恒河猴婴猴离乳阶段行为观察及分析

李艳艳，陈丽雄，乞素冬，王俊斌，杨凤梅，赵 远，鲁帅尧，禹文海，和占龙

(中国医学科学院 北京协和医学院 医学生物学研究所，云南省重大传染病疫苗研发重点实验室，昆明 650118)

恒河猴属非人灵长类动物，其在亲缘关系上和人类非常接近，与人类的遗传物质同源性高达75%～98.5%，由于其在遗传学、生理学、解剖学和代谢等方面与人类高度相似，因而为人类心脑血管、神经系统、生殖系统、传染性疾病等的研究提供了理想的模型动物。另外，非人灵长类动物是开展实验心理研究的良好素材，通过对猕猴、猩猩等的情绪与个性特征研究，有助于理解人类情绪[1]。近年来国内外有关于大鼠、小鼠断奶期间行为变化及抑郁症方面的研究和报道较多[2-3]，对恒河猴，金丝猴行为学及情绪方面的研究也有相关报道[4-5]。本文通过对离乳后的人工饲养期婴猴的行为进行观察及分析，旨在了解婴猴离乳期的行为特点，探讨婴猴早期断奶后心理和行为的变化及可能的机制，指导和提高婴猴断奶期间的饲养管理水平，同时为研究人类婴幼儿早期断奶后心理和行为的变化，开展心理学、行为学等方面的评估实验提供研究思路和模型。

1 材料和方法

1.1 研究对象

动物来源： 2012年出生的婴猴共290只，其中雄性147只，雌性143只，实验动物生产许可证号: SCXK(滇)2010-0006；实验动物使用许可证号: SYXK(滇)2010-0009。在出生后4～5个月离乳，随机分笼，每笼2只。一日五餐，自由饮水，另外添加水果及牛奶。温度在18℃～25℃之间，湿度控制在40%～70%之间，满足基本的动物福利要求。

1.2 研究方法

采用随意取样和时间记录法[6]，于每天上午9:00～10:00，下午2:00～3:00，晚上8：00～9：00之间，由2名实验人员分别观察和记录出现的全部行为，将记录的结果进行分析和汇总，试验期为6个月。

1.3 数据统计学分析

应用 SPSS 17.0统计软件进行方差分析，P< 0.05为差异显著，具有统计学意义。

2 结果

2.1 婴猴的行为分类

在整个观察期间共出现7种行为，分别为团抱、吸手指、吸同伴身体、踱步、吸生殖器、爬跨动作、吸脚趾。离乳后1个月，出现团抱(团抱个体占婴猴总数的比例为17.24%)、吸手指(2.76%)、吸同伴身体(0.69%)3种行为。团抱及吸手指行为在第2、3个月均显著增加(P< 0.05)，在随后的4～6月增加较平稳，无显著性差异；吸同伴身体的行为于2月显著上升(P< 0.05)，3～6月虽有增加趋势，但差异不显著。第2个月，新增踱步(0.34%)、吸生殖器(1.37%)、爬跨动作(3.45%)行为。踱步、吸生殖器的行为于第3个月显著上升(P< 0.05)，3～6月无显著差异；爬跨行为随时间的延长稍有增加，但无明显变化。吸脚趾行为(0.69%)出现在离乳后第3个月，其比例未随时间的变化而发生改变。至第6个月，各行为的比例分别为59.31%、11.03%、5.86%、1.38%、3.45%、4.14%、0.69%(图1)。

注：同种行为各月间比较，标记中不含相同字母表示差异显著(P < 0.05)。

2.2 团抱行为

Wada等[7]将团抱行为定义为非人灵长类动物在休息或睡眠过程中，个体间通过相互拥抱、挤坐及其它肢体接触而形成组合单位的一类行为。本研究中随机分组为雌-雄同笼(53笼)、雌-雌同笼(49笼)、雄-雄同笼(43笼)3种情况，整个观察阶段出现雌-雄团抱、雌-雌团抱、雄-雄团抱3种模式，雄-雄同笼的婴猴团抱行为发生率显著低于另外两种模式，雌-雌同笼团抱发生率与雌-雄同笼比较，1月差异不显著，2～6显著高于雌-雄同笼(P< 0.05)。雌-雌团抱第1个月发生率为19.44%，且2、3月显著升高(P< 0.05)，3～6无显著变化，第6个月发生率为83.33%；离乳后1个月，雌-雄团抱发生率为18.75%，于2、3月显著增加(P< 0.05)，3～6月呈上升趋势，但差异不显著，6月增加至53.75%；雄-雄团抱发生率在第2月显著增加，且3～6月显著高于1、2月(P< 0.05)，3～6月变化不显著(图2)。

