接种：取处理过的病料接种9～12日龄鸭胚的尿囊腔，38℃继续孵育，弃去24 h内死胚，收获48～96 h存活的鸭胚尿囊液，将收获的鸭胚尿囊液继续接种10～12日龄鸭胚尿囊腔进行传代培养，每代鸭胚尿囊液都用鸡红细胞做血凝试验，检测尿囊液中的血凝素，即使对阴性尿囊液也应至少传2～3代。

（2）细胞培养：将病料接种于已长成单层的鸭胚成纤维细胞，37℃继续培养数日，观察致细胞病变效应（CPE）和核内包涵体，然后收获，反复冻融，做血清凝集试验，如无CPE，则应至少盲传2～3代，观察结果。

3.3 病毒的鉴定

（1）人工感染试验：用分离毒株接种无EDS-76抗体的产蛋鸡，可观察到与自然病例相同的症状及产蛋异常变化。

（2）血凝抑制试验：用已知EDS-76阳性血清与收获的HA阳性尿囊液做血凝抑制试验，检测病原体。

此外，免疫荧光试验和病毒中和试验也可用于病毒的鉴定。

3.4 血清学检查

3.4.1 血凝（HA）试验和血凝抑制（HI）试验

（1）HA试验：一般采用微量法，在微量凝集反应板上，从第2孔至11孔，用微量移液器每孔加生理盐水0.05 ml，第1、2孔分别加10倍稀释的病毒0.05 ml，从第2孔起，依次作倍数稀释，至第10孔，最后弃0.05 ml。每孔加入1%鸡红细胞悬液0.05 ml，设不加病毒的红细胞对照孔，立即在微量振荡器上摇匀，置室温（18℃～25℃）30 min左右观察结果，以使红细胞发生100%凝集的最高稀释度作为血凝价。

（2）HI试验：常采用微量法，血清直接在抗原中作倍数稀释。操作时先取4 IU抗原依次加入2～11孔，最后孔（12孔）加生理盐水或PBS。第1孔加8 IU的抗原，然后吸取待检血清0.05 ml最后孔中（血清对照），混合后吸0.05 ml于第1孔，依次倍比稀释至11孔，弃去0.05 ml，置室温（18℃～25℃）下作用10 min，再每孔加入1%鸡红细胞悬液0.05 ml，振荡混合静置30 min，判定结果。以完全抑制凝集的血清最大稀释度为该血清的HI滴度，每次测定应设已知滴度的标准阳性血清对照和4 IU病毒对照，待检血清的抑制价在8倍以上为阳性。

3.4.2 琼脂扩散试验

抗原的制备可将种毒经尿囊腔接种13～14日龄鸭胚，接种后96 h收集鸭胚尿液，经3 000 r/min离心30 min，取上清，加入甲醛使终浓度为0.2%，置37 ℃温箱中作用48 h后，经40 000 r/min离心2 h，弃上清，沉淀物按原液量的1／20加入灭菌生理盐水，用注射器充分吹打溶解，再经3 000 r/min离心20 min，取上清，将沉淀物再加少量灭菌生理盐水充分吹打离心，将每次离心的上清液混合在一起，用灭菌生理盐水补充到尿液的1/10量，作为琼扩抗原。琼脂板的制备，是在100 ml pH 5.6～6.4的PBS中加入氯化钠8 g、琼脂糖1 g、10%的硫柳汞0.1 ml，充分煮沸后，每个平皿注入18 ml，待琼脂自然凝固后，置普通冰箱中保存备用。试验时打孔经4 mm、孔间距3 mm的7孔梅花孔，中心孔加抗原，周围孔加待检血清、阴性血清和阳性血清，置温箱中，保持一定湿度，经24～48 h观察结果，抗原与待检血清间出现特异性沉淀线者，判为阳性。

3.4.3 其他血清学诊断方法

病毒中和试验也是比较敏感、特异的方法。EDS-76病毒能致CPE，并产生核内包涵体，这种作用可被特异性抗血清所中和，因此，本法也用于检验EDS-76病毒抗原或血清抗体。免疫荧光试验与HI试验一样敏感，操作方法同I型腺病毒的荧光诊断法。