注：同种系列各月间比较，* P < 0.05；相同月份各系列间比较，# P < 0.05。

2.3 吸手指行为

雌性，雄性婴猴均于离乳第1个月出现吸手指行为，其发生率分别为2.80%，2.72%，差异不显著；雌、雄性婴猴该行为发生率均随时间的变化而增加，2月雌性婴猴显著低于雄性，3～6月雌性婴猴均显著高于雄性(P< 0.05)。雌性婴猴发生率于2、3月显著增加(P< 0.05)，3～6月有增加趋势，但无显著差异，第6个月雌性婴猴的发生率为13.29 %；第2、3个月雄性婴猴吸手指行为的发生率较1月显著增加(P< 0.05)，3～6月改变不明显(图3)。

注：同种系列各月间比较，* P < 0.05；相同月份各系列间比较，# P < 0.05。

2.4 吸同伴身体部位的行为

吸同伴身体部位的行为包括吸食同伴的耳朵、颊囊、手臂、肚皮，生殖器等。离乳后第1个月即观察到该种行为，且1至6个月雌性婴猴出现该行为的比率均显著高于雄性(P< 0.05)。雌性该行为发生率在1月(1.41%)至6月(9.09%)逐月显著增加(P< 0.05)；雄性婴猴于第2个月发生该行为(2.04%)，随时间改变发生率稍有上升，无显著差异(图4)。

注：同种系列各月间比较，* P < 0.05；相同月份各系列间比较，# P < 0.05。

注：同种系列各月间比较，* P < 0.05；相同月份各系列间比较，# P < 0.05。

2.5 爬跨行为

在离乳后第2个月出现爬跨行为并伴有臀部冲刺动作，分为雌-雄异性爬跨，雄-雄同性爬跨两种情况，异性爬跨发生率(10.03%)显著高于同性爬跨(6.79%)(P< 0.05)；在3月同性爬跨发生率显著增加至13.79%，3～6月的观察阶段各发生率未发生明显改变，同性爬跨显著高于异性爬跨(P< 0.05)(图5)。

2.6 踱步行为

雄性、雌性婴猴分别于第2、3个月出现踱步行为，整个观察阶段雄性婴猴的发生率均显著高于雌性婴猴(P< 0.05)，如图6所示。雄性婴猴该行为的发生率于3月显著上升至2.04%，且显著高于雌性婴猴的发生率(P< 0.05)。

2.7 吸脚趾行为

雌性、雄性婴猴均在第3个月出现吸脚趾行为，其发生率(0.70%，0.68%)无显著性差异，且未随时间的延长而发生明显改变(图7)。

3 讨论

行为对一个物种个体的生存、交流、建立社会关系以及维持种群发展都具有重要的作用[8]。婴幼儿阶段是个体发育的最初阶段，这一时期，婴幼儿的行为经历了从无到有、从简单到复杂的过程，神经系统和心理也得到不断的发育。研究婴幼儿行为发生对研究成年个体行为和群体行为有重要意义[9]。母婴分离是人 类生命早期应激事件，发生于生命早期的负性应激事件与个体成年期抑郁症的发生密切相关，国内外大多研究认为母婴分离能够对新生儿的神经系统发育产生重大影响[10]，动物研究也证实，早期不良应激如母爱剥夺可诱发个体焦虑，精神分裂，抑郁样行为[11]等。本研究中，对离乳后的婴猴行为进行为期6个月的观察记录，观察到团抱、踱步、吸脚趾、吸手指、吸生殖器、吸同伴身体，爬跨等7种行为。

团抱行为在非人灵长类中广泛存在，在环境和社会因素的影响下，会呈现出多种模式。经观察发现，离乳后第1月即出现团抱行为，在7种行为中发生率最高，可能是婴猴通过团抱来缓解因对新环境存在恐惧而产生胁迫感。婴猴团抱时会用手轻轻地拍同伴的背部，并伴有上半身前后摇摆，类似于人类安抚情绪的拥抱。推测，团抱行为除了具有保持体温、预防天敌等作用外，可能也是一种传递感情的方式。冯晓丽[12]等将这种下肢不动，上半身前后运动的行为定义为刻板行为。前3个月，出现团抱行为的婴猴个体显著增加，4～6月趋于平稳。雌性同笼的个体团抱行为发生率显著高于异性同笼，异性同笼显著高于雄性同笼。提示恒河猴婴猴发生团抱行为可能受到性别的影响，本结果与齐晓光[13]的报道一致。

注：同种系列各月间比较，* P < 0.05；相同月份各系列间比较，# P < 0.05。

注：同种系列各月间比较，* P < 0.05；相同月份各系列间比较，# P < 0.05。

吸脚趾、吸手指、吸生殖器、吸同伴身体可归类为吮吸行为。婴幼儿阶段吮吸需求非常强烈。当吮吸需求得不到满足，家庭破裂等造成的心理紧张，抑郁症等都会引起婴幼儿异常的吮吸行为。本文中婴猴出现了多种吮吸行为，这可能与生活环境改变，同时母爱被剥夺两种因素对婴猴的情绪及心理造成严重的冲击，婴猴以吮吸这种异常的行为作为心理防卫机制，来缓解内心的焦虑。每种行为在整个观察阶段都呈逐渐增加的趋势，雌性婴猴吸同伴身体及吸手指的行为显著高于雄性婴猴，得出雌性婴猴更易发生吮吸行为，可能是雌性更易受到负性应激的影响。

有报道称，川金丝猴婴猴在4月龄时就出现了爬跨行为。本文中发现恒河猴婴猴在离乳后第2个月，即约7月龄时出现爬跨行为，表现为雌雄异性、雄雄同性爬跨。雄性婴猴采取双手放在被爬跨者的腰部，双脚扣住被爬跨者的脚踝的姿势，伴有臀部冲刺动作，这与任宝平的观察结果相一致[14]。这种发生在婴幼年动物之间的爬跨行为，是无目的、不具有繁殖意义的行为。

离乳后第2个月观察到部分雄性婴猴来回沿着相同的路线踱步，无目的的不断重复，雄性婴猴较雌性婴猴更易发生踱步。可能与离乳对婴猴的情绪造成负面影响有关[15-16]。

母爱剥夺可导致恒河猴行为异常[17]，主要表现为自伤行为，刻板行为等抑郁样行为。刻板行为包括来回踱步，吮吸手指或脚趾，紧紧抓住自己身体的某一部位，身体来回摇晃等[12]。这与本研究观察到的结果基本一致。出现此种行为可能与以下几种机制有关。Kraemer[18]发现，幼儿时期的猕猴在不良生长环境饲养，会改变其内分泌，从而影响了其成年后的性格和行为。大量研究表明生命早期的母婴分离可引起幼儿出现抑郁样行为，而抑郁症神经内分泌的改变表现为下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)功能亢进，从而改变垂体促肾上腺皮质激素和血浆皮质醇的合成与释放，引起一系列的神经生化改变，同时对大脑边缘系统造成器质性损害，尤其是损害海马结构，增加行为的异常[19]。其次，生命早期丰富环境能促进脑发育与脑功能，对神经和内分泌系统产生持久的影响，而早期应激将影响关键时期脑发育，持续改变大脑结构和内分泌等指标，限制海马神经的发生。脑源性神经营养因子(BDNF) 减少，5-羟色胺(5-HT)及5-羟色胺受体在大脑海马中的表达减少，引起海马抑制HPA轴活性的功能失效[20]，使HPA轴活性长期改变是导致经历母婴分离动物出现行为异常的主要原因。本研究中发现雌性婴猴更易发生刻板行为，这与临床报道的女性更容易抑郁相符。可能是因为在负性应激情况下雌激素影响下丘脑-垂体-肾上腺轴的平衡，使女性HPA轴活性增强，肾上腺过度增生，肾上腺皮质激素浓度上升[21]。另有研究发现血小板内5-羟色胺浓度有性别差异，女性低于男性，这是否是引起是雌性婴猴更易发生刻板行为的另一个原因，还需进一步的研究证实[22]。

动物行为及行为的机制是了解生物学组成部分、生理学、组织形态学、生态学、遗传学和进化论等学科所必不可少的知识。通过对人工饲育恒河猴婴猴离乳阶段的行为观察和分析，初步获得和了解其一些常见的行为特点及规律。报道称生命早期应激可能影响成年后抑郁症的发生，关于婴猴成年后其行为是否会发生变化还有待进一步研究。本研究初步探讨了婴猴离乳后出现异常行为的可能机制，不仅可以指导和提高婴猴断奶期间的饲养管理技术，同时也为研究人类婴幼儿早期断奶后心理和行为的变化，开展心理学、行为学等方面的评估实验提供较好的研究思路和模型。

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