4 病理变化

4.1 病理解剖学

病变不明显，产无壳蛋和异常蛋鸡有时可见输卵管、子宫粘膜肥厚，卵巢静止、不发育和输卵管萎缩，少数可见子宫水肿，腔内有白色渗出物或干酪样物，卵泡变性和出血现象，人工感染时可见脾充血、肿大，偶见子宫内有薄膜包裹的卵黄和少量水样蛋清。

4.2 病理组织学

输卵管和子宫黏膜明显水肿，腺体萎缩，并有淋巴细胞、浆细胞和异嗜白细胞浸润，在血管周围形成管套现象，上皮细胞变性坏死，在上皮细胞中可见嗜伊红的核内包涵体，子宫腔内渗出物中混有大量变性坏死的上皮细胞和异嗜性白细胞。少数病例可见卵巢间质中有淋巴细胞浸润，淋巴滤泡数量增多，体积增大，脾脏红、白髓不同程度增生。

5 临床症状

初产鸡群产蛋率上升到50%以后即开始出现症状，大多数发生在26～32周龄（此时正值产蛋高峰期），病鸡食欲、精神、粪便均正常，但输卵管中蛋壳分泌腺受病毒破坏，卵泡发育、排卵受影响，出现产蛋减少和蛋壳变劣，蛋的破损率高。开始发病时出现壳色变白，产蛋量减少，逐渐下降20%～40%，同时出现大量薄壳、软壳、无壳和畸形蛋。蛋壳表面粗糙呈砂纸样，正常蛋仅占70%左右，有些鸡还将所产的蛋吃掉，病程一般持续4～6周，随后逐渐恢复，约10周恢复正常，患病鸡的鸡蛋不宜作种蛋孵化。

EDS-76最初症状是有色蛋壳的色泽消失，紧接着产生薄壳、软壳或无壳蛋，薄壳蛋的壳质经常粗糙。病鸡群生产的外观正常的蛋受精率和孵化率均呈现显著异常，种鸡群发生EDS-76时，种蛋的孵化率降低，同时出现弱雏。发病鸡群的产蛋量突然下降，产蛋量下降通常发生于产蛋高峰期前后，产蛋量下降可达20%～50%，持续期为4～10周左右，产蛋量的恢复十分缓慢。有的早期感染EDS-76的鸡群出现产蛋期推迟，产蛋率上升缓慢，且达不到产蛋高峰应有的产蛋量。褪色的薄壳蛋、脆壳蛋往往出现在产蛋减少前24～48 h，借此特征症状区别于其他病因引起的产蛋减少症。

6 诊断

根据临床症状、实验室检查和病理变化综合诊断。另外，要做好与以下疾病的鉴别诊断。

传染性支气管炎：引起产蛋下降的同时有呼吸道症状，产畸形小蛋，而减蛋综合症产薄壳蛋、软壳蛋和无壳蛋，易于区别。

非典型新城疫：在产蛋减少的同时，出现消化道症状，如下痢、全群采食减少，有个别死亡现象，剖检死鸡，消化道出血，产出的蛋苍白，而无软壳和无壳蛋。

维生素和矿物质缺乏：产蛋减少和蛋壳变劣为逐渐发生，改善饲料5～7 d后即可恢复正常，而减蛋综合症则持续4～6周。

传染性脑脊髓炎、鸡败血支原体病及包涵体性肝炎等也可引起产蛋下降综合症，在临床实践中应予以注意。

7 防治

本病无特异性治疗方法，只能对症治疗，可适当添加微量元素和维生素，可促进其产蛋恢复。预防接种是防制本病的根本措施，可用减蛋综合症油乳剂苗在120日龄与传染性支气管炎苗、新城疫苗同时注射免疫，如为种鸡，为确保其免疫效果：可在70日龄先免疫1次减蛋综合症油乳剂苗，再在120日龄免疫1次。在进行其他弱毒苗免疫时，应选用无其他特殊病原（SPF），尤其是不含减蛋综合症病毒的疫苗，饲养管理上应注意鸡、鸭、鹅不能混养，搞好平时的卫生消毒工作。